4. KẾT QUẢ NGHIÍN CỨU VĂ THẢO LUẬN
4.6.2.Tính chịu hạn của câc dòng, giống ñược phât hiện với câc chỉ thị RM250, RM270, RM221 vă RM
RM270, RM221 vă RM167
Câc tính trạng số lượng liín quan ñến khả năng chịu hạn của lúa như: tổng số rễ, thể tích rễ, số chồi, tỷ lệ rễ/chồi, chiều dăi rễ tối ña, bề dăy rễ, trọng lượng khô của rễ, ñộ cuốn của lâ lúa ñược rất nhiều tâc giả nghiín cứu.
Theo nghiín cứu ñịnh vị locus của một số tính trạng hình thâi ở lúa cạn của tâc giả Nguyễn Thị Kim Liín từ quần thể RDB09 x R2021, ñê lập ñược bản ñồ liín kết phđn tử dựa văo chỉ thị AFLP vă SSR , kết hợp với câc số liệu phđn ly kiểu hình ñê ñịnh vị ñược một số locus tính trạng hình thâi quan trọng trong việc ñânh giâ tính chịu hạn ở lúa cạn; ñê xâc ñịnh ñược 12 QTL, trong ñó có 2 QTL kiểm soât tính trạng chiều cao cđy trín NST số 1, 2 QTL kiểm soât tính trạng số nhânh trín NST số 3 vă NST số 6, 1QTL kiểm soât tính trạng số lượng rễ trín NST số 3, 3 QTL kiểm soât tính trạng ñộ dăi rễ trín NST số 2 vă số 12, 2 QTL kiểm soât tính trạng tỷ lệ khối lượng khô của rễ/thđn vă 2 QTL kiểm soât tính trạng tỷ lệ khối lượng khô của rễ sđu/thđn nằm trín NST số 2 vă số 9, ñặc biệt lă xâc ñịnh ñược 2 vùng QTL kiểm soât tính trạng số nhânh trín NST số 6 vă 1 QTL kiểm soât tính trạng ñộ dăi rễ trín NST số 12.
Kết quả trong phđn tích QTL trong nghiín cứu trín cho thấy câc QTL ñược xâc ñịnh có liín kết với câc chỉ thị SSR, vì vậy có thể sử dụng câc chỉ thị năy như những chỉ thị trong chọn dòng, giống chịu hạn.
Dựa trín kết quả nghiín cứu trín, trong thí nghiệm năy, chúng tôi sử dụng 5 mồi SSR lă RM250, RM270, RM167, RM221, RM242 liín kết với một số tính trạng hình thâi rễ có lợi cho tính chịu hạn [34][73]. Trong ñó, RM250, RM270 liín kết với ñộ dăi rễ, RM167 liín kết với tính trạng tỷ lệ khối lượng rễ/thđn, RM221 liín kết với tính trạng rễ sđu/thđn, RM242 liín kết với tính trạng tỷ lệ rễ/thđn.
Chúng tôi tiến hănh chạy PCR với câc cặp mồi trín vă ñều cho ña hình rõ rệt. Câc cặp mồi RM242 vă RM221 cho ña hình nhiều nhất, mỗi mồi tổng số có 6 alen. Tiếp ñó lă RM167 cho 3 alen, hai cặp mồi còn lại chỉ cho 2 alen.
Trường ðại học Nông nghiệp Hă Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 85
Hình 2. Sản phẩm PCR với mồi RM 221 vơi 21 giống lúa thí nghiệm trín gel polyacrylamide: 1-21: giống G1-G21; M. Marker
Từ hình trín cho thấy câc giống G6, G8, G10, G11, G12, G13, G14, G15 vă G18 ñều xuất hiện band giống với ñối chứng G17 tại locus RM221.
Hình 3. Sản phẩm PCR với mồi RM 242 với 21 giống lúa thí nghiệm trín gel polyacrylamide: 1-21: giống G1-G21
Câc giống G5, G6, G9, G12, G14, G16, G18 vă G19 xuất hiện band giống với giống ñối chứng G17 tại locus RM242.
Hình 4. Sản phẩm PCR với mồi RM 167 với 21 giống lúa thí nghiệm trín gel polyacrylamide: 1-21: giống G1-G21 1 1 22 33 44 55 66 77 88 99 1100 1111 1122 1133 1144 1155 1166 1177 1188 1199 22002211 2211 1 1 22 33 44 55 66 77 88 99 11001111 1122 1133 1144 1155 1166 1177 1188 11992200 2211 MM 1 1 22 33 44 55 66 77 88 99 1100 1111 1122 1133 1144 1155 1166 1177 1188 1199 2200 2211
Trường ðại học Nông nghiệp Hă Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 86
Kết quả hình 4 cho thấy ngoăi 2 giống G6 vă G19 thì câc giống còn lại ñều xuất hiện câc band giống với giống ñối chứng G17 tại locus RM167.
Kết hợp với việc cho ñiểm ñânh giâ hạn trong ñiều kiện tự nhiín, chúng tôi thu ñược kết quả tại bảng 4.3.
Bảng 4.13. Bảng Score kiểu hình vă kiểu gen về tính chịu hạn của 21 giống nghiín cứu Giống 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 KH ðiểm 1 x x x x x x x ðiểm 3 x x x x x x x ðiểm 5 x x ðiểm 7&9 x x x x x KG RM221 x x x x x x x x x x RM242 x x x x x x x x x RM167 x x x x x x x x x x x x x x x x x x x RM250 x x x x x x x x x x x x x x x x x x x RM270 x x x x x x x x x x x x x
Từ kết quả bảng trín chúng ta thấy rằng: hầu hết câc giống thí nghiệm ñều mang ít nhất 2-5 locus gen quy ñịnh tính chịu hạn. TTrroonngg ññóó ccââcc ggiốiốnngg số G3, G6, G8, G13, G14, G15, G16, G18 mang nhiều locus gen chịu hạn vă có kiểu hình thể hiện tính chịu hạn cao nhất (ñiểm 1, ñiểm 3) tương tự như giống ñối chứng (G17). Câc giống năy có thể ñược sử dụng lăm nguồn vật liệu ñể phât triển giống lúa chịu hạn.
Từ kết quả chạy PCR, ñể xâc ñịnh mối quan hệ giữa câc dòng, giống lúa nghiín cứu dựa trín số liệu phđn tích SSR liín kết với câc tính trạng liín quan ñến tính chịu hạn, câc số liệu nhận ñược ñược xử lý bằng phần mềm NTSYS 2.0 ñể xđy dựng biểu ñồ quan hệ di truyền. (Hình 5).
Trường ðại học Nông nghiệp Hă Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 87
Hệ số tương ñồng di truyền
Hình 5. Biểu ñồ quan hệ di truyền giữa câc dòng vă giống lúa nghiín cứu.
Qua biểu ñồ quan hệ di truyền giữa câc dòng, giống lúa nghiín cứu chúng tôi nhận thấy câc dòng, giống năy phđn thănh 3 nhóm chính: Nhóm 1 gồm câc giống G1,G4, G5, G2, G3, G7; nhóm 2 gồm câc giống: G8- G21 lă câc giống lúa cạn vă câc dòng, giống mới chọn tạo của Viện CLT &CTP; nhóm 3 chỉ có giống G6. Trong ñó, nhóm 1,2 với nhóm 3 có mức ñộ tương ñồng về di truyền lă 0.33; Nhóm 1 vă 2 có mức ñộ tương ñồng di truyền lă khoảng 0,69. Tuy nhiín, về tính chịu hạn thì câc dòng, giống không tuđn theo quy luật: câc giống số G3, G6, G8, G13, G15, G16 có khả năng chịu hạn tốt khi ñânh giâ hạn tự nhiín nằm trong cả 3 nhóm. Câc giống chịu hạn khâ như:G4, G5, G7, G9, G11, G14, G18 nằm trong 2 nhóm (nhóm 1 vă 2). ðiều năy căng khẳng ñịnh vă chứng tỏ khả năng chống chịu hạn ñược quy ñịnh bởi một hệ ña gen tương tâc chặt chẽ với môi trường vă ñược biểu hiện khâc nhau trong từng giai ñoạn phât triển của cđy, cũng như câc bộ phận khâc nhau của cđy như nhiều nghiín cứu của câc tâc giả. Việc nghiín cứu ảnh hưởng của ña gen lín câc tính trạng chịu hạn lă vô cùng phức tạp, ñòi hỏi có nhiều câc nghiín cứu sđu hơn vă ñặc biệt lă nghiín cứu những gen chống chịu của những giống lúa cạn, hạn trong nước ñể có thể phât huy ưu thế của câc giống năy trong sản xuất.
33 3 2 2 1 1
Trường ðại học Nông nghiệp Hă Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 88