- ðộ c tố Verotoxin Vt2e và yếu tố bám dính F
3.4.Kết quả xác ñị nh serotype của vi khuẩn E.coli phân lập ñượ c
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.4.Kết quả xác ñị nh serotype của vi khuẩn E.coli phân lập ñượ c
Vi khuẩn E. coli gồm nhiều serotype O khác nhau, mỗi serotype lại gây các thể bệnh khác nhau. Vì vậy, sau khi xác ựịnh ựược 63 mẫu bệnh phẩm của lợn phù ựầu do vi khuẩn E. coli mang ựồng thời 2 gen quy ựịnh kháng nguyên F18 và ựộc tố VT2e, chúng tôi tiến hành ựịnh type vi khuẩn bằng phản ứng ngưng kết nhanh trên phiến kắnh. Kết quả nghiên cứu ựược trình bày ở bảng 3.5 và bảng 3.6.
Bảng 3.5. Kết quả xác ựịnh serotype của vi khuẩn E. coli phân lập ựược
Serotype
địa phương
Số mẫu O139:K82 O138:K81 O141:K85ac
Không thuộc serotype xác ựịnh Hà Nội 14 7 1 1 5 Bắc Ninh 7 2 1 2 2 Bắc Giang 11 4 0 2 5 Phú Thọ 11 5 0 2 4 Hải Dương 4 2 0 1 1 Thái Bình 7 3 0 1 3 Hà Nam 4 2 0 1 1 Nam định 5 2 1 1 1 Tổng 63 27 3 11 22
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 44
Bảng 3.6. Tỷ lệ các serotype của vi khuẩn E. coli phân lập ựược Số mẫu kiểm tra Serotype Số mẫu dương tắnh Tỷ lệ (%)
O139:K82 27 42,86 O138:K81 3 4,76 O141:K85ac 11 17,46 63 Không thuộc serotype xác ựịnh 22 34,92
Qua kết quả trên bảng 3.5 chúng tôi cũng nhận thấy: Serotype O139 có ở tất cả các tỉnh, ựặc biệt serotype O138:K81 chỉ tìm thấy ở một số tỉnh, các chủng chưa ựịnh ựược typ còn rất nhiều. điều ựó cho thấy ở các vùng ựịa lý khác nhau có sự khác nhau về tỷ lệ serotype O. điều này rất có ý nghĩa cho việc sản xuất các chủng vacxin phòng bệnh sưng phù ựầu cho các ựịa phương ựể ựạt ựược hiệu quả cao hơn.
Kết quả nghiên cứu ựược trình bày trên bảng 3.6 cho thấy: Trong tổng số 63 chủng vi khuẩn E. coli phân lập ựược có 3 serotype gây bệnh chủ yếu là: O138:K81, O139:K82, O141:K85ac. Trong ựó, vi khuẩn E. coli gây bệnh phù ựầu chủ yếu thuộc serotype O139:K82 chiếm 42,86%, tiếp theo là serotype O141:K82ac chiếm 17,46% và O138:K81 chiếm tỷ lệ thấp nhất. Bên cạnh ựó, theo kết quả nghiên cứu của chúng tôi, còn một tỷ lệ khá lớn các chủng E. coli
phân lập ựược không thuộc các serotype gây bệnh phổ biến chiếm tới 34,92%. Kết quả của nghiên cứu này cũng phù hợp với một số nghiên cứu ựã ựược tiến hành trước ựây. Theo Nguyễn Ngọc Hải và cộng sự năm 2000, khi tìm hiểu nguyên nhân của hội chứng thần kinh phù mắt ở lợn sau cai sữa ựã xác ựịnh các
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 45 typ kháng nguyên của 70 gốc E. coli bao gồm: O138: K81; O139: K82; O141: K85ac; K88, K87. Khi nghiên cứu và phân lập các chủng E.coli ở Miền đông Nam Bộ, Tô Minh Châu và cộng sự (1999) cũng cho kết quả tương ựồng với kết quả của chúng tôi, serotype chủ yếu là O139 chiếm 23,25%, số chủng không xác ựịnh ựược serotype lên tới 46,59%.
Nguyễn Khả Ngự (2000), khi xác ựịnh serotype O của một số chủng
E.coli phân lập ựược ở lợn sau cai sữa ở khu vực ựồng bằn sông Cửu Long cho rằng: Trong 11 serotype ựã xác ựịnh có O26 chiếm tỷ lệ cao nhất 27,8%, tiếp theo là O139 chiếm 13,9%. Kết quả của chúng tôi cho thấy serotype O139 có tỷ lệ cao nhất trong các chủng phân lập ựược, còn nghiên cứu của Nguyễn Khả Ngự (2000) thì serotype O139 có tỷ lệ ở vị trắ thứ 2.
Biểu ựồ 3.5. So sánh tỷ lệ các serotype của vi khuẩn E. coli phân lập ựược
Sự phân bố và tần suất xuất hiện các chủng vi khuẩn ở các vùng có thể khác nhau, biến ựộng từ vùng này sang vùng khác theo thời gian. Theo Imberechts và cộng sự (1994) tại Bỉ, những vi khuẩn E. coli có yếu tố bám dắnh F18 chủ yếu thuộc các serotype O139 và O141, trong ựó serotyoe O139 chiếm
4,76% 42.86% 42.86% 34.92% 17,46% O139:K82 O138:K81 O141:K85ac
Không thuộc serotype
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 46 78,1%. Tại Ba Lan, tất cả các vi khuẩn E. coli gây phù ựầu ựều thuộc các chủng O138, O139 và O141 (Osek và cộng sự, 1990) và ựây cũng là những chủng phổ biến ở Thụy điển. Kết quả nghiên cứu của Brestchinger (1990) khi tiến hành ở Thuỵ điển cũng cho thấy serotype O139 là chủ yếu chiếm tỷ lệ cao nhất tới 78,1% Tuy nhiên, chủng O139 (phổ biến trên thế giới) lại không tìm thấy ở Tây Ban Nha (Blanco và cs, 1997). Tại đan Mạch, Aaestrup và cộng sự (1997) tìm thấy 95% các vi khuẩn phân lập ựược thuộc chủng O139. Trong một nghiên cứu khác tại đan Mạch (Frydendahl và cs, 2002), các vi khuẩn E. coli sản sinh ựộc tố VT2e thuộc chủng O139 (41,6%) và O138 (47,2%), những vi khuẩn không thuộc type O chiếm tỷ lệ rất nhỏ. Gần ựây, chủng O147 ựược xác ựịnh như một serotype chủ yếu gây sưng phù ựầu lợn tại Iowa của Mỹ (Helgerson và cs, 2006). Những nghiên cứu của Da Silva và cộng sự (2001) tại Brazil cũng cho thấy có tới 48% các chủng E. coli mang yếu tố ựộc lực VT2e không thuộc các serotype phổ biến hoặc không xác ựịnh ựược serotype. điều ựó cho thấy ở các vùng ựịa lý khác nhau có sự khác nhau về tỷ lệ serotype O.
Do số chủng E. coli không thuộc type kháng nguyên O nào hoặc chưa xác ựịnh ựược serotype chiếm tỷ lệ cao (37,93%) nên việc xác ựịnh serotype của vi khuẩn E. coli hiện nay không có nhiều ý nghĩa trong chẩn ựoán bệnh. Người ta nghiên cứu nó ựể góp phần làm rõ hơn ựặc ựiểm dịch tễ về sự phân bố các serotype của vi khuẩn E. coli ở từng vùng.
3.5. Xác ựịnh khả năng mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn E. coli phân lập ựược