Chlorophyll dùng làm phẩm màu phụ gia thực phẩm thường ở dạng: Magiê chlorophyll hoặc Magiê phaeophytin. Thu được bằng cách chiết cỏ, cỏ linh lăng, tầm ma và các nguyên liệu thực vật khác với dung môi phù hợp như: aceton, dicloromethan, methanol, ethanol, propan-2-ol và hexan... Sau đó loại dung môi thu được sản phẩm gồm thành phần màu chính là các phaeophytin và magiê chlorophyll. Sản phẩm sau khi chiết và loại dung môi chứa các chất màu khác như carotenoid, sáp và chất béo có nguồn gốc từ nguyên liệu. Để thu được chất màu tinh khiết hơn người ta có thể sử dụng phương pháp kết tinh lại [11].
Quá trình tách chiết chlorophyll từ Rong Mứt (Porphyra.sp) với hệ dung môi (ethanol, methanol, aceton) được tiến hành như sau:
Rong khô Ngâm lần 1 Ngâm lần 2 Ngâm lần 3 Làm ráo nước Xay (5 phút) Hòa trộn Ủ (40C/ 16-24h) Ly tâm 6000 vòng/phút trong 10 phút Cô đặc Dịch chlorophyll CaCO3 (250-750 mg) Acetone, methanol, ethanol
- Cho 3g rong khô được ngâm với 1000 ml nước cất (D.W) để loại bỏ sắc tố phycoerythrin và các tạp chất tan trong nước khác. Sau mỗi 1 giờ, rong được vớt ra và cho vào 1000 ml D.W mới. Công đoạn này được tiến hành 3 lần liên tiếp nhau.
- Sau đó, rong được vớt ra và để ráo nước hoàn toàn.
- Tiếp theo, rong được cho vào máy xay cùng với một lượng D.W xác định (nhiệt độ 4 – 100C) và được xay trong 5 phút. CaCO3 được bổ sung trước khi xay với lượng xác định (250 – 750 mg).
- Sau đó, dịch xay được đổ ra 1 cốc thủy tinh và được bổ sung dung môi (acetone, methanol, ethanol) sao cho nồng độ dung môi sau cùng đạt tỉ lệ phần trăm xác định (70 – 90%) và thể tích cuối cùng đạt 100 ml. Cốc thủy tinh được bọc kín và được giữ trong điều kiện tối ở nhiệt độ 40C và thời gian thích hợp (16 – 24 giờ).
- Dịch thu được sau khi chiết được đem ly tâm 6000 vòng/phút trong 10 phút. Dịch trong được thu hồi để cô đặc để tạo thành chlorophyll dạng cao. Nếu sản phẩm yêu cầu độ tinh khiết cao hơn cóa thể dùng phương pháp sắc ký cột hoặc kết tinh.