Mang là cơ quan hô hấp của tôm càng xanh nằm ở gốc các đôi phần phụ của phần đầu ngực, từ đôi chân hàm số 1 đến đôi chân hàm số 5. Khoảng trống giữa nội quan và giáp đầu ngực gọi là xoang mang. Sự hoạt động của các đôi phần phụ ở phần ngực ngoài việc đưa thức ăn vào miệng còn có ý nghĩa là tạo dòng nuớc lưu thông qua xoang mang. Do đó hàm lượng oxy hòa tan trong nước ở mang luôn cao, giúp cho quá trình hô hấp ở mang được thuận lợi.
Ngoài ra, mang còn có chức năng bài tiết Ammonia, hấp thu các chất khoáng có trong môi trường và điều hòa áp suất thẩm thấu (trích dẫn theo Phạm Trần Nguyên Thảo, 2003).
Mang được cấu tạo bởi những phiến mang có hình lông chim (hình 4.1). Trên phiến mang có các sợi mang, gọi là các sợi mang sơ cấp (hình 4.1-B), một đầu nối với trục còn một đầu hướng ra ngoài và giữa các sợi mang tạo thành một khoảng không gian gọi là các khe mang. Trên sợi mang sơ cấp có các sợi mang thứ cấp (hình 4.2-B). Các sợi mang có khung cutium (hình 4.4-A) nâng đỡ và bên trong có nhiều mạch máu phân bố (hình 4.2-C).
Qua quan sát tiêu bản mô học hình 4.4 cho thấy trong những sợi mang có những vật chất bắt màu hồng đậm của thuốc nhuộm H&E và có hình trụ, kéo dài bên trong mang (hình 4.4-C), đây có thể là những tế bào biểu mô lát đơn theo sự miêu tả của Phạm Trần Nguyên Thảo (2007). Những tế bào biểu mô này sẽ được chuyên hóa tạo thành những tế bào trụ (pillar cells), chức năng của chúng là giúp nâng đỡ khung mang (Na Li và ctv, 2006).
Nghiên cứu của Liliana Sousa và ctv (2007) cho rằng bề mặt của mỗi sợi mang được phủ bởi một lớp cutium mỏng chạy dọc theo và bắt màu hồng đậm hơn so với toàn sợi mang, những dấu hiệu này tương tự với những dấu hiệu ở hình 4.4. Các sợi mang được cấu tạo bởi những tế bào biểu mô (hình 4.4-C). Lớp biểu mô bao bọc sợi mang sơ cấp và sợi mang thứ cấp thì rất mỏng và nó thường dầy hơn ở đầu của sợi mang. Qua lát cắt có thể thấy bên trong những tế bào máu hình cầu, bắt màu tím đậm của thuốc nhuộm H&E phân bố khắp nơi trong sợi mang.
Footer Page 29 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
23
Hình 4.1 Cấu trúc đại thể của mang (H&E, 10X) Cấu trúc phiến mang có hình lông chim A Trục chính B Sợi mang sơ cấp C Mạch máu
Hình 4.2 Cấu tạo vi thể của sợi mang sơ cấp (H&E, 40X).
A Tế bào biểu mô B Sợi mang thứ cấp C Mạch máu D Lớp cutium
A
B
C D
B
A
C
Footer Page 30 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
24
Hình 4.3 Cấu trúc đại thể của mang (H&E, 10X).
A Trục chính B Mạch máu C Sợi mang sơ cấp D Sợi mang thứ cấp
Hình 4.4 Cấu trúc vi thể của mang (H&E, 10X).
A Lớp cutium B Mạch máu C Tế bào biểu mô mang.
A
B
C
D
A B
C
Footer Page 31 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
25 4.1.2 Cấu tạo vi thể dạ dày
Ruột trước của tôm càng xanh biệt hóa thành dạ dày. Dạ dày là cơ quan tiêu hóa thức ăn của tôm, bắt đầu từ phía trên thực quản kéo dài đến giữa gan tụy (hình 4.5-A, hình 4.6-A). Chức năng của dạ dày là nghiền nát và tiêu hóa thức ăn (trích dẫn theo Lightner, 1996).
Qua quan sát tiêu bản mô học ở hình 4.5 thì dạ dày có dạng túi dài, phía sau phình ra hai túi nhỏ hai bên và bao xung quanh dạ dày tôm là một lớp bắt màu tím của thuốc nhuộm H&E (hình 4.6-D). Dưới vật kính 40X, (hình 4.7) thì bên trong lớp này chứa một hàng những tế bào hình trụ bắt màu tím đậm, đây là những tế bào biểu mô trụ đơn (hình 4.7-B) và cũng là loại biểu mô có khả năng tái tạo mạnh nhất. Bao bên ngoài xoang dạ dày là những lớp tế bào bắt màu hồng nhạt và có nhân bắt màu tím đậm của thuốc nhuộm H&E. Đây là lớp mô liên kết (hình 4.7-C) và kế đến mới là lớp cơ trơn (hình 4.5-F) bắt màu hồng đậm của thuốc nhuộm H&E.
Nghiên cứu của Lightner và ctv (1988) cho rằng dạ dày là một phần của hệ tiêu hóa của tôm. Nó kéo dài từ thực quản đến phía sau của gan tụy. Dạ dày tách biệt ra làm hai phần: phần mặt lưng (hình 4.5-E) và phần mặt bụng (hình 4.5-B), thuật ngữ khác còn gọi là dạ dày tuyến trước (cho phần mặt lưng của dạ dày) và dạ dày tuyến sau (cho phần mặt bụng của dạ dày). Cả hai phần này được viền bởi một lớp kitin hay còn gọi là bề mặt nghiền. Tuy nhiên, qua các tiêu bản đã làm thì không quan sát được lớp kitin như hình 2.6. Nguyên nhân có lẽ do lớp kitin này quá mỏng, theo Lin (1996) thì lớp kitin này mỏng chỉ bắt màu hồng rất nhạt của thuốc nhuộm H&E và làm cho việc quan sát nó sẽ bị ảnh hưởng. Ở bên ngoài phần mặt lưng, có một lớp cơ hoành (hình 4.6-B) và lớp mô liên kết (hình 4.6-C) bao xung quanh dạ dày. Ngoài ra, còn có thế thấy các ống nhỏ của cơ quan lymphoid. Bên trong xoang mặt bụng thường thấy nhiều nếp gấp lớn (hình 4.6), chức năng của nó như là một sàng lọc, giúp chọn lọc thức ăn để đưa đến gan tụy. Sàng lọc này được cấu tạo bởi những lông cứng bằng kitin (hình 4.6-E) và những khe rãnh.
Theo Nguyễn Kim Cương (2006) dạ dày tôm càng xanh chia làm 2 xoang:
xoang mặt lưng (hình 4.5-E) và xoang mặt bụng (hình 4.5-B). Dạ dày có gờ cutium (hình 4.5-C) lát mặt trong là cơ quan nghiền mồi, đây là đặc điểm chung của lớp giáp xác. Đối với giáp xác bậc thấp thì cơ quan này đơn giản và hàm dưới phức tạp còn đối với giáp xác bậc cao thì ngược lại, các gờ này phát triển thành cối xay vị (hình 4.5-C). Tôm càng xanh có 3 gờ cutium dọc, gờ giữa lớn hơn. Lớp biểu mô bên trong thành ống dạ dày bắt màu tím đậm (hình 4.7-A) là biểu mô trụ đơn gồm một hàng tế bào hình trụ (hình 4.7-B) xếp sát
Footer Page 32 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
26
vào nhau tạo thành lớp với khoảng gian bào không đáng kể và tựa trên màng đáy ngăn cách với mô liên kết (hình 4.7-C), tiếp theo dạ dày là ruột.
Hình 4.5 Cấu tạo đại thể của dạ dày (H&E, 10X).
A Gan tụy B Xoang mặt bụng C Gờ cuticum (cối xay vị).
D Lớp mô liên kết E Xoang mặt lưng F Tầng cơ trơn.
Hình 4.6 Cấu tạo đại thể của dạ dày ở mặt cắt dọc (H&E, 10X ).
A Gan tụy B Cơ hoành C Lớp mô liên kết D Lớp biểu mô E Lông cứng bằng kitin
A
B D
C
F
A
B C D E
E B
Footer Page 33 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
27
Hình 4.7 Cấu tạo vi thể lớp biểu mô dạ dày (H&E, 40X).
A Lớp biểu mô B Tế bào biểu mô C Lớp mô liên kết D Xoang dạ dày
Hình 4.8 Cấu tạo vi thể lớp sàng lọc dạ dày (H&E, 40X).
A Lớp biểu mô B Tế bào biểu mô C Lớp mô liên kết D Xoang dạ dày E Sàng lọc.
A
B C
D
C
B
D
E
A
Footer Page 34 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
28 4.1.3 Cấu tạo vi thể của gan tụy
Gan nằm ở phần đầu ngực của tôm, có dạng khối, tuyến gan tụy giữ vai trò quan trọng trong quá trình tiêu hóa, gan tiết ra dịch tiêu hóa biến thức ăn thành nhũ tương, đồng thời cũng có chức năng hấp thụ thức ăn ( trích dẫn theo Phạm Trần Nguyên Thảo, 2007).
Qua quan sát các tiêu bản mô học thì cơ quan gan tụy bắt màu tím của thuốc nhuộm H&E. Gan tụy ở mặt cắt dọc (hình 4.9) có thể thấy nó là một hệ thống ống phân nhánh gồm nhiều ống nhỏ và có kết nối với ống dạ dày và ruột. Ở đầu mút của ống có nhiều tế bào bắt màu tím đậm, càng xa đầu mút (ở đoạn giữa và đoạn cuối) thì càng xuất hiện nhiều khoảng không bào (hình 4.9). Ở mặt cắt ngang của cơ quan gan tụy (hình 4.10) thì gan tụy bao gồm nhiều ống nhỏ hình tròn bắt màu tím của thuốc nhuộm H&E và trong mỗi ống có đều có xoang. Ống gan tụy sơ cấp liên kết với ống dạ dày-ruột, ống này nằm phía sau của buồng dạ dày và phía trước của đoạn cuối ruột giữa. Tuy nhiên qua quan sát các tiêu bản mô học đã làm thì không thấy được ống gan tụy này. Nguyên nhân có lẽ do thùy bụng của gan tụy nằm trải dọc và chèn phía trên ống dạ dày-ruột và khi cắt mẫu mô thì lát cắt không đủ sâu để có thể thấy được cấu trúc này. Nhánh của ống gan tụy thứ cấp bắt nguồn từ các ống gan tụy sơ cấp và được ghi nhận là chứa nhiều loại tế bào hơn.
Theo Lightner và ctv (1988) gan tụy là một hệ thống dày đặc các ống nhỏ, chúng gọi là các ống tiểu quản gan tụy (hình 4.10-A). Các ống này được xây dựng bởi các tế bào biểu mô và sợi co giãn (hình 4.12-C), khoảng giữa hai ống là xoang (hình 4.12-A). Mỗi xoang được bao bọc bởi lớp mô liên kết và sợi co giãn, bên trong chứa những tế bào máu và tế bào hai nhân. Ở mặt cắt ngang, xoang của ống tiểu quản gan tụy có “hình sao” (hình 4.10-B). Trong xoang của ống tiểu quản chứa những hạt vật chất và các tế bào bề mặt của xoang, chúng được bao bọc bởi diềm bàn chải (hình 4.12-E). Trong đoạn đầu của ống tế bào F chiếm đa số (fibrillenzellen). Ở cuối ống thường chứa những tế bào E (embryonalzellen) hoặc những tế bào hai nhân. Càng xa đầu mút của ống càng có nhiều tế bào khác như tế bào R (restzellen) hoặc tế bào B (blasenzellen). Tế bào B bên trong chứa không bào lớn, còn tế bào R chứa một lượng lớn nội bào tương thô dạng lưới và những hạt lipid.
Theo Bhavan và Geraldine (2000) mô tả, gan tụy bao gồm nhiều ống nhỏ hay còn gọi là những ống tiểu quản được chia làm 3 phần: đoạn đầu (hình 4.9-A), đoạn giữa (hình 4.9-B), đoạn cuối (hình 4.9-C). Các ống tiểu quản này kết lại rồi tập trung thành ống và đổ vào ruột giữa. Các ống này khi đóng khi ở xa tâm và mở khi ở gần tâm. Ở mặt cắt ngang của ống tiểu quản, có các xoang mạch máu (hình 4.12-A) bao quanh các ống tiểu quản, bên trong chứa các tế bào máu (hình 4.12-B). Bao xung quanh ống tiểu quản là sợi co giãn (hình Footer Page 35 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
29
4.12-C, hình 4.13-E). Khoảng trống ở giữa các ống có “hình sao” gọi là xoang ống (hình 4.11-A, hình 4.12-D, hình 4.13-A), có một lớp biểu mô lót ống và diềm bàn chải (hình 4.12-E, hình 4.13-B) Trên ống có 4 loại tế bào: tế bào E (embryonalzellen), tế bào R (restzellen) (hình 4.12-F), tế bào F (fibrillenzellen) (hình 4.12-G) và tế bào B (blasenzellen) (hình 4.14-A). Tế bào E nằm ở phần hẹp, xa tâm, cuối ống. Tế bào R (hình 4.13-C) và tế bào F (hình 4.12-G, hình 4.13-D) nằm ở một khoảng ngắn cách xa vùng ngoại biên.
Tế bào R chứa một lượng lớn lưới nội chất sần sùi và các hạt lipid. Trong khi đó tế bào F (hình 4.13-D) không có không bào và bắt màu đậm. Tế bào B nằm ở chính giữa và ở vùng gần đầu của ống. Tế bào B có chứa các hạt nhỏ là sản phẩm tiết. Ở giữa ống là các tế bào kẽ.
Hình 4.9 Cấu tạo 3 đoạn của ống tiểu quản gan tụy ở mặt cắt dọc (H&E, 10X).
A Đoạn đầu B Đoạn giữa C Đoạn cuối.
B A C
Footer Page 36 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
30
Hình 4.10 Cấu trúc đại thể của ống tiểu quản gan tụy ở mặt cắt ngang (H&E, 10X).
A Các ống tiểu quản gan tụy B Xoang ống “hình sao”
Hình 4.11 Cấu tạo đoạn đầu của ống tiểu quản gan tụy (H&E, 40X). . A Xoang ống tiểu quản gan tụy B Sợi biểu mô cơ.
A B A
B B
Footer Page 37 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
31
Hình 4.12 Cấu trúc vi thể bình thường của ống gan (H&E, 40X). . A Xoang mạch máu B Tế bào máu C Sợi co giãn D Xoang ống tiểu quản E Diềm bàn chải F Tế bào R ( tế bào không bào nhỏ) G Tế bào F.
Hình 4.13 Cấu tạo đoạn giữa ống tiểu quản gan tụy (H&E, 40X). . A Xoang ống tiểu quản B Diềm bàn chải C Tế bào R D Tế bào F E Sợi co giãn.
A B
C
D
E
F
A C B
D G
E
Footer Page 38 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
32
Hình 4.14 Cấu tạo đoạn cuối ống tiểu quản gan tụy (H&E, 40X).
A Tế bào B (tế bào không bào lớn) B Diềm bàn chải C Xoang ống tiểu quản
4.1.4 Cấu tạo vi thể ruột
Tiếp theo sau dạ dày là ruột. Ruột là một đoạn gần như thẳng chạy qua gan tụy về phía sau. Ruột giữa là nơi tiêu hóa và hấp thụ thức ăn của tôm (trích dẫn theo Nguyễn Kim Cương, 2006).
Qua quan sát tiêu bản mô học thì ruột của tôm nằm kế dạ dày (hình 4.15).
Quan sát dưới vật kính 40X (hình 4.16) cho thấy ruột được cấu tạo bởi những hạt vật chất hình trụ bắt màu tím đậm của thuốc nhuộm H&E, những hạt vật chất này xếp thành hàng bên trong ruột. Theo Na Li và ctv (2006) thì đây là lớp biểu mô do những tế bào biểu mô hình trụ liên kết với nhau. Quan sát hình 4.15, có nhiều phần gợn sóng. Martin và ctv (2004) gọi đây là những phiến nền (hình 4.15-D). Có hai loại tế bào trên phiến nền. Nhiều nhất là loại tế bào thuôn dài (hình 4.16-C) với mép bàn chải và đỉnh các tế bào chất có chứa đầy các tiểu thể và các túi rỗng chứa chất thải của tế bào. Xung quanh màng bao của nhân có các nhân hình trứng ở giữa mỗi tế bào, phần nền của mỗi tế bào chứa đầy các lưới nội chất trơn. Loại tế bào thứ hai có hình trứng nằm dọc phiến nền. Bên ngoài phiến nền là lớp mô liên kết lỏng lẻo có chứa cơ vòng và cơ dọc (hình 4.15-C), mạch máu và một lớp phi bào nội mạc bên ngoài.
Theo Lightner và ctv (1988) toàn bộ vùng phía trước của ruột giữa chạy dọc theo suốt chiều dài thân, đi qua các thùy mặt lưng và mặt bụng của gan tụy,
A
B C
A
Footer Page 39 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
33
còn vùng phía sau liên kết với dạ dày (hình 4.15-A). Ruột giữa được cấu tạo bởi lớp biểu mô do các tế bào cột đơn cấu thành (hình 4.17-C). Các tế bào này được chống đỡ gồm lớp màng cơ bản (không nhìn thấy được), một lớp cơ vòng và cuối cùng là một lớp cơ dọc (hình 4.15-C, hình 4.17-A). Bên cạnh đó, cấu trúc vi thể của một tế bào biểu mô cột đơn (hình 4.16-C) gồm nhân ở giữa và các hạt nhân lồi. Sát bề mặt của xoang tế bào là một đường viền là các chồi hoặc các lông nhỏ. Bên ngoài nhân là một vùng dày đặc các hạt cơ quan, đó có thể là các ty thể, các tiểu thể bài tiết và các hạt Golgi. Gần kề với nhân thường tìm thấy các tế bào gốc. Ngoài ra, có thể tìm thấy màng bao chất dinh dưỡng trong khoang và diềm bàn chải của ruột giữa.
Hình 4.15 Cấu tạo đại thể của ruột (10X)(H&E).
A Dạ dày B Ruột C Cơ dọc D Phiến nền
B A
C D
Footer Page 40 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
34
Hình 4.16 Cấu tạo vi thể của ruột (H&E, 40X).
A Tế bào biểu mô hình trụ B Lớp biểu mô
Hình 4.17 Cấu tạo vi thể của ruột giữa (H&E, 40X).
A Lớp cơ dọc B Lớp biểu mô C Tế bào biểu mô hình trụ D Nhân
A B
A
A D
B C
Footer Page 41 of 126.
Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
35
Hình 4.18 Cấu tạo vi thể của của phiến nền (H&E, 40X) A Lớp cơ dọc B Lớp biểu mô C Tế bào biểu mô hình trụ 4.1.5 Cấu tạo vi thể cơ quan lymphoid
Cơ quan lymphoid của tôm càng xanh là một hệ thống hai thùy, nằm ở gần dạ dày và nằm phía trước cơ quan gan tụy (A-hình 4.19). Chức năng chính của cơ quan lymphoid đóng vai trò quan trọng trong hệ thống miễn dịch, bảo vệ môi trường bên trong cơ thể, chống lại sự xâm nhập và gây hại của vi sinh vật cũng như các vật lạ trong cơ thể ( trích dẫn theo Phạm Trần Nguyên Thảo, 2007).
Qua quan sát tiêu bản mô học ở hình 4.19 thì lymphoid là một cơ quan bao gồm hai thùy, nằm gần dạ dày và gan tụy. Cơ quan lymphoid do nhiều ống nhỏ cấu tạo thành. Bên trong mỗi ống đều chứa một xoang rỗng (hình 4.20-A), thành ống chứa nhiều vật chất bắt màu tím đậm của thuốc nhuộm H&E (hình 4.19). Theo Lightner và ctv (1988) đây là các tế bào đệm cơ bản (hình 4.20-B), tế bào bạch cầu ưa kiềm, tế bào máu, mô liên kết, mô kẻ. Trong đó, các tế bào đệm cơ bản chiếm số lượng nhiều nhất. Các ống động mạch nhỏ (hay còn gọi là các ống bạch huyết) (hình 4.19-B) được kết nối với động mạch dạ dày rồi đến động mạch chủ bụng. Thường khó trông thấy tế bào nội bì, loại tế bào này thường trong, ít hoặc không có vết nhơ của tế bào chất, trong khi các loại tế bào khác bao xung quanh xoang thường bắt màu tối. Khoảng không gian giữa các ống tiểu quản được giữ bởi các xoang mạch máu và sợi mô liên kết mỏng.
A B
C
Footer Page 42 of 126.