- Ung dong co Vcich 50 mi, 500 mi, 1000 mị
phóng deli 60.000)
THÀO LUÀN 3.8. Su phàn huy va tài tao té bào 3.8. Su phàn huy va tài tao té bào
Nhùng hình ành biét hoà da ké trén cùa bé màt té bào va càc tàng phù ngoai bào eó mói quan he chat che vói khà nàng tài tao dàc biét vi no tcao nén càc mó. Nhùng boat dóng di truyén co lién quan dé'n càc tàng va cóng thùc té bào va dóng vai trò thùc day quan trgng trong su phàt trién bào thai [17].
Willson, 1908 dà viét néu nhu càc bgt bién sÓng bi co làp thi khà nàng vàn dóng bi tan ra thành nhùng té bào, nhung cài này sau mot thòi gian lai telo thành bgt bién móị Nhùng bgt bién tu nhùng té bào bgt bién nhiéu màu sàc khàc nhau co thè tc^o nhùng bgt bién móị Sau này nhùng mó bào thai dugc tàch bang trypsin cùng thành nhùng té bào riéng rè. Sau do chùng lai tu nhau Lai va xuàt bién nhiìng tó ebùc nhu tó cht're ban dàụ Trypsin tàc dòng nhung mói lién két nhàt dinh, nguòi ta già thiét ràng khà nàng tàp hgp cùa té bào phii thuge su eó mat cùa càc lién két i>eptit tìm thà'y trong càc chat bao bgc màng. Tu* day này ra y nghì là té bào san xuàt dich tié't Colbidalis nhu là yéu tÓdinh buóng.
Hién nay trong san xuà't mot sÓ locii vaexin, hoàc cóng nghé gen phài su diing dén nhiéu té bào khàc nhau, nhung té bào dugc tàch ti^ nhung mó nhu: thàn, da, phòi hoàc bào thaị.. Trén thue té bang phuong phàp trypsin hoà da tàch duge càc té bào riéng rè tu càc mó này va nuói cày chùng de phàt trién thành té bào mot lóp. Trypsin là mot enzym thuy phàn protein cùa màng té bào, càt càc lién két pepit va càc lién két khàc nói càc té bào vói nhaụ Trong qua trình trypsin hoà mot sÓ té bào cùng co nhung yéu tó gay ành huong dén boat dóng trypsin nhu càc ion kim loaị Vi vày dói vói nhùng loai té bào này khi dùng trypsin de tàch nguòi ta thuòng dua thém mot lugng nhò EDTA (Etylen Dimetyl Tetra axetic Axit) nhàm tao phù'c vói càc ion kim loai giùp
cho boat dóng trypsin de dàng hon trong viéc càt càc lién ké't. Nguge lai trypsin cung gay tén thuòng màng té bào, ành huong dé'n su phàt trién sau nàỵ Nén nguòi ta da bé sung thém mot sÓ axit amin càn thiét ma té bào khóng tu tóng hgp duge vào mot sÓ mói truòng nuói cà'y té bào, hoàc vào dung dich trypsin trong qua trinh trypsin hoà giùp cho viéc tàch té bào dat hiéu qua cao hon.
3.9. T à c dung cùa trypsin va trypsin axit amin trong tàch té bào tir mó.
Trypsin là mot enzym eó tàc diing thuy phàn lién ké't peptit, lién két amin, lién két este do arginin hay lysin tao nén; a-benzoyl-L-argininamit hoac a-benzoyl-L-Lysinamit là nhung mó hình co chat thfeh hgp cùa enzym nàỵ Trong tniòng hgp này nhung nhóm cation cùa co chat dugc két hgp vói nhóm aspatyl (vói nhóm C O O ' cùa axit aspatie) cùa phàn tu enzym mot eàch rat chfnh xàc. Nhung chat co càu tao phàn tu dai hon phàn tu co chat mot nhóm CH2 nhu a-benzoyl-L-homoargininamit hoàc ngàn hon phàn tu co chat mot nhóm CHj nhu a-benzoyl-L-omithiamit déu khóng chiù tàc dung cùa trypsin, eó le nlióm cation cùa co chat khóng ò vi trf tuong ùng vói nhóm anion cùa enzym. Enzym vira dàc hiéu vói co chat vira dàc hiéu vói phàn ùng hoà hgc nén tfnh dàc hiéu cùa enzym rat caọ Tuy nhién, eó nhung enzym co tinh dàc hiéu tuyét dói, nhung cùng eó nhung enzym ehi eó tfnh dàc hiéu tuong dóị Bàn chat cùa trypsin là mot enzym xùc tàc, do càu trùc If boa dac biét cùa phàn tu enzym va dac biét là tmng tàm hoat dòng ma eó tfnh dàc hiéu rat cao so vói nhung chat xùc tàc thóng thuòng khàc. Trypsin là enzym dugc tóng hgp qua mot giai doan trung gian là càc tién chat cùa enzym (proenzym). Càc tién chat này phài trai qua mot qua trình bién dói sàp xép lai cà'u trùc phàn tu mói bién thành enzym boat dong dugẹ Trypsin là enzym thuy phàn protein, duge su dung trong viéc tàch mó cùa té bào tao ra càc té bào riéng lẹ Trypsin thuy phàn càt lién két peptit cùa protein nói càc màng
tè' bào mò. Phàn lón té bào bié'u mó, trong càc mao mach va nhiéu noi ò
khoàng gian bào ta co thè gap glucoprotein va polysaccarit ò dang axit hyaluron hoàc gàn day nguói ta goi là glucocalyx de chi sir co màt cùa càc màng polysaccarit va glucoprotein bao boc té' bàọ Càc bé màt té' bào tiét ra chà't kè trén, tuy ràng khóng phài là càn thiét hoàn toàn dé'n su toàn ven cùa té' bào, nhir sau này chung ta dà thà'y nò dóng vai trò rat quan trong trong viéc càc té' bào hofp lai thành mó. Trong tó chirc lién ké't hyaluron dòng vai trò chi dao thàm thà'ụ Su duy tri càc vi mói tmòng cùa té bào nhùng tàng bao boc ngoai bào này co thè ành huong dé'n nóng dò càc chat khàc nhau trén bé màt té' bàọ Khóng chi vi hoat dóng nhu barie thàm thà'u ma con ành huòng dé'n nóng dò cation cùa mói tiiròng té' bàọ Tir quan diém này nò tucmg tir nhu viéc trao doi ion trong hoà hoc. Càc glucocalyx bao boc màng té' bào nhay
càm, kfch thich cùa té' bào co, vi du nhu khà nàng giù \a\ ion Nâ, nguoc lai
axit hyaluron co thè thay dói rat manh thàm chi làm dói hàn trén dién tich bé màt té' bào va dò pH. Day chfnh là nguyén nhàn cùa sir thay dói hoat tfnh cùa càc enzym trén màng té bào noi ma co thè tàch chùng ra khòi càc vi mó trong tè' bàọ
ạ Tàch té bào bang trypsin.
Trong qua trình tàch tè' bào tu mò bang trypsin theo phuong phàp thóng tlìiróng, SÓ luong té bào duoc tàch chua cao con nhiéu mó chua duoc tàch. Do cà'u trùc cùa màng va càc lién ké't giùa càc té' bào rat phùc tap nén khà nàng hoat dòng cùa tàm hoat dòng cùng bi ành huong. Khi hoat dòng de thuy phàn protein tàm hoat dong phài làm càng hoàc xoàn càc lién két de be gay càc lién két nàỵ Viéc tàch té' bào khòi mó bang phuang phàp co hoc cQng gay ành huong khòng it tói màng té' bào, nhà't là dói vói nhùng té' bào vira duoc tàch khòi mò. Bình thuòng enzym dugc bao boc kfn trong màng lypoprotein cùa lysosom bi phà vò hoàc bi tón thuòng, càc he enzym cùa nò bi giài phóng
ra se làm tiéu huy cà té bàọ Mot diéu dàng chù <j nùa là trong té bào song
nguyén ven, enzym thuòng chua boat dóng dé'n mùc tói da va nhùng diéu kién trong co thè cùng chua phài là nhùng diéu kién thfeh hgp nhà't cho su boat dòng cùa enzym. Trong càu tme cùa mó, càc té bào thuòng ò nhCnig giai doan phàt trién khàc nhau: kì dàu, kì giùa va kì cuòị Nhùng té bào ò ki dàu con non tre, hoac ki giùa dang phàn chia, trong qua trinh trypsin hoà gay ành huòng hoàc tén thuòng tói càc té bào này va day cùng là diéu kién de enzym cùa nò dugc giài phóng. Két qua té bào chét nhiéu sau hai ngày nuói cày, su phàt trién cùa té bào kém va thua hon.
b. Tàch té bào bang trypsin axit annn.
Mijc dfeh de tàch duge nhiéu té bào sÓng tu mó, chùng tói tién hành nghién cuu dua thém 9 axit amin co bàn vào dung dich trypsin de tàch té bào nhu dà trinh bay ò trén. Qua thuc nghiém chùng tói thày lugng té bào tàch dugc nhiéu hon tu mò trong cùng diéu kién nhu tàch bang trypsin. Chùng tói nghì ràng, eó thè thành phàn axit amin eó mot so khà nàng tfch cuc sau:
Nhóm imidazol cùa bistidin eó khà nàng tàc dung vói nhóm bidroxyl cùa serin (eó thè bang eàch tao lién két hidio) va dà làm tàng khà nàng phàn img cùa nhóm này lén nhiéu làn. Trong trypsin ngoài nhóm serin boat dóng, histidin cùng eó vai trò quan trgng trong tàm boat dóng, dàn xuàt cùa histidin boat dóng gàn vói nhùng co chà't. Nhóm idimazol cùa histidin là mot trong nhùng chat xùc tàc axit-bazo khà manh. Nhò eó su xùc tàc axit-bazo ma pH cùa mói truòng ò mùc ón djnh, trung tinh hon trong qua trinh trypsin boa so vói trypsin khóng eó axit amin, nóng dò H^ va OH" rat thàp.
Lysin va arginin thuge nhóm axit amin kiém co tàc diing trung hoà phàn nào nhóm eaeboxyl tu do cùa axit neuramin làm giàm tfnh (-) cùa bé màt té bàọ Su eó màt cùa axit amin làm tàng toc dò chuyén dóng cùa phàn tu