+ Xác định nồng độ enzyme và thời gian
Hình 2.5 Sơ đồ thí nghiệm xác định nồng độ enzyme chitinase và thời gian thủy phân
Dựa trên thông tin được cung cấp từ nhà sản xuất SIGMA-ALDRICH, nhiệt độ để enzyme chitinase hoạt động thích hợp là 370C, tại pH = 6. Căn cứ vào
Nồng độ enzyme chitinase (%) 1 1.5 2 2.5 Thời gian (h) 115 115 115 115 Nhiệt độ: 370C pH = 6 Chitosan Hòa tan Thủy phân Đun cách thủy Lọc Kết tủa Ly tâm Sấy lạnh COS
Kiểm tra hiệu suất
phương pháp thăm dò cổ điển kết hợp với công trình nghiên cứu của Aiba và Muraki (1996) về hemicellulase thủy phân chitosan. Trong công đoạn khảo sát ảnh hưởng của nồng độ enzyme đến quá trình thủy phân, tác giả tiến hành khảo sát nồng độ [E] từ 1÷3% so với dung dịch chitosan được hòa tan trong acid acetic loãng. Chúng tôi tiến hành khảo sát ở nồng độ enzyme từ 1÷2.5% với bước nhảy là 0.5. Song hành với nồng độ, cho chạy thời gian là 5 ngày (115h) để đánh giá song song
sự ảnh hưởng của nồng độ enzyme và thời gian đến quá trình thủy phân. Để chọn
thông số thủy phân thích hợp, ta tiến hành kiểm tra độ nhớt thường xuyên và căn cứ vào hiệu suất của quy trình.
Xác định nhiệt độ thủy phân
Hình 2.6: Sơ đồ thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân
Nồng độ enzyme: 2% pH = 6 Chitosan Hòa tan Thủy phân t = 320C t = 370C t = 420C t = 470C Đun cách thủy
Xác định nhiệt độ thủy phân thích hợp COS
Kiểm tra hiệu suất :
Căn cứ vào phương pháp thăm dò cổ điển kết hợp với thông số nhiệt độ được nhà cung ứng cung cấp về enzyme chitinase thủy phân chitosan. Trong công đoạn khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ đến quá trình thủy phân, ta bố trí 5 mẫu ở 5 nhiệt độ khác nhau, xoay quanh nhiệt độ tối ưu được nhà cung ứng đưa ra với bước nhảy bằng 5, tiến hành khảo sát nhiệt độ từ 32÷520C. Để chọn thông số thủy phân thích hợp, ta tiến hành kiểm tra độ nhớt thường xuyên và căn cứ vào hiệu suất của quy trình.