Một cọng tinh 0,25 ml chứa trung bình 30.000.000 tinh trùng. Trong khi thực hiện các thao tác đông lạnh và giải đông thì khoảng từ 10 đến 40 % số tinh trùng bị chết. Sau khi giải đông cần có ít nhất 33% số tinh trùng còn sống và phải có chuyển động tiến thẳng. Nhưng cũng cần lưu ý là trong trường hợp này, chuyển động tiến thẳng không bao giờ mạnh như trường hợp tinh dịch tươi.
Giải đông tinh
Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng tỷ lệ sống tối đa của tinh trùng đạt được khi mà quy trình giải đông là quá trình đảo ngược của quy trình sản xuất và đông lạnh tinh. Các bước của quy trình sản xuất và đông lạnh là giảm từ từ nhiệt độ xuống -1960C.
Để đạt được sự đảo ngược này, có nghĩa phải nâng nhanh nhiệt độ từ- 1960C lên 50C, một dung dịch giải đông phải được sử dụng. Tỷ lệ thụ thai sẽ bị giảm thấp n'u tinh dịch không được giải đông một cách đúng đắn.
Các phương pháp giải đông tinh như sau:
- Với tinh viên: Bẻ ống nước muối sinh lý sao cho rộng miệng và tách mảnh vỡ rơi vào trong nước sinh lý. Mở nắp bình tinh, nâng cóng đựng tinh lên ngang miệng bình. Gắp một viên tinh, thả ngay vào ống nước muối sinh lý, hạ ống tinh, đậy bình tinh và trộn đều viên tinh đã tan bằng cách dùng ống bơm tinh đảo nhẹ. Nắm ống tinh trong lòng bàn tay. Hút tinh vào ống bơm.
- Với tinh cọng rạ: Dùng cốc giải đông, pha nước có nhiệt độ 37-38 OC, gắp cọng tinh cần phối thả chìm ngang vào cốc giải đông tối thiểu trong 30 giây. Đừng để ngập cọng rạ hoàn toàn, để phía đầu cọng rạ nạp tinh lộ ra 1cm nhằm tránh nước vào trong trường hợp bị lỗi trong lúc sản xuất. Lau khô, nạp vào súng bắn tinh, để đầu hàn bịt thò ra ngoài 0,3 - 0,4cm. Cắt phần hàn bẹt của cọng rạ. Lắp vỏ súng bắn tinh vào súng bắn tinh. Khi lắp phải khéo léo đơm miệng cọng rạ đã cắt vào núm hạt vỏ súng bắn tinh thật khít, đẩy hạt vỏ cọng rạ tới cùng. Cố định vỏ súng bắn tinh vào súng bắn tinh bằng vòng cố định, xoáy theo chiều kim đồng hồ 1-2 vòng vỏ súng bắn tinh vào gờ xoáy của súng bắn tinh.
Yêu cầu phải lắp kín để tinh dịch không bị chảy ra vỏ súng bắn tinh.
- Với tinh ampul: Dùng cốc đựng nước lạnh 5-10OC đểgiải đông tinh. Lau khô, nâng nhiệt độ tinh lên bằng lòng bàn tay hoặc nước 35-37OC. Nạp tinh vào dụng cụ dẫn tinh.
Sử dụng súng bắn tinh
Loại súng nhỏ có vỏ nhựa bọc súng chỉ phù hợp cho cọng rạ nhỏ. Súng loại trung bình có vỏ nhựa bọc chỉ phù hợp cho cọng rạ loại trung bình. Loại vỏ đa năng có thể được dùng chung cho cả với cọng rạ nhỏ và trung bình và sử dụng với súng đa năng, súng nhỏ hoặc súng trung bình.
a. Nạp tinh vào súng:
1. Xác định giỏ chứa cọng rạ cần tìm trong bình đựng tinh bằng cách xem bảng danh mục tinh. Các cọng rạ chỉ giải đông mỗi lần một cái, tinh dịch phải được phối cho bò càng sớm càng tốt ngay sau khi lấy ra khỏi nitơ lỏng.
2. Đặt và chuẩn bị hộp dụng cụ. Kiểm tra nhiệt độ dung dịch giải đông: nó phải vào khoảng 350C (tham khảo các phương pháp giải đông ở trên).
3. Nâng các móc (quai) của giỏ đựng tinh từ rãnh khía và để nó ở ngang nách cổ bình.
4. Lấy cọng rạ từ cóng đựng tinh bằng panh kẹp. Dùng panh kẹp vào phần đầu phía nạp tinh một cách chắc chắn, lắc mạnh 2-3 lần và đặt ngay vào dung dịch giải đông. Vẩy cọng tinh để loại bỏ nitơ lỏng từ nút bông ở phía đầu kia và làm giảm đến mức tối thiểu sự hư hỏng do bị nổ hoặc cọng rạ bị nứt gãy.
Phần đầu cọng rạ phía nạp tinh luôn để phía trên của cóng giải đông.
Để tránh sự nguy hiểm không đáng có đối với tinh trùng cần lưu ý rằng các cọng rạ sẽ không an toàn khi để lộ ra ngoài và một khi đã lấy ra khỏi nitơ lỏng là phải được sử dụng. Khi chọn và di chuyển tinh nên làm càng thấp bên dưới cổ bình dựng tinh càng yên tâm hơn, tốt hơn là phía dưới đường ngang đầu tiên.
Khi sắp xếp và chuyển tinh từ bình bảo quản nitơ phải luôn sử dụng panh kẹp. Nếu cầm bằng tay sẽ nguy hiểm do tay bị bỏng lạnh và cũng gây nguy hại cho tinh trùng do nhiệt từ tay truyền sang.
5. Đặt trả lại giỏ đựng tinh đúng vị trí của chúng và đậy nắp bình lại.
6. Chỉ nên cầm cọng rạ vào 2 đầu để tránh nhiệt độ thay đổi gây sốc cho tinh trùng. Lấy cọng rạ từ dung dịch giải đông và lau khô bằng khăn hoặc giấy mềm.
Cầm đầu cọng rạ phía có 2 lần nút và xoay tròn giữa ngón tay cái và ngón tay trỏ nhằm làm lỏng nút, tạo điều kiện dễ dàng trong khi bơm tinh. Kiểm tra lại tên và số hiệu bò đực trên cọng rạ.
7. Lắp cọng rạ vào súng dẫn tinh (để phía đầu nạp tinh hướng lên trên). Nòng súng dẫn tinh (pit tông) được đẩy lên một chút. Cắm cọng rạ theo một phương thẳng đứng và dùng kéo gõ nhẹ nhàng vào đầu cọng rạ phía nạp tinh. Như vậy sẽ làm những bọt khí chạy lên trên về phía nút kẹp.
8. Lau kéo để tránh sự nhiễm bẩn do lần cắt cọng rạ trước. Giữ súng đã được lắp cọng rạ theo phương thẳng đứng, ngang tầm mắt rồi dùng kéo cắt ngang với góc 900 so với trục của cọng rạ qua bọt khí, phía dưới đầu kẹp. Cọng rạ sẽ nhô ra từ đầu của súng dẫn tinh ít nhất 1cm. Việc cắt cọng rạ chính xác sẽ đảm bảo bịt kín hoàn toàn giữa cọng rạ và vỏ súng, nơi mà nòng súng đẩy qua. Lau lưỡi kéo sau khi cắt cọng rạ nhằm tránh sự nhiễm bẩn cho lần cắt cọng rạ sau.
9. Rút vỏ ống dẫn tinh từ túi bảo vệ rồi đặt vào nòng súng (tay chỉ được cầm vào đầu vỏ đã được chẻ một chút để giữ cho vỏ súng sạch), di chuyển vòng khoá lên phía trên đoạn hình búp măng sau đó đẩy vỏ ống dẫn tinh vào sâu đoạn hình búp măng và ấn vòng khoá cho đến đầu cuối của cọng rạ, bên trong đỉnh của vỏ súng sao cho ngang bằng (không bị lệch). Xoay vòng khoá và đẩy nó vào trong đoạn hình búp măng rồi cố định vỏ súng ở vị trí ấy.
10. Đẩy pit tông vào cho đến khi tinh dịch có thể nhìn thấy tại đầu cuối của vỏ súng. Như vậy sẽ rút hẹp khoảng cách giữa các ngón tay và ngón cái khi ấn pít tông trong khi dẫn tinh.
Không được lắp hơn 2 súng dẫn tinh trong cùng một lúc b. Tháo súng sau khi dẫn tinh:
1. Nới lỏng vòng khoá. Đừng để nó trượt vào phần bị bẩn của vỏ súng. 2. Rút vỏ súng ra khỏi nòng súng, cọng rạ sẽ được lẩy ra cùng với vỏ súng. 4. Vứt bỏ vỏ súng, cọng rạ và xử lý theo quy định hợp vệ sinh.