+ Tiến hành
- Chuẩn bị hồng cầu gà
Lấy 10ml máu tim gà, thêm 5ml xitrat natri 5% ñể chống ñông máu, Li tâm cho hồng cầu lắng xuống, hút bỏ bạch cầu và huyết tương ñi. Rửa hồng cầu bằng nước sinh lí như thế 3 lần. Chỉ giữ lại hồng cầu, cuối cùng pha hồng cầu 1% với nước sinh lý
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 39 Dùng 8 ống thí nghiệm và 1 ống ñối chứng:
Cho vào ống nghiệm thứ nhất 0,9ml nước sinh lý, các ống còn lại từ ống thứ 2 ñến ống thứ 8 mỗi ống cho 0,5ml nước sinh lý
Cho vào ống nghiệm thứ nhất 0,1ml nước trứng cần xác ñịnh virus, , lắc ñều ống nghiệm thứ nhất rồi hút 0,5ml từ ống thứ nhất chuyển sang ống thứ 2 . Trộn ñều ống thứ 2 xong hút 0,5ml từống thứ 2 chuyển sang ống thứ
3, trộn ñều và hút 0,5ml chuyển sang ống thứ 4 và cứ làm như thế cho tới ống thứ 8 thì hút bỏ ñi 0,5ml. Như vậy lần lượt ta có hiệu giá pha loãng nước trứng từ ống thứ nhất tới ồng thứ 8 là: 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, 1/320, 1/640, 1/1280
Cuối cùng cho hồng cầu gà 1% vào tất cả các ống, mỗi ống 0,5ml . Lắc, trộn ñều các ống trong vòng 1 phút và ñể yên trong 15 – 20 phút ñọc kết quả
Ống thứ 9 là ống ñối chứng chỉ có 0,5ml nước sinh lý và 0,5ml hồng cầu gà do ñó hồng cầu gà không bị ngưng kết mà lắng xuống ñáy ống thành một cục máu tròn ñỏ, nước ở bên trong là phản ứng âm tính. Phản ứng dương tính là hồng cầu ngưng kết thành những hạt lấm tấm màu ñỏ (thành quầng ñỏ
rạn nứt ở ñáy ống nghiệm). Hiệu giá ngưng kết ñọc ở ống ngưng kết cuối cùng, trước ống không ngưng kết
2.4.4. Phản ứng HI (Haemagglutination Inhibition) xác ñịnh hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của gà