- SLP: số lượng phơi hình thành (phơi/cụm).
3.3.2.Ảnh hưởng của phối hợp BA và NAA trong môi trường cơ bản SH đến khả năng tạo phôi soma từ callus
đến khả năng tạo phơi soma từ callus
Cũng như thí nghiệm trên, chúng tơi đã tiến hành nuôi cấy phát sinh phôi từ callus trên môi trường bổ sung phối hợp nhiều cặp nồng độ giữa BA (1,0-3,0 mg/l) và NAA (0,1-1,0 mg/l) trên môi trường SH. Ảnh hưởng của các tổ hợp chất KTST đến khả năng hình thành phơi soma được phát hiện ở các nhóm phối hợp giữa 1,0 mg/l BA với 0,3-1,0 mg/l NAA. Kết quả theo dõi thí nghiệm sau 8 tuần ni cấy được trình bày ở bảng 3.7.
Bảng 3.7. Ảnh hưởng của phối hợp BA và NAA trong môi trường cơ bản SH đến khả năng tạo phôi soma từ callus
Chất KTST (mg/l) Tỷ lệ phơi hình thành (%) Số lượng phôi soma/cụm BA NAA 0,0 0,0 - - 1,0 0,1 0,00 0,00c 1,0 0,3 2,18 1,15c 1,0 0,5 49,24 72,51a
1,0 1,0 18,22 12,95b
Các chữ cái khác nhau trên cùng một cột chỉ ra sự sai khác có ý nghĩa thống kê của trung bình mẫu với p<0,05 (Duncan's test).
Biểu đồ 3.7. So sánh ảnh hưởng của nồng độ phối hợp BA và NAA trong môi trường cơ bản SH đến khả năng tạo phôi soma từ callus
Theo kết quả ở bảng 3.7, trên môi trường bổ sung phối hợp 1,0 mg/l BA với 0,1 mg/l NAA, phơi soma khơng hình thành. Khi phối hợp với nồng độ NAA từ 0,3-1,0 mg/l, phơi đã hình thành với tỷ lệ và số lượng khác nhau tùy vào các nồng độ của chất KTST. Trong đó, mơi trường SH phối hợp 1,0
mg/l BA với 0,5 mg/l NAA, phơi được hình thành cao nhất với tỷ lệ 49,24 % và số lượng phôi là 72,51 phơi/cụm sau 8 tuần ni cấy (Hình 3.5 b, c, d).
So sánh kết quả 2 thí nghiệm trên, chúng tơi kết luận rằng khi nuôi cấy callus ở môi trường SH có bổ sung phối hợp 1,0 mg/l BA và 0,5 mg/l NAA cho tỷ lệ và số lượng phơi hình thành cao hơn so với giữa mơi trường MS có bổ sung phối hợp 2,0 mg/l 2,4-D và 0,3 mg/l KIN.
Hình 3.5. Tạo phơi soma callus sau 8 tuần nuôi cấy
a. Phôi soma trên môi trường MS bổ sung phối hợp 2,0 mg/l 2,4-D và 0,3 mg/l KIN;b, c. Phôi soma trên môi trường SH bổ sung phối hợp 1,0 mg/l BA và 0,5 mg/l NAA; b, c. Phôi soma trên môi trường SH bổ sung phối hợp 1,0 mg/l BA và 0,5 mg/l NAA; d. Phôi soma sâm Ngọc Linh; Thước 1 cm.
3.4. TẠO CHỒI
Cụm phơi soma (1,0×1,0 cm) được cấy lên mơi trường ½ MS và SH bổ sung BAP (0,5-1,5 mg/l) và NAA (0,1-1,5 mg/l). Sự hình thành chồi và tăng trưởng chồi chỉ xuất hiện trên môi trường bổ sung phối hợp 1,0 mg/l BA với 0,3-1,0 mg/l NAA, ở các nồng độ phối hợp khác khơng thấy sự hình thành chồi, cụm phôi chuyển sang màu nâu đất và chết dần sau đó.