Ly tn,lc khua'n la mot va'n de quan trQng trong so cac nhiem khua'n dLlang tieu hoa . Cac phUong phap chan doan IX tr~(c khuan nhu dy phan c6 gia tri xac dinh b~nh nhLfng doi hoi thai gian nuoi
dy va xac dinh vi khuan it nha't W 24 - 72 gia ma da soly tr~lc khuan deu dien bien dp tfnh . Ngoai ra, neu b~nh nhan aa duQ'c dClng khang sinh ho~c
do dieu ki~n Ia'y b~nh pha'm. v~n chuyen va bao quan khong dam bao, vi khua'n bl chet nen vi~c
phat hi~n cac vi khua'n nay qua nuoi dy. phan
I~p g~p ra't nhieu kh6 khan. Vi~c ap dvng ky
thu~t PCR ket hQ'p voi nuoi dy phan I~p aa rut ngan thai gian xac dlnh can nguyen gay b~nh
xuong can khoang 20 - 24 gio. Tuy nhien, do nhu du cha'n aoan sam tren lam sang, vi~c xac dlnh nhanh EIEC va Shige l la la ra't dn thiet va giup cac bac 51 co cha'n doan chfnh xac va co quyet oi nh d ieu tri hQ'p Iy (7].
Vi~c xac dinh nhanh EIEC va Shigella tV phan bang PCR doi hoi vi~c tach chiet va tinh sqch ADN tr~lc tiep ttl b~nh pha'm phan. 80 la chia khoa dOi voi ky thu~t PCR trong xac dinh tn,lc tiep cac chung Shigella va EIEC. 8a c6 mot 50 phuong phap tach chiet va tinh s<;lch ADN tr~lc tiep tV
phan . Tuy nhien, cac phuong phap na y ho~c la qua phuc tqP, ho~c qua dat va chi tht,lc hi~n aUQ'c
a nhung phong xet nghi~m dLIQ'c trang bl may
moc hi~[l dqi [6; 8]. Dieu quan trQng nha't trang qua trinh tach chiet ADN la IO<;li bo cac chat uc che phan ung PCR. Chung g6m sac to m~t, muoi
m~t, polysaccharid va mot ILfQ'ng Ion ADN khong phai tv EIEC. Ngoai ra, con mot 50 chat chua duQ'c biet. Voi mot 50 iLIQ'ng du lon, cac chat nay se uc che phan Ctng PCR vai c~p m6i d~c hi~u
cho dOan ADN dn tim trong phan, lam giam dang ke do nhqy va do o~c hi~u cua PCR. Chfnh vi v~y, vi~c loqi be cac cha't na y ho~c lam giam dang ke chung co y nghTa quye't dinh S~I thanh cong ella ky thu~t.
Nhin chung, cac chat trong phan co the aUQ'c
chia lam hai 10ai: cac chat huu hinh va cac cha'l hoa Ian. Vi~c loqi be cac cha't huu hinh co the
aUQ'c th~lc hi~n khi tien hanh 06ng nhat phan va Iy tam b~nh pham a toc dQ tha'p 100 - 300 g. a
toc do na y, phJn Ion cac cha't c~n, ba trong phan bi lang xuong, cae thanh phJn co kich thUoc nho han v~n a trong nLIClc n5i . Qua qua trlnh toi Llu, thai gian Iy tam atoc do nay trong 10 phut au de lang cae thanh phJn co kfch thLloc Ion.
Toc do Iy tam a 300 g se lam lang cac thanh phJn co kfch thuGC nho honrihung chLla Ot'l de
lang vi khuan. Ket qua nghien cLIU cho thay, thai gian Iy tam atoc do 300 g trong 10 phut tiep theo giai doan Iy tam 100 g trang 10 phut co hi~u qua cao khi 10C)i be them cac cha't hUll hinh trong huyen dich phan .
TCNCYH 55 (3) -2008
Cac btl6c Iy tam d toc do 100 g va 300 g trong 10 phdt co tac d~lng lo<)i bG cac cha't trong pI-a n c6 kich thtl6c Ion han vi khu~n. Tuy nhien, trong h6n h<;lp phan COil co nhi~u cha't hoa tan l.'le che
p~an ung PCR. Chfnh vi v~y, l<;Ii dvng tinh cha't bi
I~ng c~n eLta vi khu~n khi Iy tam atoc dQ tren 1300 g, cac cha't hoa tan se bi lo<)i bo cung v6i
nU6c noi.
Ket qua cva chung t6i cho thay, vi~c Iy tam ad
1300 g trong 5 - 1Ci phClt va I~p I<)i tV 2 - 4 I§n co tac dvng rL(a s<)ch c~n vi khu§'n, giup 10<;li tru cac tac dvng rL(a s<)ch c~n vi khu§'n, giup 10<;li tru cac
chat hoa tan co kha nang lic che phan ling PCR. Elanh gia "do s<)ch" ella qua trinh nay dlja vao
viec quan sat may ella ntlcJe noi . Neu ntloc noi kh6ng con maLi vang, chung to c~n vi khu~n da s<)ch. Mau vang cLla nU6c noi do cac chat 103 san phim chuy~n hoa cva bilirubin t<)o thanh. Chung
Cfc che phan ling PCR t<)o ket qua am tinh gia. Sau buck rua na y, c~n vi khua n dU<;Ic dun a
1OOOC d~ pha vij mang te bao .... i khua'n, giai phong ADN vao dung dich.
Quy trinh tach chiet ADN trljc tiep tV phan da dtl<;lC t6i u'u co nhi~u L(lJ di~m: