Sử dụng đốt thân có kích thước 3 cm làm vật liệu cho nghiên cứu này.
Đốt thân được cấy theo 2 phương thức: thẳng đứng, nằm ngang trên môi trường MS cơ bản có bổ sung BAP 0,7 mg/l. Mục đích của thí nghiệm này là nghiên cứu tìm ra phương thức cấy phù hợp với từng giống để cho chất lượng chồi tốt nhất. Sau 6 tuần theo dõi, đánh giá sự phát triển của chồi mới phát sinh thông qua chiều cao chồi. Kết quả được trình bày trong bảng 3.6.
Bảng 3.6: Ảnh hưởng của phương thức cấy đến sự phát triển của chồi cúc Phương
thức cấy
Đỏ cờ Chi đỏ Kim
cương
Thạch bích Vàng hè
Thẳng đứng 3,60a±2,00 1,94a±1,25 2,68a±0,46 2,82a±0,37 2,86a±1,83 Nằm ngang 4,96a±0,53 2,60a±0,51 2,64a±0,50 2,81a±0,54 3,92a±0,43 Những chữ cái khác nhau (a, b…) trong cột thể hiện sự sai khác có ý nghĩa thống kê với α = 0,05.
Kết quả cho thấy, cả 5 giống cúc không có sự sai khác về chiều cao trung bình giữa 2 phương thức cấy. Tuy nhiên, ở các giống cúc: đỏ cờ, chi đỏ, vàng hè khi cấy theo phương thức nằm ngang thì chồi mới phát sinh không đồng đều, còn ở giống kim cương và thạch bích thì tương đối đồng đều. Sở dĩ có kết quả trên là do các giống đỏ cờ, chi đỏ, vàng hè được cấy thẳng đứng trên môi trường MS bổ sung BAP 0,7 mg/l, sau 2 tuần nuôi cấy có sự hình thành mô sẹo và phát sinh chồi mới từ mô sẹo, từ tuần thứ 3 trở đi mới thấy sự phát sinh chồi từ mắt ngủ trong khi ở phương thức cấy nằm ngang, không thấy sự hình thành mô sẹo; sau 1 tuần, phát sinh chồi mới từ mắt ngủ, do vậy, ở các giống này, phương thức cấy nằm ngang sẽ tạo ra được chồi có mức đồng đều cao hơn so với phương thức cấy thẳng đứng. Trong khi đó, 2 giống thạch bích và kim cương không có sự khác biệt giữa 2 phương thức cấy.
Hình 3.8. Ảnh hưởng của phương thức cấy đến sự phát triển chồi ở cây cúc vàng hè
1- Mẫu cúc vàng hè sau 2 tuần được cấy theo phương thức thẳng đứng (đã có sự phát sinh chồi từ mô sẹo, chưa thấy sự phát sinh chồi từ mắt ngủ)
2- Mẫu cúc vàng hè sau 1 tuần nuôi cấy theo phương thức nằm ngang (không hình thành mô sẹo, đã thấy có sự phát sinh chồi từ mắt ngủ).
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1. Kết luận
Từ những kết quả thu được từ đề tài này, chúng tôi đưa ra một số kết luận như sau:
Tạo vật liệu khởi đầu, hiệu quả của chất khử trùng lên mỗi giống là khác nhau. Cụ thể, hiệu quả khử trùng đạt cao nhất ở giống đỏ cờ khi sử dụng Javen 5% (v/v)/10 phút (đạt 92,9%); đối với các giống chi đỏ, thạch bích, ở Javen 10% (v/v)/10 phút (lần lượt đạt 41,67%, 33,33% và 54,55%) còn giống cúc kim cương ở javen10% (v/v)/15 phút (đạt 36,67%).
Môi trường MS + 30 g/l saccarozơ + 7 g agar + 0,7 mg/l BAP thích hợp nhất để tái sinh chồi đối với giống cúc vàng hè (đạt 7,25 chồi/mẫu, đạt 10,22 số lá/chồi) và giống đỏ cờ (cho chiều cao chồi cao nhất – 4,78 cm)
Kích thước mẫu cấy cũng ảnh hưởng đến quá trình nhân nhanh chồi cúc, cụ thể là ảnh hưởng đến chỉ tiêu số chồi/mẫu ở cây hoa cúc. Qua nghiên cứu nhận thấy, trong 3 nhóm kích thước nghiên cứu thì kích thước mẫu cấy 3 cm cho số chồi/mẫu là lớn nhất ở cả 5 giống cúc, trong đó, cao nhất vẫn là giống vàng hè (đạt 16,25 chồi/mẫu).
Thông qua việc theo dõi chỉ tiêu chiều cao chồi và đánh giá mức độ đồng đều của chồi ở các giống nghiên cứu, nhận thấy, trong 2 nhóm phương thức nghiên cứu, phương thức cấy nằm ngang là tối ưu cho các giống đỏ cờ, chi đỏ, vàng hè (mức độ đồng đều cao hơn so với phương thức cấy thẳng đứng). Trong khi đó, các giống cúc như thạch bích, kim cương không bị ảnh hưởng bởi phương thức cấy mẫu.
2. Kiến nghị
Từ kết quả nghiên cứu tạo vật liệu in vitro để hoàn thiện quy trình nhân giống cúc của các giống khác nhau.
Ứng dụng mô hình nhân giống in vitro hoa cúc vào thực tế sản xuất để cung cấp số lượng cây giống lớn, giá thành rẻ.