- Giai đoạn 2: Lên men kiềm: các sản phẩm của giai đoạn 1 tiếp tục đƣợc
5: Dựa trên phƣơng pháp đo hàm lƣợng oxy hồ tan
tan
Dụng cụ,thiếtbịvà hố chấtphântíchBOD 5
Dụng cụ và thiết bị: Tủ định ơn BOD ở nhiệt độ 200C; Chai BOD 300 ml ;
Ống đong 100 ml; Bình tam giác 500 ml; Beaker 500 ml; Buret; Pipet; Bìn h
định mức; Máy sục khí Hố chất
Dung dịch đệm phosphate:Hồ tan4,25 g KH 2PO 4; 10,875 g K 2HPO 4; 16, 7gNa 2HPO 4và 0,85gNH 4Cltrong250 ml nƣớccất vàđịnhmức thành500 ml Dung dịch MgSO 4: Hồ tan11,25 g MgSO 4.7H 2O trongmột ít nƣớc cất và định mức thành 500 ml. Dung dịch CaCl 2: Hồ tan13,75 g trongmột ítnƣớc cất và định mức thành 500 ml. Dung dịch FeCl 3: Hồ tan 0,1125 g FeCl 3 trong một ít nƣớc cất và địn h mức thành 500 ml. Dung dịch H 2SO
4 1N và NaOH 1N: Để trung hịa mẫu cĩ tính kiềm hoặc tính acid.
Dung dịch MnSO
4: Hịa tan 182 g MnSO 4.H
2O trong một ít nƣớc cất v à
định mức thành 500 ml.
Dung dịch iodide – azid kiềm: Hồ tan 250 g NaOH và 67,5 NaI trong một ít nƣớc cất và định mức thành 500 ml. Thêm vào 5 g NaN
3 đã đƣợc hồ ta n
Acid sulfuric đậm đặc. Dung dịch Na 2S 2O 3 0,025 M: Hồ tan 3,1 gNa 2S 2O 3 trongmột ít nƣớccất ,
thêm vào đĩ 0,2 g NaOH và định mức thành 500 ml.
Chỉ thị hồ tinh bột: Hồ tan 2 g tinh bột và 0,2 g acid salisylic (chất bả o
quản) trong 100 ml nƣớc cất nĩng. Nguyên tắc:
Đo hàm lƣợng oxy hồ tan (DO) ban đầu và sau 5 ngày ủ ở nhiệt độ 200 C.
Lƣợng oxy chênh lệch do vi sinh vật sử dụng chính là BOD. Tiến hành:
Chuẩn bị nƣớc pha lỗng: Nƣớc pha lỗng đƣợc chuẩn bị bằng cách thêm m ỗi
1 ml các dung dịch đệm phosphate, MgSO
4, CaCl 2,FeCl
3, cho mỗi lít nƣớc cấ t.
Sau đĩ đem sục khí hơn 2 giờ.
Xử lý mẫu: Nếu mẫu cĩ độ kiềm hoặc acid phải đƣợc trung hịa đến pH = 6 ,5
–7,5 bằngH 2SO
4 1NhoặcNaOH1N.
Pha lỗng mẫu: Chiết nƣớc pha lỗng vào đầy 2 chai BOD 300 ml, sau đĩ
dùng pipet hút 1 ml mẫu nƣớc thải (đối với mẫu trƣớc thử nghiệm) hay 3 ml m ẫu
nƣớc thải (đối với mẫu sau thử nghiệm của mơ hình thử nghiệm) cho vào mỗi
chai bằng cách nhấn pipet xuống đáy chai, thả từ từ mẫu vào chai.Sau đĩ l ấy
nhanh pipet ra khỏi chai, đậy nhanh nút lại (khơng đƣợc cĩ bọt khí). Một c hai
dùngđể định phântứcthìlƣợng oxyhồtanDO
0,mộtchaiđem ủ5ngàysau m ới
đem định phân lƣợng oxy hồ tan cịn lại DO
5. Chai ủ trong 200C đậy kỹ niê m
bằng một lớp nƣớc mỏng trên chỗ loe của miệng chai, phải lƣu ý thƣờng xuy ên
đừng để cạn hết lớp nƣớc này trong suốt quá trình ủ. Định phân lƣợng oxy hồ tan (DO):
Gạt bỏ phần nƣớc trên miệng chai BOD, mở nút chai lần lƣột thêm vào b ên
dƣới mặt thống mẫu :
2ml dungdịch MnSO 4
2 ml dung dịch iodide azid - kiềm
Đậy nút chai lại và đảo ngƣợc chai lên xuống trong vài phút. Để yên cho k ết
tủa lắng hồn tồn, cẩn thận mở nút chai thêm 2 ml dung dịch H 2SO
4 đậm đ ặc
bên dƣới mặt thống mẫu. Đậy nút lại, rửa chai dƣới vịi nƣớc, đảo ngƣợc ch ai
lên xuống vài lần để làm tan hịan tịan kết tủa.
Rĩt bỏ 97 ml dung dịch, định phân lƣợng mẫu cịn lại bằng dung dị ch
Na 2S
2O
3 0,025 M cho đến khixuất hiện màu vàng rơm rạt. Thêm vài giọt chỉ t hị
hồ tinh bột, dung dịch chuyển sang màu xanh tiếp tục định phân với Na 2S
2O O
3
0,025 M cho đến khi mất màu xanh. Ghi nhậnkếtquả: 1mlNa 2S 2O 3 0,025M =1mg O 2/L Nhƣ vậyDOchính làsố mgO 2/L ứngvới thểtíchNa 2S 2O 3 0,025 M đãdùng. BOD 5= (DO 0 –DO 5)*f Với:DO
0:lƣợngoxyhồ tanđoởngàyđầutiên DO
5: lƣợngoxy hồtanđo đƣợcsau5ngàyủ f: Hệ số pha lỗng mẫu
Đơnvị: mgO 2/L