- Acid acetic lạnh, nguyờn chất
4.1.Kết quả thực hành
Qua quỏ trỡnh nghiờn cứu chỳng tụi nhận thấy rằng tỷ lệ tiờu bản được đỏnh giỏ là đẹp tăng lờn một cỏch rừ rệt từ thỏng thứ nhất (23,8%) đến thỏng thứ tư (55,1%), tỷ lệ tiờu bản chưa đạt cũng giảm xuống một cỏch rừ rệt từ thỏng thứ nhất (28,6%) đến thỏng thứ tư (2,6%). Ở thỏng đầu tiờn, do kỹ thuật cũn chưa tốt nờn số lượng tiờu bản chỳng tụi cắt nhuộm được khụng nhiều, cú 42 tiờu bản trong đú tỷ lệ tiờu bản đẹp thấp (chiếm 23,8%), tỷ lệ tiờu bản đạt (47,6%), tỷ lệ tiờu bản chưa đạt cao (28,6%). Cỏc lỗi thường gặp nhất trong thỏng đầu tiờn là cỏc lỗi liờn quan tới vấn đề kỹ thuật như tiờu bản thường bẩn, bọt nước, gấp, rỏch, xước, mất mụ, độ dày mỏng khụng đều, nhuộm kộm. Cú nhiều nguyờn nhõn dẫn tới cỏc lỗi thường gặp ở thỏng thứ nhất. Tiờu bản bẩn thường do cỏc nguyờn nhõn như bệnh phẩm cắt bị nỏt vụn do kỹ thuật cắt chưa tốt bỏm lờn lam kớnh, lamen kớnh bị nấm, mốc hoặc gắn baume chưa tốt làm cho baume dớnh lờn mặt kớnh, cũng cú thể do cặn thuốc nhuộm gõy ra. Những tiờu bản bẩn khi chỳng tụi quan sỏt trờn kớnh hiển vi sẽ thấy cỏc mảnh vụn mụ, cỏc hạt màu đen bỏm trờn tiờu bản, cỏc đỏm cặn màu đỏ hồng, cỏc vết baume nham nhở. Tuy ớt ảnh hưởng tới kết quả chẩn đoỏn nhưng tiờu bản bẩn gõy mất tớnh thẩm mỹ, tạo cảm giỏc khụng thoải mỏi khi bỏc sĩ đọc tiờu bản. Để khắc phục những yếu tố trờn, theo chỳng tụi phải chuẩn bị tốt hơn
cho thực hành kỹ thuật như: chuẩn bị dao sắc, sạch, khụng xước, khụng mẻ, chuẩn bị mỏy cắt tốt bằng cỏch tra dầu, vặn chặt cỏc ốc vớt, bloc khụng được để nhiệt độ quỏ lạnh hoặc quỏ núng. Ngoài ra, lamen kớnh và lam kớnh phải được lau sạch sẽ, khụng bẩn, khụng ẩm mốc. Cỏc tiờu bản bị ỏm nước hay bị bọt nước ớt gặp hơn. Nguyờn nhõn gõy ra hiện tượng này do quỏ trỡnh gắn lamen, nếu tiờu bản lấy từ xylen III ra khụng khớ quỏ lõu hoặc khụng khớ ẩm cao làm tiờu bản dễ bị ỏm nước. Phần bị ỏm nước khi soi trờn kớnh thường thấy mờ ảo như 1 làn sương mỏng. Tiờu bản bị bọt nước thấy trờn kớnh hiển vi là cỏc giọt nước với kớch thước to nhỏ khỏc nhau. Nguyờn nhõn là do kỹ thuật chưa tốt. Để khắc phục lỗi này, chỳng ta phải làm tốt ở khõu loại nước bằng cồn tuyệt đối sau khi nhuộm. Hơn nữa, Xylen phải đảm bảo sạch, khụng bị lẫn nước. Trong trường hợp những khõu trờn tốt, nhưng do thời tiết quỏ ẩm ướt thỡ đũi hỏi thao tỏc phải thật nhanh, gọn ở bước loại nước bằng cồn tuyệt đối để đưa nhanh tiờu bản vào bể Xylen, trỏnh tiếp xỳc với mụi trường.
Trong quỏ trỡnh nghiờn cứu chỳng tụi thấy lỗi hay gặp nhất là tiờu bản bị gấp, xước, rỏch, mất mụ, độ dày mỏng khụng đều. Cỏc tiờu bản bị gấp xảy ra thường do dao cựn, nhiệt độ bloc cao, bệnh phẩm cứng hay do quỏ trỡnh tói chưa tốt. Cũn cỏc tiờu bản bị xước phần lớn là do dao cắt gõy ra như dao cựn, xước hoặc trờn dao dớnh bụi đều cú thể là nguyờn nhõn làm xước tiờu bản. Ngoài ra cũn do paraffin cú sạn, hoặc bệnh phẩm cú cỏc dị vật như chỉ khõu, ghim kim loại, hoặc do tớnh chất của bệnh phẩm. Chỳng tụi nhận thấy rằng, mụ gan sau quỏ trỡnh chuyển đỳc trong paraffin thường trở nờn cứng, giũn, mà đặc biệt để ở nhiệt độ quỏ lạnh trước khi cắt. Hơn nữa nếu dao khụng tốt thỡ tiờu bản bị mất mụ là điều dễ hiểu. Để khắc phục hiện tượng trờn, trong trường hợp bloc quỏ cứng, giũn thỡ sau khi cắt phỏ lấy mặt phẳng nờn ngõm vào trong nước lạnh hoặc nước ở nhiệt độ phũng để bệnh phẩm mềm hơn, dễ cắt hơn. Một lỗi kỹ thuật hay gặp nhất trong cỏc tiờu bản chưa đạt yờu cầu là
lỗi tiờu bản dày- mỏng khụng đều. Nguyờn nhõn là do trong thỏng đầu tiờn chưa thành thạo về kỹ thuật nờn việc cắt tiờu bản chưa tốt, tay quay chưa đều, bệnh phẩm cứng.... Khi quan sỏt trờn kớnh hiển vi trờn cựng một tiờu bản nhưng cú những vị trớ bắt màu đậm nhạt khụng đều nhau, chỗ đậm, chỗ nhạt. Qua kết quả thỏng thứ nhất, chỳng tụi nhận thấy phần lớn số tiờu bản bị ảnh hưởng bởi quỏ trỡnh cắt mảnh là chớnh, cỏc bước tiếp theo của quy trỡnh cú ảnh hưởng nhưng ớt hơn.
Cỏc thỏng thứ hai, thứ ba tỷ lệ cỏc tiờu bản đẹp tăng lờn. Tuy nhiờn, vẫn tồn tại tỷ lệ tiờu bản chưa đạt. Tỷ lệ tiờu bản đẹp tăng lờn do quỏ trỡnh thực hành kỹ thuật tốt hơn (tăng 37,0% từ thỏng thứ hai lờn 45,5% thỏng thứ ba). Số lượng tiờu bản cắt được cũng nhiều hơn từ 54 tiờu bản thỏng thứ hai lờn thỏng thứ ba là 66 tiờu bản. Cỏc lỗi vẫn cũn tồn tại, chủ yếu là liờn quan tới cỏc thao tỏc kỹ thuật. Chỳng tụi nhận thấy rằng, tuy vẫn cũn tỷ lệ tiờu bản chưa đạt nhưng đó giảm hơn một nửa so với thỏng thứ nhất (28,6% thỏng thứ nhất giảm xuống cũn 10,6% thỏng thứ ba) cho thấy sự tiến bộ và thành thạo trong cỏc thao tỏc kỹ thuật của chỳng tụi.
Kết quả của thỏng thứ tư cho thấy đó cú sự tiến bộ một cỏch rừ rệt khi số tiờu bản đẹp chiếm tỷ lệ cao (55,1%), tiờu bản đạt yờu cầu (42,3%), tiờu bản chưa đạt yờu cầu rất thấp chỉ cũn 2,6%. Số lượng tiờu bản cắt nhuộm được cũng nhiều hơn hẳn là 78 tiờu bản. Chỳng tụi thấy, ở thỏng thứ tư đó khắc phục được hầu hết cỏc lỗi thường gặp ở cỏc thỏng trước bao gồm: tiờu bản bẩn, gấp, rỏch, xước, mất mụ, tiờu bản dày, tiờu bản độ dày mỏng khụng đều. Một số tiờu bản chỳng tụi thực hiện cắt mảnh chưa thực sự đều tay hoặc bệnh phẩm cứng khiến mảnh bệnh phẩm dày, bắt màu đậm hơn so với cỏc mảnh cắt khỏc cựng nhuộm trong một giỏ và cựng một quy trỡnh nhuộm.