PAMAM G3.0 (0,0929 g) DMF (10 mL) Hòa tan 4 × 0,7 g MPEG-NPC Thời gian 26 ngày, khí N2 Phản ứng
Diethyl ether Kết tủa, lọc, sấy
chân không
VH2O=100.Vmẫu Thời gian 72 giờ Thẩm tách, sấy
chân không
Hòa tan 0,0970 g (7,46.10-4 mol) 5-fluorouracil (5-FU) trong 10 mL nước, sau đó cho từ từ 0,4283 g (7,41.10-6 mol) PAMAM G3.0-MPEG vào, tỉ lệ mol 5-FU : PAMAM G3.0-MPEG =100:1. Việc gắn thuốc được tiến hành ở nhiệt độ phòng trong 24 giờ. Sau đó thẩm tách dung dịch thu được 2 lần với túi thẩm tách MWCO 10000D trong điều kiện VH2O thẩm tách : Vmẫu =100:1 , mỗi lần 20 phút, để loại 5-FU dư không nang hóa. Dung dịch sau thẩm tách được làm khô nước, thu được sản phẩm dạng bột màu trắng ngà.
Lượng 5-FU nang hóa trong cấu trúc PAMAM G3.0-MPEG được tính toán gián tiếp thông qua nồng độ 5-FU tự do không nang hóa xác định bằng phương pháp đo độ hấp thu A ở bước sóng 265,5 nm. Mẫu trắng là nước cất.
3.3.4 Khảo sát nhả thuốc in vitro trong môi trường nước
Hòa tan 0,2606 g PAMAM G3.0-MPEG-5-FU (mang 0,0164 g hay 1,26.10-4 mol thuốc 5-FU ) trong 10 mL nước cất. Sau đó cho mẫu vào túi thẩm tách MWCO 3500-5000D. Tiến hành thẩm tách trong 1000ml nước cất, VH2O thẩm tách : Vmẫu =100:1. Trong 6 giờ đầu, mỗi giờ lấy mẫu 1 lần, mỗi lần lấy 10 mL mẫu nước thẩm tách bên ngoài túi rồi thêm vào lại 10 mL nước cất mới. Trong thời gian khảo sát tiếp theo, 24 giờ lấy mẫu 1 lần. Nồng độ 5-FU khuếch tán ra khỏi cấu trúc PAMAM G3.0-MPEG đi ra bên ngoài túi thẩm tách được xác định bằng phương pháp đo độ hấp thu A ở bước sóng 265,5 nm. 0,0970 g (7,46.10-4 mol) 5-FU