8. ĐỊNH TÍNH O
738.2 Phản ứng với acid
8.2. Phản ứng với acid
+ HCl + H2SO4 AC → đỏ (chỉ thị màu) flavon, flavonol → vàng sậm, cam (huỳnh quang !) chalcon → mất màu (flavanon) isoflavon isoflavanon → vàng LAC → đỏ (AC) - flavanon - catechin - LAC - chalcon - auron → cam → đỏ
8.3. Phản ứng Cyanidin (Shinoda, Shibata, Pew) a. với Mg* / HCl đ.đặc Flavon(ol), Flavanon(ol) Chalcon b. với Zn* / HCl đ.đặc
Chỉ Flavanonol → đỏ đậm / magenta Flavanon → không màu / hồng nhạt
đỏ đậm / magenta
→ AC, màu đỏ Flavonoid bột Mg, Zn
75Lắc sản phẩm của phản ứng Cyanidin với octanol Lắc sản phẩm của phản ứng Cyanidin với octanol
- dạng glycosid : dịch màu đỏ / lớp EtOH (dưới) - dạng aglycon : dịch màu đỏ / lớp octanol (trên)
PHÂN BIỆT GENIN / GLYCOSID *
octanol
glycosid aglycon
8.4.1. Với d.dịch FeCl3 loãng
Flavonoid + FeCl3 → phức xanh (nâu, lá, đen).
- để sơ bộ nhận định số lượng nhóm OH / phân tử. - càng nhiều OH (đ.biệt là o-di-OH): màu càng đậm
- các dẫn chất 3',4',5' tri-OH : tạo màu xanh đen
8.4. Phản ứng tạo phức màu với muối kim loại
OO O OH HO OH OH OH OH O O OH HO OH OH
778.4.2. Với dd. acetat chì : Tạo phức tủa có màu 8.4.2. Với dd. acetat chì : Tạo phức tủa có màu
- dd. acetat chì kiềm : → tủa vàng nhạt đến sậm với hầu hết các flavonoid (và cả các polyphenol)
- dd. acetat chì trung tính: → tủa vàng nhạt đến sậm với các flavonoid có ortho-di-OH phenol.
Màu tủa thay đổi tùy số lượng và vị trí các nhóm thế.
8.4.3. Với dung dịch AlCl3 / ROH
- Là thuốc thử tăng màu (shift reagent), dùng để khảo sát cấu trúc flavonoid bằng quang phổ UV.
- dựa vào Δλmax, → số lượng & vị trí các nhóm -OH / khung.
Chú ý : Thuốc thử này chỉ quan sát rõ dưới UV 365 nm. Dưới ánh sáng thường: không thấy rõ sự th.đổi
8.4.4. Với thuốc thử Martini-Bettòlo (SbCl5 / CCl4) flavon → tủa màu vàng đến cam
79Flavonoid / Na2CO3 + th’.thử diazonium → đỏ cam / đỏ Flavonoid / Na2CO3 + th’.thử diazonium → đỏ cam / đỏ 8.5. Phản ứng với thuốc thử diazonium
(hay dùng p-nitroanilin đã được diazo-hóa)
các flavonoid (+) khi
- có H ortho hay para / -OH
- H này không bị cản trở lập thể
OO O OH OH OH HO H H 7 6 8
- Khi có -OH /C7 → sẽ ghép vào vị trí 6 hay 8. - không đặc hiệu : (+) với nhiều polyphenol khác.