2. Mục tiêu nghiên cứu đề tài
2.7.4. Phương pháp xác định thành phần cà phê culi robusta
-Sử dụng phương pháp sắc kí xác định hàm lượng caffeine. - Định lượng đường theo nguyên tắc sau:
Khi cho K3Fe(CN)6 phản ứng với đường khử, sản phẩm thu được là ferocyanua. Dựa vào phản ứng này, ta có thể suy ra lượng đường khử có mặt trong dung dịch cần xác định. Việc chuẩn độ được tiến hành trong môi trường kiềm KOH, khi đun nóng với chỉ thị xanh metylen (methylen blue).
Phương trình phản ứng:
CH2OH-(CHOH)4-CHO + 2K3Fe(CN)6 + 2 KOH → CH2OH-(CHOH)4- COOH + 2K4Fe(CN)6 + 2H2O
Tất cả các monosacarit và một số olygosacarit là đường khử. Các polysacarit, olygosacarit dễ thủy phân thành monosacarit, do vậy có thể xác định hàm lượng đường tổng có trong mẫu.
- Định lượng Protein theo phương pháp Kejldahl
Về cơ bản, các thao tác của phương pháp Kejldahl được phân thành 3 giai đoạn: vô cơ hóa mẫu nghiên cứu, chưng cất, chuẩn độ.
Giai đoạn 1: Vô cơ hóa mẫu nghiên cứu
Trước tiên mẫu được vô cơ hóa bằng H2SO4 đặc ở nhiệt độ cao và có chất xúc tác. Các phản ứng của quá trình vô cơ hóa xảy ra như sau:
Protein + H2SO4 t0 , Xt NH3 + CO2 + SO2 + H2O 2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4
Giai đoạn 2: Cất amoniac
Đuổi amoniac ra khỏi dung dịch bằng NaOH. (NH4)2SO4 + 2NaOH = Na2SO4 + H2O + 2NH3
NH3 bay ra cùng với nước sang bình hứng. Bình hứng có chứa H3BO3 do đó NH3 bay ra sẽ tác dụng ngay với H3BO3 theo phản ứng:
2NH3 + 2H2O + 4H3BO3 = (NH4)2B4O7 + 7H2O
Giai đoạn 3: Chuẩn độ
Lượng (NH4)2B4O7 được xác định thông qua việc chuẩn độ bằng HCl chuẩn cho đến khi dung dịch chuyển sang màu hồng nhạt và khô.
-Định lượng chất béo theo phương pháp dựa vào tính hoà tan của chất béo trong các dung môi hữu cơ để chiết chất béo ra khỏi nguyên liệu và được xác định hàm lượng bằng phương pháp cân khối lượng.
Việc xác định thành phần cà phê Culi Robusta được tiến hành tại phòng thí nghiệm khoa hóa trường Đại học Vinh.