- Tạo ra mơi trường nghèo dinh dưỡng để VSV gây bệnh khĩ hoặc khơng phát triển được. Khi đĩ những VSV phát triển trên mơi trường ấy hầu hết là VSV đối kháng (???)
* Cách tiến hành:
- Lấy 10 g đất tốt cho vào đĩa petri đã khử trùng - Phun nước cất khử trùng để làm ẩm đất
- Đặt lên bề mặt một lớp vật liệu cellulose (giấy hay rơm rạ ). - ủ ở nhiệt độ phịng khoảng 30 ngày.
- Cấy chuyển bào tử nấm sang mơi trường trung gian PDA cho đến khi tạo canh trường thuần khiết.
- Quan sát bào tử nấm dưới kính hiển vi Stereo để nhận biết chủng loại. - Các bước trên thực hiện trong box cấy vơ trùng
Sơ đồ tiến hành: H4
* Phạm vi ứng dụng:
Phân lập được một số chủng nấm từ đất phục vụ cho việc nghiên cứu nấm đối kháng.
**Thành phần các mơi trường sử dụng:
Mơi trường PDA:
Thành phần Hàm lượng -Đường glucose 20 g/l - Khoai tây 200g/l - Agar 20 g/l - Nước 1000ml
Mơi trường WA:
Thành phần Hàm lượng - Agar 20 g/l - Nước 1000ml
M u t và nà c kh trùng
t v t li u m i ch c a m u lên b m t
cho n c vào và nhi t phịng, theo dõi trong 3-5 ngày
Quan sát d i kính hi n vi (x10)
Tách s i n m chuy n sang mơi tr ng PDA cho t i khu n l c thu n
nh danh d i kính hi n vi và ch p nh
H1: K thu t m i n m b nh Phytophthora và Pythium
Ph n b nh và kho
Làm s ch
t vài mi ng lên mơi tr ng WA và nhi t phịng 3-5 ngày
nh danh d i kính hi n vi và ch p nh
H2: K thu t tách n m b nh t m u b nh (theo Kasem soytong)
Tách s i n m sang mơi tr ng PDA t i khu n l c thu n
L c 20-30 1g m u t + 10ml n c c t kh trùng 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 10-1 -2 -3 -4 -5 -6 0,1m l 0,1m l 0,1m l 0,1m l 0,1m l 0,1m l No 10-1 -2 _-3 -4 -5 -6 Mơi tr ng n v khu n l c t o thành (CFU) H3: K thu t pha lỗng
M u t
( Ph i khơ sau ĩ nghi n nh l y 100g t vào
a) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
t v t li u m i cellulose lên b m t (Gi y whatman ho c c ng r m)
nhi t phịng kho ng 30 ngày và gi m
sau ĩ quan sát d i kính lúp
Phân l p t i khu n l c thu n
nh danh d i kính hi n vi và ch p nh