Bản chất kỹ thuật điện di miễn dịch hình tên lửa gần giống kỹ thuật khuyếch tán miễn dịch đơn. Kháng thể được hòa trong bản gel, KN trong lỗ giếng di chuyển trong bản gel nhờ lực điện di. Chỉ những KN đặc hiệu KT hòa tan trong bản gel mới xảy ra hiện tượng ngưng kết.
Trong quy trình:
+ Bản gel có chứa sẵn kháng thể kháng Vi. + Mẫu được nhỏ vào giếng của bản gel.
Với kháng thể Vi thì chỉ có kháng nguyên Vi mới tạo ngưng kết KN – KT.
2.3.5.1 Cỡ mẫu
Sử dụng mẫu Typhim Vi, Meningococcal B + C, PBS làm mẫu thử/1 lần thử nghiệm. Thực hiện 6 lần thử nghiệm.
Để đánh giá khả năng thu được kháng nguyên Vi khi mẫu thử có các thành phần khác nhau, nhóm nghiên cứu chuẩn bị các mẫu thử như sau:
+ Vắc xin Typhim Vi pha loãng 1/2 bằng dung dịch mẫu chuẩn có hàm
lượng KN Vi 50 µg/ml (Mẫu thử 2). Nghĩa là mẫu thử 2 đã được thêm 25
µg/ml KN Vi so với mẫu thử 1.
Như vậy hàm lượng KN Vi mẫu thử 2 nhiều hơn mẫu thử 1 là 25 µg/ml.
+ Vắc xin Meningococcal B + C pha loãng 1/2 bằng PBS (Mẫu thử 3).
+ Vắc xin Meningococcal B + C pha loãng 1/2 bằng dung dịch mẫu
chuẩn có hàm lượng KN Vi 50 µg/ml (Mẫu thử 4). Nghĩa là mẫu thử 4 đã
được thêm 25 µg/ml KN Vi so với mẫu thử 3.
Như vậy hàm lượng KN Vi mẫu thử 4 nhiều hơn mẫu thử 3 là 25 µg/ml.
Nhỏ 7 µl mẫu chuẩn dựng đường chuẩn, mẫu thử 1, 2, 3, 4 và mẫu PBS (mẫu trắng) vào các giếng.
2.3.5.2 Cách tính kết quả
Tính hàm lượng KN Vi thu được ở các giếng mẫu thông qua việc đo được chiều cao cột tên lửa. Tính hàm lượng kháng nguyên Vi thêm thu được.
+ Mẫu thử 2 – Mẫu thử 1. + Mẫu thử 4 – Mẫu thử 3.
2.3.5.3 Đánh giá kết quả như đánh giá kết quả độ đúng
Đối với từng giá trị thu được: Giá trị ∆ không vượt quá ± 30% so với mẫu thử chứa 25 µg ViPs/ml [43].
Đối với các giá trị thu được: Tính giá trị trung bình và độ lệch chuẩn, kiểm định giá trị trung bình lý thuyết với khoảng tin cậy 95% của độ đúng chung cho các mẫu [12]:
+ T < t: Không có sự khác nhau về kết quả trung bình hiệu số thu được so với giá trị mẫu chuẩn thêm vào mẫu với mức ý nghĩa α = 0,05. Quy trình đạt độ đặc hiệu với độ tin cậy 95% (p > 0,05).
+ T > t: Có sự khác nhau về kết quả trung bình hiệu số thu được so với giá trị mẫu chuẩn thêm vào mẫu với mức ý nghĩa α = 0,05. Quy trình không đạt độ đặc hiệu với độ tin cậy 95% (p < 0,05).
2.4 Quy trình kỹ thuật