- Acid acetic lạnh, nguyờn chất
2. Qua quỏ trỡnh nghiờn cứu, chỳng tụi thấy rằng tiờu bản nờn được cố
định bằng Bouin trước khi thực hiện nhuộm Masson. Nếu bệnh phẩm đó được cố định từ trước bằng formol 10% thỡ mảnh cắt nờn được cố định lại bằng Bouin với thời gian là 1giờ ở nhiệt độ 56oC. Như thế, tiờu bản sẽ rừ ràng hơn độ tương phản của cỏc thành phần.
Ngoài ra, chỳng tụi nhận thấy cú thể thay thế Light green cho Blue aniline. Mặc dự Light green nhuộm màu collagen kộm tương phản và kộm rừ nột hơn Blue aniline nhưng vẫn cú thể chấp nhận được nếu như Labo khụng cú Blue aniline.
A. TIẾNG VIỆT
1. Quốc Bảo, Website: benhhoc.com/content/1270-xo-gan.html, đăng vào 31-08-2008 02:30 PM.
2. Huy Hà, website://phapluattp.vn/20121219123220332p1060c1104/virus- viem-gan-lay-nhiem-gap-50-lan-hiv.htm, Tạp chớ sức khỏe- Sức khỏe, truy cập 19/12/2012 - 07:30.
3. Nguyễn Thị Hải (2007), “Kỹ thuật và yếu tố ảnh hưởng tới nhuộm ba màu của Masson trờn mảnh cắt”, Khúa luận Cử nhõn kỹ thuật y học.
4. Nguyễn Văn Huyền (2010), “Đỏnh giỏ sự ảnh hưởng của vị trớ đỳc và cắt mảnh bệnh phẩm đến kết quả chẩn đoỏn mụ bệnh học”, Khúa luận Cử nhõn kỹ thuật y học.
5. Nguyễn Đức Thỏi (2008), “Kỹ thuật chuyển đỳc cắt nhuộm và cỏc yếu tố ảnh hưởng”, Khúa luận Cử nhõn kỹ thuật y học.
6. Nguyễn Phương Thảo (2010), “So sỏnh kết quả nhuộm ba màu bằng Blue aniline và Light green trờn mảnh cắt u xơ tuyến vỳ”, Khúa luận Cử nhõn kỹ thuật y học.
7. Trường Đại học Y Hà Nội, Bộ mụn Mụ- phụi học (2006), Mụ học, Nhà xuất bản Y học, trang: 38- 42, 180- 181.
8. Trường Đại học Y Khoa, Bộ mụn Giải phẫu bệnh (1976), “Kỹ thuật hiển vi thụng thường”, Nhà xuất bản Y học Hà Nội.
9. Trường Đại học Y Hà Nội, Bộ mụn Giải phẫu bệnh, Giải phẫu bệnh, Nhà xuất bản Y học.
Sobin, MD, Laboratory Methods in Histotechnology, pp: 142-146. 11. John D. Bancroft, Marilyn Gamble (2002), Theory and practice of
histological techniques, pp: 139-153.
12. Gustayson, K. H (1957), Connective tissue; a symposium. R. E. Tunbridge Oxford.
13. Michalany J. (1985), Pierre Masson: master and friend. Am J Dermatopathol, pp: 145-149.
14. Moore S, Seemayer T A, Tremblay G, The career and influence of Pierre Masson (1880-1959), Int J Surg Patholol, pp: 231-236.
ĐẶT VẤN ĐỀ...5
CHƯƠNG 1...7
TỔNG QUAN TÀI LIỆU...7
1.1. Giải phẫu, mụ học và tế bào học bỡnh thường của gan...7
1.1.1. Giải phẫu gan...7
1.1.2. Mụ học gan bỡnh thường...7 1.2. Bệnh xơ gan...8 1.3. Vài nột về mụ liờn kết...9 1.4. Sợi collagen...9 1.4.1. Collagen type 1...10 1.4.2. Collagen type 2...10 1.4.3. Collagen type 3...10 1.4.4. Collagen type 4...10 1.4.5. Collagen type 5 và 6...10
1.5. Phương phỏp nhuộm ba màu của Masson...11
1.5.1. Lịch sử phương phỏp nhuộm ba màu của Masson...11
1.5.2. Cơ chế nhuộm...11
1.5.3. Húa chất dựng trong phương phỏp nhuộm ba màu Masson...12
1.6. Pha húa chất...16
1.6.1. Dung dịch Hematoxylin Ferric...16
1.6.2. Dung dịch Fuchsin – Ponceau...16
1.6.3. Dung dịch acid Phosphomolybdic 1%...16
- Nước cất...16
1.6.4. Dung dịch Blue aniline...16 - Blue aniline...16 2,5g...16 - Acid acetic...16 2,5ml...16 - Nước cất...16 100ml...16
1.6.5. Dung dịch acid acetic 1%...16
- Nước cất...16
- Acid acetic...16
1.6.6. Dung dịch cố định Bouin...16
- Dung dịch acid picric bóo hũa...17
75ml...17
- Formol...17
20ml...17
- Acid acetic lạnh, nguyờn chất...17
5ml [8]...17
1.7. Tiến hành...17
1.8. Tiến hành quy trỡnh nhuộm...19
1.8.1. Quy trỡnh nhuộm...19
1.8.2. Kết quả chung...19
CHƯƠNG 2...21
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨU...21
2.3.1. Tiờu chuẩn chọn mẫu...21
2.3.2. Cỡ mẫu...21
2.4. Phương phỏp nghiờn cứu...21
2.4.1. Thiết kế nghiờn cứu...21
2.4.2. Phương phỏp lấy mẫu...21
Cỏc bloc chỳng tụi nghiờn cứu đều đó được cố định bằng formol 10%...22
2.4.3. Phương tiện nghiờn cứu...22
2.5. Đỏnh giỏ kết quả nghiờn cứu...22
2.5.1. Tiờu chuẩn đỏnh giỏ chất lượng tiờu bản...23
2.5.2. Tiờu chuẩn đỏnh giỏ tiờu bản đạt yờu cầu...23
CHƯƠNG 3...24
KẾT QUẢ NGHIấN CỨU...24
3.1. Đỏnh giỏ kết quả thực hành kỹ thuật...24
3.2. Cỏc yếu tố liờn quan ảnh hưởng tới kết quả thực hành...26
CHƯƠNG 4...36
BÀN LUẬN...36
4.1. Kết quả thực hành...36
4.2. Cỏc yếu tố liờn quan...38
KẾT LUẬN...41
Từ kết quả quỏ trỡnh nghiờn cứu, chỳng tụi rỳt ra một số kết luận sau đõy:...41
KIẾN NGHỊ...42 Từ kết quả nghiờn cứu, chỳng tụi xin được đưa ra một vài kiến nghị với hy vọng sẽ nõng cao được phần nào chất lượng của một tiờu bản nhuộm
yếu tố kỹ thuật của người kỹ thuật viờn là yếu tố rất quan trọng. Cỏc yếu
tố kỹ thuật bao gồm cỏc bước liờn hoàn: chuyển, đỳc, cắt, nhuộm...43
2. Qua quỏ trỡnh nghiờn cứu, chỳng tụi thấy rằng tiờu bản nờn được cố định bằng Bouin trước khi thực hiện nhuộm Masson. Nếu bệnh phẩm đó được cố định từ trước bằng formol 10% thỡ mảnh cắt nờn được cố định lại bằng Bouin với thời gian là 1giờ ở nhiệt độ 56oC. Như thế, tiờu bản sẽ rừ ràng hơn độ tương phản của cỏc thành phần...43
Ngoài ra, chỳng tụi nhận thấy cú thể thay thế Light green cho Blue aniline. Mặc dự Light green nhuộm màu collagen kộm tương phản và kộm rừ nột hơn Blue aniline nhưng vẫn cú thể chấp nhận được nếu như Labo khụng cú Blue aniline...43
TÀI LIỆU THAM KHẢO...6
DANH MỤC BẢNG...7
DANH MỤC BIỂU ĐỒ...7
DANH MỤC HèNH...8 TÀI LIỆU THAM KHẢO
Bảng 2.2. Bảng tiờu chuẩn tiờu bản đạt yờu cầu...23
Bảng 3.1: Kết quả thực hành thỏng thứ nhất...24
Bảng 3.2: Kết quả thực hành thỏng thứ hai...24
Bảng 3.3: Kết quả thực hành thỏng thứ ba...25
Bảng 3.4: Kết quả thực hành thỏng thứ tư (13 case)...25
Bảng 3.5. Bảng kết quả chất lượng tiờu bản cú và khụng cố định bằng Bouin...26
Bảng 3.6: Bảng kết quả nhuộm sợi collagen bằng Blue aniline và Light green...27
Bảng 3.7. Bảng kết quả khi biệt húa bằng Acid acetic 1% và...27
khụng biệt húa bằng Acid acetic 1%...27
DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1: Đỏnh giỏ tổng quan chất lượng tiờu bản sau cỏc thỏng...26
Hỡnh 1.2: Một phần tiểu thựy gan cổ điển...8
Hỡnh 1.3: Hỡnh thỏi bề mặt gan xơ...9
Hỡnh 1.4: C.L Pierre Masson...11
Hỡnh 1.5: Cụng thức của Hematoxylin...12
Hỡnh 1.6: Cấu trỳc acid Fuchsin...13
Hỡnh 1.7: Cấu trỳc Ponceau de xylindine...13
Hỡnh 1.8: Cấu trỳc acid Phosphomolybdic...14
Hỡnh 1.9: Cấu trỳc Blue aniline...14
Hỡnh 1.10: Cấu trỳc acid acetic...15