Cytochrome- P450(Cyt-P450) (theo danh pháp c�a H�i hoá sinh qu�c t� là heme-thiolate-P450) là m�t ��i gia �ình nh�ng protein ch�a hem xúc tác cho s�chuy�n hoá nhi�u cơ ch�t n�i sinh không ưa nư�c (steroid, acid béo, các vitamine tan trong m�, prostaglandin, leukotrien và thromboxan…) và nh�ng h�p ch�t ngo�i lai, l� ��i v�i cơth�. Vai trò c�a các h�th�ng Cyt-P450 trong cơth�ngư�i, ��ng v�t và các sinh v�t khác là c�c k�quan tr�ng ��i v�i s�thích �ng môi trư�ng, t�n t�i, và phát tri�n.��nh ngh�a t�ng quát v� vai trò c�a ��i gia �ình các enzyme này do Peter Guengerich (1995) �ưa ra cú l� �ó là ��y��: ôChỳng b�o v�cơth�
ch�ng l�i s� ô nhi�m môi trư�ng, kh� ��c các thu�c và t�ng h�p m�t s�phõn t�quan tr�ng c�a cơth�ằ.
Trong m�t ngày, m�i ngư�i chúng ta thư�ng nh�n vào cơ th�
mình kho�ng 1000 lo�i phân t� khác nhau qua �ư�ng�n, u�ng, hít th�, ti�p xúc qua da…. M�t s�trong �ó là ngu�n dinh dư�ng cho cơ th�như protid, lipid, glucid và m�t s� mu�i kim lo�i. Chúng �ư�c chuy�n hoá trong h� th�ng chuy�n hoá nh�t ��nh �ã�ư�c ch�n l�c t�nhiên qua nhi�u n�m. Còn v�i nh�ng ch�t có ��c tính cho cơth�, ví d�như các h�p ch�t t�cây c�, thu�c tr�sâu, các dư�c ch�t, hoá ch�t… mà nhi�u khi các ch�t này có th� chuy�n hoá thành nh�ng ch�t nguy hi�m, thì cơth�s�ph�n�ng ra sao? S�không th�là hi�n th�c n�u cơth� t�o ra m�t h� th�ng enzym ph�c t�p và��c hi�u��
gi�i quy�t v�i m�i m�t phân t�m�i l�t vào cơth� theo cách riêng c�a nó ngoài s�mong mu�n c�a ta. Nhưng vi�c lo�i tr�các ch�t l�
này ph�i�ư�c th�c hi�n ngay v�i b�t k�phân t�không mong mu�n nào. M�c dù h�th�ng mi�n d�ch �óng vai trò quan tr�ng trong b�o v�cơth� nhưng v�n c�n m�t con �ư�ng khác �� cơth� t� b�o v�.
Các enzym Cyt-P450 chính là m�t l�c lư�ng hùng h�u c�a h�th�ng kh� ��c cho cơ th�. N�u không có h� th�ng enzyme này, ch�c ch�n cơ th� chúng ta s� b� nh�n chìm trong hàng ngàn ch�t ��c gây ô nhi�m môi trư�ng.
Cyt-P450 �ư�c bi�t là �óng vai trò trung tâm trong s�kh� ��c và ho�t hóa s�lư�ng l�n các ch�t ngo�i lai khác nhau, k�c�các lo�i thu�c mà chúng ta s� d�ng cho phòng và �i�u tr� b�nh. H� th�ng enzym có m�t trong microsome gan c�n có NADPH và nguyên t�
oxy �ã �ư�c ghi nh�n nhưlà các enzym chuy�n hóa thu�c. Thành t�u��t�ư�c trong nh�ng th�p k�g�n�ây góp ph�n gi�i thích v�tác
��ng khác nhau c�a Cyt-P450 trong microsome gan, m�i lo�i trong
�ó ho�t��ng trùng l�p nhau nhưng có s�phân bi�t��c hi�u cơch�t
��i v�i các ch�t ngo�i lai.
3.3.2. T�m quan tr�ng v�dư�c h�c và ��c h�c c�a s�chuy�n hóa thu�c
S� chuy�n hóa các ch�t hóa h�c b�i Cyt-P450 thư�ng d�n t�i s� t�o thành nh�ng ch�t chuy�n hóa không ho�t��ng v� m�t dư�c h�c. Nh�ng ch�t chuy�n hóa �ư�c t�o ra như v�y là ��i tư�ng cho ph�n �ng liên h�p pha 2, t�o ra nh�ng ch�t chuy�n hóa phân c�c nhi�u hơn bao g�m liên h�p glucuronid và sulfat hóa, các ch�t này �ư�c �ào th�i hoàn toàn qua nư�c ti�u và m�
hôi. Cơ ch� kh� ��c này là cơs� �� xác ��nh v� ho�t tính dư�c lý c�a nh�ng thu�c nh�t ��nh và là m�t y�u t� quan tr�ng trong
vi�c phân tích ��ng dư�c h�c c�a thu�c. Nh�ng ví d� khác là s�
ho�t hóa các thu�c, m�t s� thu�c th� hi�n ho�t tính dư�c lý ch�
sau khi �ư�c chuy�n hóa b�i Cyt-P450 và các enzyme khác.
Tuy nhiên khái ni�m ho�t hóa chuy�n hóa là phù h�p �� ch�
nh�ng thu�c m�i �ư�c th� hi�n là ho�t ��ng sau khi �ư�c ho�t hóa chuy�n hóa (t� nh�ng ti�n ch�t thu�c- prodrug). Nh�ng ch�t chuy�n hóa ho�t ��ng thư�ng �ư�c t�o thành m�t cách t�
t� sau khi u�ng thu�c ti�n ch�t, d�n t�i s� kéo dài ho�t ��ng.
Liên quan ��n �i�u này, s� duy trì m�t ch�t chuy�n hóa ho�t
��ng trong máu �n�ng �� tương ��i h�ng ��nh s� làm gi�m các
�nh hư�ng ph� x�y ra c�a thu�c. M�t ví d� khác v� s�ho�t hóa chuy�n hóa là s� t�o thành các ch�t chuy�n hóa ho�t ��ng ho�c tái ho�t ��ng v� m�t hóa h�c c�a các xenobiotic.
Acetaminophen �ư�c bi�t rõ nh�t là �ư�c ho�t hóa b�i Cyt- P450 �� t�o thành m�t ch�t tái ho�t ��ng, gây ra t�n thương gan, xơ gan. Ví d� khác n�a là s� ho�t hoá nh�ng ch�t hóa h�c gây ung thư, ph�n nhi�u b�i Cyt-P450 và m�t ph�n b�i các enzym pha 2 �� t�o thành nh�ng ch�t trung gian ph�n �ng hóa h�c không b�n. Nh�ng ch�t này �ư�c t�o ra s�liên k�t ��ng hóa tr� v�i DNA và kh�i ��ng quá trình ung thư. Ch�t trung gian ho�t ��ng không ch� liên k�t v�i DNA mà còn v�i protein và ph�n hem c�a Cyt-P450.
S� liên k�t này c�a ch�t chuy�n hóa ho�t ��ng vào hem c�a phân t�Cyt- P450 s� c�n tr�s�liên k�t c�a CO vào hem, d�n t�i làm gi�m s�lư�ng Cyt-P450 có th� �ư�c phát hi�n (xem ph�n�ng phát hi�n Cyt-P450 � chương I). S� liên k�t c�a ch�t trung gian ho�t ��ng vào ph�n protein c�a Cyt-P450 c�ng gây ra s� b�t ho�t
��i v�i Cyt-P450. Vì Cyt-P450 t� nó t�o ra ch�t chuy�n hóa trung gian “gi�t ch�t” nó như v�y nên còn �ư�c g�i là “nh�ng ph�n �ng t� sát”. Ngư�i ta �ã suy di�n r�ng s� t�o thành m�t complex Cyt- P450 s� d�n t�i vi�c t�o thành nh�ng kháng th� t� mi�n ��i v�i Cyt-P450 � nh�ng b�nh nhân b� viêm gan do dùng thu�c như là acid chienilic. Ngư�i ta v�n chưa bi�t li�u nh�ng kháng th� ��i v�i Cyt-P450 có ph�i là nguyên nhân d�n t�i b�nh viêm gan gây ra b�i thu�c không. Nh�ng phát hi�n này �ã�ư�c công b�m�i�ây và c�n ph�i �ư�c ti�p t�c nghiên c�u m�t cách rõ ràng. �� kh�ng ��nh t�m quan tr�ng v�m�t ��c h�c c�a s�xu�t hi�n các kích thích t� mi�n thì c�n thi�t ph�i phát tri�n m�t phương pháp �áng tin c�y �� thu
�ư�c kháng th�t�mi�n� ��ng v�t th�c nghi�m.
3.3.3. S�chuy�n hóa các h�p ch�t l�trong gan do Cyt-P450 xúc tác Cyt-P450 có th�xúc tác m�t s�lư�ng l�n các ph�n�ng oxy hóa kh�, ví d� v� nh�ng ph�n �ng chuy�n hóa xúc tác b�i Cyt-P450
�ư�c ch�ra �b�ng dư�i�ây.
B ng 3.1. Nh�ng ph�n�ng chuy�n hóa b�i Cyt-P450
Ph n ng oxy hóa Ph n ng kh
S�th�y phân h�p ch�t béo S�th�y phân các ch�t thơm Kh�nhóm alkyl
N- dealkyl hóa S- dealkyl hóa O- dealkyl hóa Kh�amin Kh�sulfat Epoxi hóa
S�kh�azo S�kh�nitro
S�kh�hydroxy amin S�kh�c�a expoxid S�kh�c�a N- oxid S�kh�nhóm halogen
3.3.4. Nh�ng y�u t�c�n thi�t cho s�chuy�n hóa các thu�c��i v�i m�t h�th�ng monooxygenase tái t�o ch�a Cyt-P450
�� oxy hoá �ư�c cơ ch�t là thu�c, c�n có các �i�n t�cung c�p cho phân t� oxy. Như v�y, �� tái t�o m�t h� th�ng oxy hóa thu�c b�i monooxygenase c�n thi�t ph�i có NADPH và PCR tinh s�ch và Cyt-P450. Thêm vào các c�u t� này, c�ng c�n ph�i có lipid và Cyt b5 (trong m�t s� trư�ng h�p) �� ��t �ư�c ho�t tính t�i �a c�a Cytochrome P450. Strobel và cs là ngư�i �� xu�t ��u tiên v� vi�c c�n có lipid cho h� th�ng tái t�o này. Trong s� nh�ng lipid �ư�c kh�o sát, dilauryl L-3 phosphatidyl cholin, chu�i 12C, cho ho�t tính cao ��i v�i h� th�ng tái t�o và sau �ó �ã �ư�c s� d�ng ph� bi�n.
Vi�c thêm lipid vào là ��cho reductase g�n k�t ch�c n�ng v�i phân t�Cyt-P450 trong quá trình chuy�n�i�n t�.�ng h�ý ki�n này c�ng
�ã có công b� r�ng lipid s� có th� �ư�c thay th� b�ng m�t s� ch�t t�y r�a không ion hóa. Hơn n�a, ngư�i ta c�ng th�y r�ng lipid không ph�i là m�t �òi h�i tuy�t ��i khi chu�n b� m�t h� th�ng tái t�o g�m CPR và Cyt-P450 �ư�c tr�n v�i nhau � n�ng �� cao r�i m�i pha loãng. Tuy nhiên nh�ng nghiên c�u m�i�ây t�ít nh�t hai
phòng thí nghi�m�ã ch�ra r�ng Cyt-P450 c�a gia �ình 3A có th�tái t�o t�t hơn �� cho ho�t tính n�u lipid chi�t su�t t� microsome gan
�ư�c thêm vào. Nguyên nhân cho k�t qu� này v�n chưa �ư�c gi�i thích rõ ràng. Nh�ng k�t qu� nghiên c�u �ư�c làm � phòng thí nghi�m c�a Estabrook ch�ng minh v� s� hi�p ��ng c�a NADH trong ph�n �ng oxy hoá thu�c ph� thu�c NADPH. Khi phân tích gi�a s� lư�ng oxy hóa thu�c và s� oxy hóa NADH và NADPH, ngư�i ta �ã d� �oán r�ng Cyt b5 �óng vai trò trong chuy�n hóa thu�c như ch�t cho �i�n t�th� 2 trong hai �i�n t�c�n thi�t cho s�
oxy hóa m�t phân t�cơch�t thu�c.
Vai trò c�a Cyt b5 trong s� oxy hóa thu�c �ã �ư�c ch�ng minh b�ng thí nghi�m h� th�ng tái t�o ch�a s�n ph�m tinh s�ch c�a Cyt- P450, CPR và các c�u t�khác. Vi�c thêm Cyt b5 �ã làm t�ng ho�t��
c�a Cyt-P450. Nh�ng thí nghi�m v�i ch� ph�m enzym bi�u hi�n trong các t�bào th�n kinh c�a ngư�i sau �ó�ã ki�m��nh s�tham gia c�a Cyt b5. Trong nh�ng công trình khác nhau, Cyt b5 �ã �ư�c ��
xu�t �� làm t�ng ho�t tính Cyt-P450 b�ng cách t�ng ái l�c c�a Cyt- P450 v�i cơch�t. S�t�ng oxy hóa thu�c b�i Cyt b5 c�ng�ư�c th�y là b�ph�thu�c vào cơch�t và các d�ng Cyt-P450 �ư�c s�d�ng.
3.3.5. S�chuy�n hóa xenobiotic b�i Cyt-P450
Nhi�u d�ng Cyt-P450 �ã �ư�c tinh s�ch t� microsome gan � nhi�u phòng thí nghi�m khác nhau. M�i d�ng �ư�c ký hi�u b�ng m�t tên theo quy ��nh c�a phòng thí nghi�m �y tu� theo s� di chuy�n tương ��i trong �i�n di SDS-PAGE (Sodium-Dodecyl- Sulfate-Polyacrylamid-Gel-Electrophoresis, SDS-polyacrylamid gel) và theo cơch�t�ư�c th�nghi�m��c hi�u t�i�ó. Nói cách khác, tên c�a ch� ph�m Cyt-P450 tinh ch� �ã �ư�c ��t theo ý thích c�a nhà nghiên c�u. Tính ph�c t�p v� thu�t ng� c�a Cyt-P450 �ã h�n ch�
nh�ng ngư�i m�i b�t ��u l�nh v�c nghiên c�u này hi�u �ư�c th�c ch�t c�a m�t d�ng Cyt-P450 nào �ó có liên quan. �� gi�i quy�t v�n
�� này, các d�ng c�a Cyt-P450 gi� �ây �ư�c x�p lo�i d�a trên s�
gi�ng nhau v� trình t�. Vì s�xác ��nh chính xác trong s�các d�ng
�ư�c tinh s�ch c�a Cyt-P450 t� các phòng thí nghi�m khác nhau không th� ��t�ư�c tr�khi các ch�ph�m tinh ch� �ư�c trao ��i. T�
các s� li�u công b�, ngư�i ta g�p nh�ng d�ng gi�ng nhau v� ��c tính s�c ký, thu�c tính quang ph�, cơ ch�t��c hi�u và trình t� axit amin ��u N c�a ch�ph�m tinh s�ch.
Tính ��c hi�u cơch�t nói chung �ã �ư�c ghi trong nh�ng d�ng
�áp �ng nh�t��nh c�a Cyt-P450 qua các loài ��ng v�t. Ví d� Cyt- P450b t� các lo�i chu�t �ư�c kích thích t�ng h�p b�ng Phenobarbital (PB) t� ra tương t� ��c hi�u cơ ch�t v�i Cyt- P450LM2 t� th�. Tuy nhiên, ngư�i ta c�ng ghi nh�n r�ng m�t cơ ch�t ��c hi�u có th� không �ư�c xác ��nh khi s� d�ng h�p ch�t l�
nhưnh�ng cơch�t vì cơch�t th�c c�a m�t d�ng Cyt-P450 có th�là m�t h�p ch�t n�i sinh. ��c�i�m khác n�a là ch�có m�t s�lư�ng có h�n các cơ ch�t ngo�i lai �ã �ư�c s� d�ng �� thí nghi�m tính ��c hi�u cơch�t. N�u ngư�i ta mu�n s�d�ng nhi�u cơch�t bao g�m c�
các s�n ph�m t�nhiên, nh�ng cơch�t t�t hơn cho nh�ng �ng d�ng khác nhau c�a Cyt-P450 có th� �ư�c phát hi�n, c�n thi�t ph�i nghiên c�u tính ��c hi�u, s� d�ng s� lư�ng l�n các cơ ch�t, bao g�m các h�p ch�t t�nhiên nhưlà terpene, alkaloid, ch�t béo và các ch�t khác.
3.3.6. S�chuy�n hóa các xenobiotic b�i Cyt-P450 �ư�c bi�u hi�n trong n�m men và các t�bào khác
Nhi�u d�ng c�a Cyt-P450 ��n nay �ã �ư�c dòng hóa. cDNA
�ư�c dòng hóa �ã là ��i tư�ng cho vi�c t�o ra nh�ng protein ��
phân tích ch�c n�ng c�a chúng. Cách này �ư�c �ưa ra l�n ��u tiên b�i Ohkawa và cs v�i cDNA c�a Cyt-P4501A1 c�a chu�t�ư�c bi�u hi�n trong n�m men. Nh�ng enzym �ư�c bi�u hi�n th� hi�n ho�t tính th�y phân benzo [a] pyrene và cơ ch�t khác nhau � t�c ��
tương t� v�i t�c �� c�a nh�ng ch� ph�m tinh s�ch c�a Cyt-P450.
Ti�p theo �ó, �ã xu�t hi�n nhi�u các công b� khi thí nghi�m ti�p theo v� ch�c n�ng c�a các d�ng Cyt-P450 có s� d�ng các protein
�ư�c bi�u hi�n. Các enzym �ư�c bi�u hi�n có th� �ư�c t�ng h�p t�i m�c �� có cùng c�u trúc b�c 4 như ch� ph�m �ư�c tinh ch� t�
microsome gan vì thu�c tính xúc tác c�a các enzyme �ư�c bi�u hi�n v�cơb�n là gi�ng nhau. Nhưv�y, có th�thu �ư�c enzym ch�ph�m m�t cách kinh t�b�ng cách này cho nh�ng m�c�ích ti�p theo. ��u tiên enzym có th� �ư�c phân tích m�i liên quan c�u trúc-ch�c n�ng b�ng cách bi�n��i c�u trúc cDNA v�i s�t�o ra cDNA kh�m ch�a hai ho�c nhi�u lo�i cDNA khác nhau và b�ng cách gây ��t bi�n tr�c ti�p v� trí gen. Cách th 2, enzym có th� có ch�c n�ng c�a m�t protein ��ng d�ng ho�c không ��ng nh�t. Nhi�u d�ng Cyt-P450 v�i trình t�axit amin tương t�cao �ã�ư�c công b�, các d�ng có s�d�
h�p t�r�t ít (microheterogeneity). Có th�ngư�i ta không tách �ư�c
nh�ng protein này b�i các phương pháp tinh ch� thông thư�ng do v�y �ây ch� là cách �� phân tích chính xác thu�c tính xúc tác c�a m�t isoform c�a Cyt-P450. Th 3 là: có th� thu �ư�c s� lư�ng không gi�i h�n c�a protein mà protein này �ư�c bi�u hi�n hi�u qu�.
�i�u này có th� r�t có ích ��i v�i s�so sánh r�ng rãi v�ch�c n�ng c�a m�t protein nh�t��nh. N�u Cyt-P450 c�a ngư�i có th�cung c�p cho nh�ng nghiên c�u ti�n lâm sàng, thì �i�u này s� cung c�p nh�ng thông tin quan tr�ng v� �� an toàn c�a thu�c. N�u th�t b�i trong bi�u hi�n Cyt-P450 v�ho�t tính xúc tác, ch� ph�m v�n có th�
�ư�c s�d�ng cho vi�c thu kháng th� �ơn và �a dòng �� phân tích s�chuy�n hóa thu�c, s�d�ng microsome.
3.3.7. Các cơ ch�t và ph�n �ng chuy�n hóa c�a Cyt-P450 trong các t�bào c�a��ng v�t
S� ��c hi�u cơch�t c�a Cyt-P450 �ã �ư�c thí nghi�m v�i ch�
ph�m Cyt-P450 tinh ch�t�microsome gan c�a nh�ng��ng v�t th�c nghi�m. Ch� ph�m Cyt-P450 tinh s�ch, th�m chí n�u nó th� hi�n m�t b�ng trên SDS-PAGE là không c�n thi�t ph�i nghi�n ��ng th�
vì có th� là hai ho�c nhi�u d�ng c�a Cyt-P450 có cùng m�t kh�i lư�ng phân t� �ã�ư�c tinh s�ch cùng m�t lúc. �� gi�i quy�t v�n��
này và xác ��nh chính xác thu�c tính c�a nhi�u d�ng c�a Cyt-P450 chúng �ã�ư�c bi�u hi�n�con men và nh�ng t�bào khác nhau bao g�m c�nh�ng t�bào �ư�c xác ��nh là ung thư. Nh�ng isozym �ư�c bi�u hi�n này là ��i tư�ng �� th� nghi�m v� s� chuy�n hóa xenobiotic. Thu�c tính chính xác c�a nh�ng d�ng Cyt-P450 �ó
�ư�c ch�ra �b�ng 3.5 bao g�m nh�ng ch�ph�m�ư�c tinh s�ch và nh�ng d�ng �ư�c bi�u hi�n c�a Cyt-P450 thu�c gia �ình và dư�i gia
�ình Cyt-P450.
Cytochrome-P450 1 là enzym chuy>n hoá thu@c
Gia �ình này là m�t t�p h�p c�a hai dư�i gia �ình Cyt-P4501A1 và Cyt-P4501A2, Cyt-P4501 �ư�c ghi nh�n như Cyt-P448 vì c�
Cyt-P4501A1 và 1A2 ��u có ��nh h�p th� � 448nm � quang ph�
phân bi�t v�i CO. Nh�ng Cyt-P450 �ư�c t�ng h�p khi kích thích t�ng h�p b�ng 3MC (3-methylcholanthrene) và nh�ng hydrocacbon
�a vòng nhân thơm khác. Cyt-P4501A1 �ư�c ��c trưng ��i v�i h�
s� cao c�a nó trong s� th�y phân benzo (a) pyzene � v� trí 3 và 9, trong khi các d�ng khác c�a Cyt-P450 c�ng có kh� n�ng xúc tác cùng m�t ph�n �ng. M�c dù 7- ethoxycoumarin �ư�c deethyl hoá
b�i nhi�u d�ng c�a Cyt-P450, Cyt-P4501A1 xúc tác ph�n �ng này có l� � t�c �� nhanh nh�t. S� vòng ph�n �ng (nmole 7-hydroxy coumarin �ư�c t�o thành/nmole P450/phút) c�a 7- ethoxycoumarin 0-deethylation c�a enzym này ��t t�i kho�ng 11. - naphthoflavone là m�t trong nh�ng ch�t �c ch� ��c hi�u c�a nhóm Cyt-P450 này.
Nh�ng nghiên c�u m�i �ây �ã ch�ra r�ng - naphthoflavone �ư�c hydroxy hóa b�i isozym này.
Hình 3.7. Cây di truy�n sinh h�c c�a dư�i gia �ình CYP1A1 và CYP1A2
Cyt-P4501A2 là d�ng �ư�c tinh ch� ��u tiên t� microsome gan th�và các thu�c tính c�a isozym này �ã �ư�c nghiên c�u m�t cách tích c�c. Không gi�ng như Cyt-P4501A1, Cyt-P4501A2 �ư�c cho là �ư�c bi�u hi�n m�t cách liên t�c trong microsome gan, m�c dù m�c �� c�a s� bi�u hi�n có th� ph� thu�c khác nhau vào các lo�i
��ng v�t. Khi Cyt-P4501A2 th� �ư�c tinh ch�, acetanitrile �ã�ư�c ngh� là cơ ch�t duy nh�t. Cyt-P4501A2 chu�t �ã �ư�c tìm th�y là ho�t hoá các ch�t gây ung thư amin d� vòng, nh�ng ch�t gây ��t bi�n bao g�m nh�ng s�n ph�m pyrolysis �ư�c tách t� th�c ph�m v�i m�c �� �nh hư�ng khác nhau. 3-MC và polychlorinated biphenyl (KC- 500) kích thích t�ng h�p c� 2 lo�i 1A1 và 1A2,
nhưng isosafrole kích thích t�ng h�p 1A2 nhi�u hơn. Ngư�i ta cho r�ng isozyme Cyt-P4501A2 �ư�c t�ng h�p c�m�ng�� chuy�n hóa isosafrole t�o thành m�t h�p ch�t chuy�n hóa m�i .
Nghiên c�u m�i�ây �ã ch�ra r�ng m�c dù Cyt-P450 th�hi�n s�
trùng l�p ho�c m�t tính ��c hi�u cơch�t, m�t s�d�ng c�a Cyt-P450 th� hi�n s� ��c hi�u chuy�n hóa vùng ��i v�i nh�ng cơ ch�t nh�t
��nh. Cyt-P4501A2 th�y phân R- và S- wafarin �v� trí 6 và 8, m�t cách tương �ng.
CYP 1B1: Cyt-P4501B1 �ư�c bi�u hi�n � m�t s� mô � ngư�i mà trong mô �ó xu�t hi�n ung thư(vd. Ti�n li�t tuy�n, bu�ng tr�ng, t�cung, tuy�n vú). Cyt-P4501B1 ho�t hóa nhi�u ch�t gây ��t bi�n t� môi trư�ng và c�ng xúc tác s� th�y phân v� trí cacbon s� 4 � phân t�estrogene, ph�n �ng này �ư�c coi là m�t bư�c quan tr�ng trong s�hình thành ung thưcó liên quan ��n hormone.
Cyt-P450 2 là enzym chuy>n hoá thu@c và steroid
Gia �ình này �ư�c bi�t là chia nhánh l�n và r�ng nh�t trong các gia �ình Cyt-P450 bao g�m 16 dư�i gia �ình, 16 gen và 16 gi�gen (David Nelson, 2003). M�t s� trong gia �ình này (2B1, 2B2, 2C1, 2C2, 2C4, 2C6 và 2C16) �ư�c t�ng h�p c�m�ng b�i Phenobarbital (PB) và nh�ng h�p ch�t ngo�i lai khác. Các d�ng c�a Cyt-P450 trong gia �ình này là ��c trưng cho ��c hi�u gi�i tính bi�u hi�n � chu�t c�ng, chu�t nh�t và có l�là �c�chu�t hamster. S�bi�u hi�n gi�ng ��c c�a các d�ng này c�a Cyt-P450 rõ ràng là �ư�c gây ra b�i hormon gi�i tính, và tr�c ti�p b�i s� ti�t c�a hormon sinh trư�ng.
Cyt-P4502A: isozyme �ã�ư�c tinh s�ch là nh�ng Cyt-P450 t�
chu�t. Isozyme này không ho�t ��ng ��i v�i s� chuy�n hóa xenobiotic nhưng �ư�c bi�t là th�y phân testosterol và steroid � v�
trí 7 và 15 . Cyt-P4502B �ã �ư�c tinh ch� l�n ��u tiên t�
microsome gan, s� thí nghi�m v�i d�ng này �ã cung c�p nhi�u thông tin cơb�n liên quan t�i b�n ch�t c�a Cytochrome này, ví d�
ch� ph�m tinh s�ch t�n t�i ho�t tính chuy�n hóa các thu�c, �i�u �ó gi�i thích m�c �� kích thích t�ng h�p c�a s� chuy�n hóa thu�c
�ư�c th�y trong microsome gan và �nh�ng ��ng v�t x� lý v�i các inducer (ch�t kích thích t�ng h�p hay là ch�t gây t�ng h�p c�m
�ng), kháng th� ��i v�i isozyme này có kh� n�ng �c ch� m�t enzyme và m�t cDNA dòng hóa mã hóa cho enzyme này �ã �ư�c phân tích trình t�toàn b�các axit amin.
Cyt- P4502B: th� hi�n m�t s� ��c hi�u th�p v�i cơch�t khi so sánh v�i t�t c� các d�ng Cyt-P450 khác và có th� xúc tác ph�n �ng oxi hóa bi�n��i m�t lư�ng l�n c�a các cơ ch�t ngo�i lai. Benzphetamin �ư�c demethyl hóa b�i d�ng isozyme c�a chu�t c�ng và th� � m�c �� r�t hi�u qu�. S� lư�ng chuy�n hóa c�a cơ ch�t này thay ��i gi�a 40-80 ho�c cao hơn. 7- pentoxycoumarin �ã�ư�c công b� là �ư�c chuy�n hóa ��c hi�u b�i isozyme Cyt-P4502B. Biphenyl �ư�c th�y phân � v� trí 4 b�i enzyme này.
Cyt-P4502C: g�m có P450f, P450g, P450h, P450i và P450 k.
Cyt-P450h và Cyt-P450i �ã �ư�c tinh ch� như là Cyt-P450 gi�ng
��c và Cyt-P450 gi�ng cái, m�t cách tương �ng, và �ư�c phát hi�n là isozyme ��c hi�u gi�i tính. Hai d�ng này c�a Cyt-P450 bi�u hi�n tương t� trên c�t khi tinh ch�. Kháng th� �a dòng (Polyclonal antibodies) c�a enzyme này ph�n �ng chéo v�i nhau. Th�c t�, s�
phân tích cDNA clones �ã ch� ra r�ng trình t� c�a hai polypeptid này là tương ��ng cao, g�i ý r�ng 2 isozyme này phân nhánh t�
cùng m�t gen t�tiên. M�c dù c�u trúc tương t�cao c�a chúng, Cyt- P450h (P450 gi�ng ��c) xúc tác s� oxi hóa c�a nhi�u cơ ch�t bao g�m các thu�c và testosterol (2 , 16 ) trong khi Cyt-P450i (P450 gi�ng cái) th� hi�n ho�t tính ��i v�i m�t s� lư�ng cơ ch�t r�t h�n ch�. Nh�ng cơch�t �ư�c bi�t ��n c�a Cyt-P450i là ethylmorphine (N-demethylation) và 5 -androstane-3 17 -diol 3,17-disulfate (15 hydroxylation). Aflatoxxin B1 �ư�c ho�t hóa thành m�t ch�t gây ��t bi�n b�i các d�ng Cyt-P450, như là thí nghi�m c�a Amestest. Cyt-P450h (P450male) c�ng có th� ho�t hóa ch�t có th�
n�ng gây ��t bi�n/ carcinogene.
Cyt- P450 2C9 là m�t Cyt-P450 ch� y�u tham gia vào s�
chuy�n hóa th�i tr�c�a r�t nhi�u lo�i thu�c�i�u tr�b�nh, bao g�m nh�ng ch�t kháng viêm không steroid, nh�ng thu�c u�ng ch�ng
�ông t�và thu�c u�ng làm h� �ư�ng huy�t. S�r�i lo�n v�ho�t tính c�a Cyt-P4502C9 gây ra b�i s� �c ch�chuy�n hóa ho�c s�bi�n��i v� ph�n �ng v�i thu�c gi�i thích cho nhi�u các ph�n �ng kháng thu�c có liên quan t�i enzyme. Cyp 2C9 c�ng là Cyt-P450 c�a ngư�i��u tiên �ư�c k�t tinh và cơs�c�u trúc ��i v�i s� ch�n l�c cơ ch�t và ch�t�c ch� �ang tr�nên rõ ràng hơn. M�i �ây ngư�i ta
�ã t�ng h�p�ư�c các ch�t�c ch�siêu m�nh c�a CYt-P450 2C9 góp ph�n vào s� phát tri�n nh�ng mô hình lư�ng hóa m�i tương quan