Nh m t ng tính hi u qu c a ph n ng MSP, chúng tôi ti n hành th c hi n ph n ng PCR v i c p m i methyl (APC-MF và APC-MR) và c p m i unmethyl (APC-UF và APC-UR), t t c 6 nhi t đ th nghi m (63oC, 61.9 oC, 60.2 oC, 57.5 oC, 54.2 oC, 50 oC) nh m kh o sát nhi t đ lai t i u đ khu ch đ i vùng gen m c tiêu, k t qu đ c trình bày hình 3.3.1, 3.3.2, 3.3.3.
Hình 3.3.1: K t qu kh o sát gradient nhi t đ trên m u A2
Chú thích: M: s d ng m i methyl, U: s d ng m i unmethyl. Gi ng 1-6: t ng ng nhi t đ 63oC, 61.9 oC, 60.2 oC, 57.5 oC, 54.2 oC, 50 oC.
Hình 3.3.2: K t qu kh o sát gradient nhi t đ trên m u A3
Chú thích: M: s d ng m i methyl, U: s d ng m i unmethyl. Gi ng 1-6: t ng ng nhi t đ 63oC, 61.9 oC, 60.2 oC, 57.5 oC, 54.2 oC, 50 oC.
Hình 3.3.3: K t qu kh o sát gradient nhi t đ trên m u A5
Chú thích: M: s d ng m i methyl, U: s d ng m i unmethyl. Gi ng 1-6: t ng ng nhi t đ 63oC, 61.9 oC, 60.2 oC, 57.5 oC, 54.2 oC, 50 oC.
Báo cáo KLTN- Ph m Th Th ng Trang 41 Qua ti n hành kh o sátgradient nhi t đ , k t qu cho th y, v i các m u s d ng c p m i methyl (APC-MF, APC-MR) t i nhi t đ 63oC, 61.9 oC, 60.2 oC, 57.5 oC có v ch s n ph m nh mong đ i là 98bp. C p m i unmethyl (APC-UF, APC-UR ) có ng ng ho t đ ng r ng, các v ch có kích th c 108bp xu t hi n h u h t các nhi t đ . Bên c nh đó, t i nhi t đ 60.2 oC cho v ch s n ph m rõ nét v i c c p m i methyl và unmethyl, đi u này phù h p v i các nghiên c u tr c đây.Do v y, chúng tôi quy t đ nh s d ng nhi t đ lai là 60oC đ ti p t c th c hi n ph n ng MSP trên m t s m u b nh khác.