Nghieđn cứu ạnh hưởng cụa cadmi (Cd 2+) leđn chư sơ phađn bào nguyeđn

CHƯƠNG 3 KÊT QUẠ NGHIEĐN CỨU VÀ BÀN LUN

3.1. Nghieđn cứu ạnh hưởng cụa cadmi (Cd 2+) leđn chư sơ phađn bào nguyeđn

nguyeđn nhim và sai hình nhim saĩc theơ ở tê bào lympho người phơi nhim

in vitro lieău đơn.

3.1.1 Chư sơ phađn bào nguyeđn nhim ở tê bào lympho xử lý cadmi lieău đơn.

Nghieđn cứu nhaỉm khạo sát khạ nng gađy đc tê bào cụa cadmi. Lối hiu ứng được sử dúng đeơ đánh giá tính gađy đc tê bào là sự giạm chư sơ phađn bào

nguyeđn nhieêm in vitro.

Theo thiêt kê cụa thí nghim, lieău lượng cadmi được sử dúng naỉm trong giới hán từ 0.05 – 2.00 µg/ml. Như vy, nêu sử dúng cùng dung dịch mé thì sẽ xạy ra tình tráng ạnh hưởng cụa pH ở vùng lieău cao (cadmi được bạo quạn trong HNO3 0.1 M).

Đeơ giạm thieơu ạnh hưởng cụa HNO3 0.1M, thí nghim được thực hin với 2 noăng đ gơc cadmi 1000 µg/ml và cadmi 100 µg/ml. Do đĩ, các caịp noăng đ hơn kém nhau 10 laăn đeău cĩ cùng lượng HNO3 0.1M (ví du:ï noăng đ 0.05 µg/ml cũng cĩ lượng HNO3 giơng như noăng đ 0.5g/ml... (bạng3.1)).

Chư sơ phađn bào nguyeđn nhim (MI) = %Sơ mitose / (lympho + mitose). Chư sơ phađn bào nguyeđn nhim được tiên hành khạo sát tređn tât cạ các noăng đ thí nghim.

Nguyeên Thị Phương Trang

Tieđu bạn cụa mi lốt thí nghim được quét 3 đường (2 ngang 1 dĩc hoaịc 2 dĩc 1 ngang) baỉng vt kính 40x. Sơ liu thơng keđ kêt quạ khạo sát chư sơ phađn bào nguyeđn nhim được ghi nhn tređn bạng 3.1.

Bạng 3.1. Sơ kiu khạo sát chư sơ phađn bào nguyeđn nhim cụa tê bào lympho tređn h thơng thử nghim máu tồn phaăn xử lý lieău đơn cadmi.

Lốt Noăng đ Cd (µg/ml) Theơ tích xử lý (ml) Lượng HNO3 0.1M (µl) tê bào

mitose Chư sô mitose 1 2 3 4 5 6 7 1 0 5 0 2772 66 2.370.08 2 0.05 5 2.5 1865 45 2.24 0.08 3 0.10 5 5.0 1952 38 1.950.06 4 0.20 5 10 2161 40 1.860.07 5 0.50 5 2.5 3222 50 1.560.07 6 1.00 5 5.0 2103 28 1.330.06 7 2.00 5 10 2061 31 1.200.05

Tređn bạng 3.1, ct 4 chư lượng dung dịch HNO3 cĩ cadmi được sử dúng. Như vy, tồn b thiêt kê thí nghim cĩ 2 tp hợp lượng HNO3. Theo đĩ, cĩ theơ so sánh caịp noăng đ cadmi hơn kém nhau 10 laăn đeơ đánh giá ạnh hưởng cụa pH. Nêu chư do ạnh hưởng cụa pH thì sơ liu veă chư sơ phađn bào nguyeđn nhim sẽ phại giơng nhau theo caịp giữa 2 và 5; 3 và 6; 4 và 7.

Kêt quạ thực tê thu được như sau: các lốt thí nghim cĩ lượng HNO3 giơng nhau (2 so với 5; 3 so với 6 và 4 so với 7) cho thây chư sơ phađn bào nguyeđn nhim cĩ sự khác nhau rõ rt (2.24% so với 1.56%; 1.95% so với 1.33%; 1.86%

Nguyn Thị Phương Trang

so với so với 1.20%). Sự sai khác chư sơ sơ phađn bào nguyeđn nhim ở các caịp so sánh chứng tỏ chúng khođng phú thuc vào noăng đ HNO3.

Bieơu thị cụa mơi quan h chư sơ phađn bào nguyeđn nhim với noăng đ cadmi được theơ hin tređn bieơu đoă hình 3.1.

0 0.5 1 1.5 2 2.5 1 2 3 4 5 6 7

Hình 3.1: Bieơu đoă chư sơ phađn bào nguyeđn nhim cụa tê bào lympho máu ngối vi xử lý đơn cadmi.

Tiêp túc xem xét vai trị cụa cadmi, kêt quạ khạo sát cho thây lieău đơn cadmi ít ạnh hưởng đên chư sơ phađn bào nguyeđn nhim. Với mău được xử lí ở noăng đ Cd 0.05g/ml, nuođi cây 48h được ghi nhn haău như khođng sai lch so với đơi chứng (2.37%  0.08 >< 2.24%0.08).

Bạng 3.1 cũng chư ra raỉng cadmi khođng ạnh hưởng nhieău đên chư sơ phađn bào nguyeđn nhim. Kêt quạ này giơng với tác đng cụa As 5+ hơn là với As3+. Đơi với cadmi, chư sơ phađn bào nguyeđn nhim phú thuc vào sự tng noăng đ mt cách chm cháp trong khoạng noăng đ dưới 0.1µg/ml.

Nguyn Thị Phương Trang

Chư sơ phađn bào nguyeđn nhim giạm ở noăng đ 0.5g/ml và đát LD50 ở noăng đ gaăn baỉng 2.00g/ml (bạng 3.1).

3.1.2 Sai hình nhim saĩc theơ ở tê bào lympho xử lý cadmi lieău đơn. Thiêt kê thí nghim với tê bào lympho trong máu tồn phaăn được xử lý bởi các noăng đ cadmi 0µg/ml, 0.05 µg/ml và 0.1 µg/ml, thời gian xử lý 180 phút, thời gian nuođi cây 48h nhaỉm đánh giá khạ nng gađy toơn thương phađn tử ADN trực tiêp cụa cadmi.

Phoơ sai hình NST phát hin được chư goăm kieơu đa tađm và mạnh khođng tađm (hình 3.2 và hình 3.3)

Hình 3.2: Sai hình đa tađm phát hin ở toơ hợp 3

Hình 3.3: Sai hình minute phát hin ở toơ hợp 3

Kêt quạ phađn tích sai hình kieơu nhim saĩc theơ đã xác định được taăn sơ sai hình đa tađm và mạnh khođng tađm tương ứng ở các lieău xử lý 0 µg/ml; 0.05 µg/ml và 0.10 µg/ml là 0 và 0; 0 và 0; 0.1% và 0.19%.

Nguyn Thị Phương Trang

Tuy cĩ sự sai khác veă taăn sơ sai hình NST giữa các mău xử lý noăng đ Cd khác nhau nhưng kêt quạ này khođng đụ sức thuyêt phúc veă khạ nng tự gađy toơn thương phađn tử ADN dăn dên sai hình NST cụa cadmi trong khoạng noăng đ 0 – 0.1 µg/ml. Đieău này được giại thích là do taăn sơ 0.1% đơi với sai hình đa tađm và 0.19% đơi với sai hình mạnh khođng tađm văn naỉm trong khoạng sai hình ngău nhieđn được cođng bơ tređn thê giới cũng như cođng bơ nm 1995 cụa Traăn Quê.

Đieău đĩ cũng cĩ nghĩa taăn sơ sai hình ở đađy khođng đụ cơ sở đeơ khẳng định khạ nng gađy toơn thương chui đođi cụa lieău đơn cadmi trong giới hán từ 0.05g/ml đên 0.10g/ml.

Như vy, kêt quạ cho thây cadmi thuc nhĩm chât hĩa hĩc khođng gađy toơn thương chui đođi trực tiêp, cĩ nghĩa trong tình tráng đơn thì tự nĩ khođng gađy sai hình nhim saĩc theơ ở chu kỳ phađn bào đaău tieđn.