VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.3 Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin PRRS nhập từ Trung Quốc
4.3.1 Quan sát các triệu chứng lâm sàng của lợn thí nghiệm
Triệu chứng lõm sàng là những hiện tượng của quỏ trỡnh biến ủổi cỏc cơ quan nội tạng của con vật trong quỏ trỡnh ủấu tranh với bệnh biểu hiện ra
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………49
bờn ngoài. Nú là những dấu hiệu quan trọng ủể nhận ủịnh quỏ trỡnh tiến triển của một bệnh (Hồ Văn Nam và cs, 1996) [10]. Do ủú chỳng tụi luụn coi ủõy như là dữ liệu hỗ trợ cho công tác nghiên cứu trong phòng thí nghiệm. Kết quả theo dừi triệu chứng lõm sàng ủược trỡnh bày ở bảng 4.5.
Bảng 4.5. Các triệu chứng lâm sàng ở lợn thí nghiệm sau khi cụng cường ủộc.
ðối chứng (không tiêm
vacxin) (n = 4 con)
Tiêm vacxin (n = 8 con )
Một mũi Hai mũi Nhóm lợn
Triệu chứng Số con (biểu hiện)
Tỷ lệ
(%) Số con biểu hiện
Số con biểu hiện
Tổng hợp
Tỷ lệ (%)
Sốt 4 100,0 5 3 8 100,0
Mệt mỏi 4 100,0 2 1 3 37,5
Giảm ăn 4 100,0 3 2 5 62,5
Bỏ ăn 4 100,0 1 0 1 12,5
Táo bón 3 75,0 5 3 8 100,0
Ban ủỏ da 2 50,0 0 1 1 12,5
Có dử mắt 2 50,0 1 0 1 12,5
Chảy nước mũi 2 50,0 1 1 2 25,0
Lạc giọng 3 75,0 0 0 0 0,0
Ho 4 100,0 1 1 2 25,0
Thở khó 4 100,0 1 1 2 25,0
Tai xanh 1 25,0 0 0 0 0,0
Tiêu chảy 4 100,0 0 0 0 0,0
Từ số liệu trong bảng 4.5 cho thấy, 100% số lợn ở nhúm ủối chứng cú các biểu hiện sốt, mệt mỏi, giảm ăn, bỏ ăn, ho, thở khó, tiêu chảy. Trong khi lợn ở nhóm tiêm vacxin, tỷ lệ lợn có các biểu hiện trên tương ứng lần lượt là 100%, 37,5%, 62,5%, 12,5%, 25%, 25%, 0%. Tỷ lệ lợn có các biểu hiện khác như tai xanh, tiờu chảy, lạc giọng, cú dử mắt… ở nhúm ủối chứng ủều cao hơn hẳn so với nhúm ủược tiờm vacxin.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………50
Thời gian xuất hiện cỏc triệu chứng này cũng khỏc nhau. Ở nhúm ủối chứng, cỏc biểu hiện thường xuất hiện tuần tư sốt, mệt mỏi, giảm ăn, tỏo bún, da ban ủỏ, cú dử mắt, chảy nước mũi, ho, khú thở, tai xanh, tiờu chảy. Nhúm ủối chứng, sốt mệt mỏi, tỏo bún thường xuất hiện vào ngày thứ 3- 5 sau cụng cường ủộc; ho, khú thở thường xuất hiện từ ngày thứ 7 sau cụng cường ủộc, tiờu chảy xuất hiện ủồng thời hoặc sau khoảng vài ngày. Hiện tượng tai xanh xuất hiện vào khoảng ngày thứ 7 thứ 8. Lợn ở nhúm tiờm vacxin cỏc biểu hiện trờn ở mức ủộ nhẹ.
Một số hình ảnh minh hoạ triệu chứng của lợn thí nghiệm
Hình 4.1: Lợn có biểu hiện của PRRS Hình 4.2: Lợn ỉa chảy, mệt mỏi, lông xơ xác
Kết quả của chỳng tụi tương ủương với kết quả của Phạm Ngọc Thạch và cs (2007) [12], Lê Văn Năm (2007) [11]. Phạm Ngọc Thạch chỉ ra rằng lợn sau cai sữa mắc PRRS thỡ tỷ lệ lợn bị sốt từ 83,33 ủến 100%, tiờu chảy, tỏo bún từ 91,97 ủến 96,72%, bỏ ăn 90,8%, tai xanh 53,03%, ban ủỏ da 83,33%...
Kết quả của Lê Văn Năm cũng cho biết, lợn choai mắc PRRS thì tỷ lệ lợn bị sốt là ủiển hỡnh chiếm 93,50%, giảm ăn, bỏ ăn chiếm 90%, tai xanh 63,5%, ban ủỏ da 96,50%... Kết quả của chỳng tụi về tỷ lệ lợn mắc PRRS biểu hiện tỏo bún, tiờu chảy cao hơn so với kết quả của Lờ Văn Năm (43,35% ủến 50,5%). Tỷ lệ lợn mắc PRRS biểu hiện ban ủỏ, tai xanh trong thớ nghiệm của chúng tôi thấp hơn các tác giả là do:
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………51
+ Số lượng lợn theo dõi ít.
+ Lứa tuổi lợn ủồng ủều, cựng xuất phỏt từ một ủàn.
+ ðiều kiện thớ nghiệm ủược khống chế.
4.3.2 Kết quả kiểm tra nhiệt ủộ cơ thể của lợn thớ nghiệm sau cụng cường ủộc Nhiệt ủộ cơ thể là một chỉ tiờu sinh lý quan trọng, nhiệt ủộ cao hay thấp ủược coi là triệu chứng của lợn bệnh. Nhiệt ủộ bỡnh thường của cơ thể lợn dao ủộng từ 38 ủến 400C, nếu trờn 400C là cú dấu hiệu sốt. Cú thể căn cứ vào nhiệt độ cơ thể để chẩn đốn bệnh cấp tính hay mãn tính, bệnh nặng hay nhẹ.
Vớ như lợn ủang sốt mà giảm từ từ là tiờn lượng tốt, cũn nếu ủang sốt cao mà giảm xuống ủột ngột là tiờn lượng xấu (Hồ Văn Nam và cs, 1996) [10].
Tiến hành ủo thõn nhiệt của lợn hàng ngày vào cựng một thời ủiểm khoảng 7- 9 giờ sỏng trước khi cho ăn. Kết quả kiểm tra nhiệt ủộ cơ thể của lợn thớ nghiệm ủược trỡnh bày ở bảng 4.6.
Từ số liệu trong bảng 4.6 cho thấy nhóm lợn tiêm vacxin cũng như nhóm lợn ủối chứng (khụng tiờm vacxin), trước khi cụng cường ủộc, nhiệt ủộ ủều bỡnh thường, trạng thái cơ thể khoẻ mạnh, nhanh nhẹn, ăn uống bình thường. Sau khi cụng cường ủộc bằng cỏch nhỏ vào mũi mỗi con 1ml huyễn dịch chứa PRRSV có 106TCID50, thì lợn có một số biểu hiện như mệt mỏi, sốt, táo bón …
Nhúm lợn ủược tiờm một mũi vacxin: Lợn số 1, 2, 3 sau khi cụng cường ủộc bắt ủầu sốt vào ngày thứ 2, lợn số 4, 5 bắt ủầu sốt vào ngày thứ 3. Diễn biến nhiệt ủộ cơ thể của lợn số 1, 2, 4, 5 dao ủộng trong khoảng 40,1 ủến 41,10C, sốt kộo dài từ 6 ủến 10 ngày. Sau ủú nhiệt ủộ cơ thể lợn giảm, nhưng giảm từ từ, dao ủộng nhiệt trong khoảng nhiệt ủộ sinh lý của cơ thể. Riờng lợn số 3 nhiệt ủộ cơ thể tăng, giảm rất bất thường, ngày thứ 12 nhiệt ủộ giảm rất nhanh và tiếp tục giảm ủến ngày thứ 16 sau cụng cường ủộc. Sau 4 ngày giảm nhiệt ủộ cơ thể lợn số 3 chết.
Nhúm lợn ủược tiờm hai mũi vacxin: Thời gian bắt ủầu sốt chậm hơn nhúm lợn ủược tiờm một mũi vacxin và nhúm lợn ủối chứng. Lợn bắt ủầu sốt vào ngày thứ 5 -7 sau cụng cường ủộc. Diễn biến nhiệt ủộ của nhúm lợn này giống như nhúm lợn ủược tiờm một mũi vacxin.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………52
Bảng 4.6. Kết quả kiểm tra nhiệt ủộ của lợn thớ nghiệm Nhóm lợn tiêm vacxin
Một mũi Hai mũi
Nhúm lợn ủối chứng (không tiêm vacxin) Thời gian Ngày sau
công
1 2 3 4 5 10 11 12 6 7 8 9
29/12/08 0 39,2 38,6 38,5 38,5 38,2 38,0 38,2 38,4 38,1 38,2 38,3 38,5 30/12/08 1 38,9 39,3 39,0 39,1 39,3 38,8 39,3 39,1 38,9 38,6 39,3 39,0 31/12/08 2 41,1 41,0 40,5 39,8 39,8 39,7 39,5 39,8 40,1 39,8 39,0 39,6 01/01/09 3 40,7 41,2 40,8 40,2 40,1 40,0 39,8 39,6 41,0 40,7 41,0 39,4 02/01/09 4 40,5 40,4 40,0 39,2 40,2 38,5 38,3 39,6 40,6 39,0 37,9 41,1 03/01/09 5 40,8 39,5 40,5 39,8 40,5 39,9 40,8 39,8 40,0 39,7 38,0 39,0 04/01//09 6 40,5 39,2 40,5 39,3 41,0 39,5 41,2 41,0 40,9 40,0 38,6 38,9 05/01/09 7 40,6 40.1 41,0 40,9 40,8 40,2 41,1 40,9 40,1 39,2 40,5 40,9 06/01/09 8 40,7 40,4 40,5 40,5 40,3 40,9 40,6 40,1 40,6 39,5 38,5 38,0 07/01/09 9 40,8 40,4 40,6 40,5 40,0 40,6 40,8 40,5 41,0 40,7 41,6 38,9 08/01/09 10 40,4 40,5 41,1 40,7 40,2 40,2 41,0 40,8 40,4 40,3 38,7 38,4 09/01/09 11 39,5 40,1 40,8 40,5 40,5 40,8 40,4 40,9 40,4 38,7 39,0 37,6 10/01/09 12 38,4 40,2 38,8 39,5 39,8 40,4 39,8 40,6 37,5 40,5 37,6 36,3
11/01/09 13 38,9 40,2 38,0 39,9 39,5 40,0 40,0 40,9 40,4 40,6 35,9
12/01/09 14 39,9 40,2 37,6 38,7 39,0 38,6 38,5 40,5 38,0 38,8 13/01/09 15 39,5 40,3 36,0 38,8 39,6 37,9 39,6 38,1 37,4 36,8
14/01/09 16 39,9 39,2 38,5 39,4 38,4 39,3 39,5 36,5
15/01/09 17 39,5 39,1 38,8 39,2 39,1 39,2 39,0 35,8
16/01/09 18 39,2 38,7 38,6 38,9 38,9 39,9 39,6
17/01/09 19 39,0 38,8 38,4 38,6 39,1 39,2 38,3
18/01/09 20 38,6 39,5 38,6 39 39,2 39,6 38,9
19/01/09 21 39,0 39,4 39,3 39,6 39,4 39,2 38,9
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………53
Sau 21 ngày cụng cường ủộc, nhúm ủược tiờm vacxin cú 1 trong số 8 lợn bị chết. Sau từ 6- 10 ngày sốt, thỡ nhiệt ủộ cơ thể dần ổn ủịnh và trở về trạng thái sinh lý bình thường.
Nhúm lợn ủối chứng: Diễn biến nhiệt ủộ cú sự khỏc biệt so với nhúm lợn ủược tiờm vacxin. Lợn số 6 diễn biến nhiệt ủộ cơ thể giống như nhúm lợn ủược tiờm vacxin, nhưng khi chuyển trạng thỏi từ sốt sang khụng sốt rất ủột ngột, nhiệt ủộ cơ thể giảm rất nhanh. Lợn số 7, 8, 9 bắt ủầu sốt ở ngày thứ 3, thứ 4 sau cụng cường ủộc, sau ủú ủột ngột giảm nhiệt ủộ, duy trỡ nhiệt ủộ trong khoảng nhiệt ủộ sinh lý từ 2 ủến 5 ngày. Sự biến ủổi nhiệt ủộ cơ thể ủú khụng chỉ diễn ra một lần mà từ 2 ủến 3 lần. ðõy là tiờn lượng xấu của bệnh.
Khơng nằm ngồi dự đốn, tồn bộ nhĩm lợn đối chứng đã chết rải rác từ ngày thứ 13 ủến ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc.
Diễn biến nhiệt ủộ cơ thể của toàn bộ lợn thớ nghiệm ủược minh hoạ ở hình 4.3, 4.4 và 4.5.
Lợn 6, 7, 8 ,9
32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21
Ngày sau công cường độc
Nhiệt độ Lợn 6
Lợn 7 Lợn 8 Lợn 9
Hỡnh 4.3. Diễn biến nhiệt ủộ cơ thể của lợn số 6, 7, 8, 9
[[[
Nhìn vào hình 4.3 cho thấy: Lợn ở nhóm không tiêm vacxin diễn biến nhiệt ủộ cơ thể giống nhau, biến ủổi theo quy luật hỡnh sin. ðiều khỏc biệt lớn nhất là thời ủiểm thõn nhiệt hạ ủột ngột, lợn số 9 hạ nhiệt ủộ sớm nhất sau ủến lợn số 8, lợn số 6 và 7. Lợn chết khi nhiệt ủộ cơ thể giảm xuống duới 380C.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………54 Lợn 1, 2, 3, 4, 5
33 34 35 36 37 38 39 40 41 42
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21
Ngày sau công cường độc
Nhiệt độ
Lợn 1
Lợn 2 Lợn 3 Lợn 4 Lợn 5
Hỡnh 4.4. Diễn biến nhiệt ủộ cơ thể của lợn 1, 2, 3, 4, 5
Nhỡn vào hỡnh 4.4 cho thấy: Lợn số 1, 2, 4, 5 ủược tiờm một mũi vacxin diễn biến nhiệt ủộ cơ thể tương ủối giống nhau. Riờng lợn số 3 diễn biến nhiệt ủộ cơ thể khỏc so với 4 lợn trờn, nhiệt ủộ ở mức cao, suốt từ ngày thứ 2 ủến ngày thứ 12 sau cụng cường ủộc, sau ủú giảm ủột ngột xuống dưới 380C và chết.
Lợn 10, 11, 12
36 37 38 39 40 41 42
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21
Ngày sau công cường độc
Nhiệt độ Lợn 10
Lợn 11 Lợn 12
Hỡnh 4.5. Diễn biến nhiệt ủộ cơ thể lợn số 10, 11, 12
Nhỡn vào hỡnh 4.5 cho thấy: Ở cả 3 lợn ủược tiờm hai mũi vacxin, diễn biến nhiệt ủộ cơ thể rất giống nhau, tương ủồng với diễn biến của nhúm lợn
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………55
ủược tiờm một mũi vacxin.
Túm lại ở nhúm lợn ủược tiờm vacxin, diễn biến nhiệt ủộ nhỡn chung giống nhau, sau những ngày sốt dài, thỡ nhiệt ủộ dần ổn ủịnh. Bắt ủầu từ ngày thứ 16 sau cụng cường ủộc, thỡ nhiệt ủộ cơ thể dao ủộng gần như một ủường thẳng quanh giỏ trị nhiệt ủộ sinh lý của cơ thể. Ở nhúm lợn khụng tiờm vacxin, ngày thứ 8, 10, 14 nhiệt ủộ cơ thể cú xu hướng giảm ủều và giảm rất mạnh. ðến ngày thứ 18 sau cụng cường ủộc, nhúm lợn khụng tiờm vacxin ủó chết hết.
4.3.3 Kết quả kiểm tra biến ủộng số lượng bạch cầu trong mỏu của lợn thớ nghiệm
Sau 21 ngày thớ nghiệm chỳng tụi ủó thu ủược kết quả về số lượng bạch cầu ở lợn thớ nghiệm. Kết quả ủược trỡnh bày ở bảng 4.7
Bảng 4.7. Kết quả kiểm tra biến ủộng về số lượng bạch cầu trong mỏu của lợn sau cụng cường ủộc (nghỡn/mm3 mỏu)
Ngày sau cụng cường ủộc Nhóm lợn Lợn
TN số 0 4 7 10 14 21
1 10,6 8,3 9,5 13,1 10,1 13,2
2 9,3 4,6 8,3 6,8 8,1 10,6
3 8 3,7 1,8 11 14,9 Chết
4 13,2 2,4 8,2 10,3 9,2 13,6
Tiêm một mũi vacxin
5 10 3,9 7,6 10,6 11,1 12,2
Trung bình 10,22 4,58 7,08 10,36 10,68 12,40
10 12,5 8,8 7,8 6,1 13,2 12,6
11 10,9 4,4 7,6 12,2 9,3 11,3
Tiêm hai mũi
vacxin 12 14,7 6,9 10,8 12,6 8,4 13,4
Trung bình 12,70 6,70 8,73 10,30 10,30 12,43
6 13,9 5,5 10,9 12,9 15,5
7 11,7 5,3 10,7 12,3 14,6 Chết
8 14,1 6 7,7 14
Không tiêm vacxin
9 16 8,9 5,9 13,1 Chết
Trung bình 13,93 6,43 8,80 13,08 15,05 Chết
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………56
Nếu như quy ước số lượng bạch cầu ủếm ủược ở ngày 0 (ngày trước khi cụng cường ủộc) là 100%, thỡ tỷ lệ phần trăm bạch cầu trong mỏu của lợn ở những ngày sau cụng cường ủộc như sau:
Bảng 4.8. Tỷ lệ phần trăm bạch cầu trong máu của lợn sau cụng cường ủộc (%)
Ngày sau cụng cường ủộc Nhóm
lợn
Lợn TN
số 0 4 7 10 14 21
1 100 78,30 89,62 123,58 95,28 124,53 2 100 49,46 89,25 73,12 87,10 113,98 3 100 46,25 22,50 137,50 186,25 Chết 4 100 18,18 62,12 78,03 69,70 103,03 Tiêm
một mũi vacxin
5 100 39,00 76,00 106,00 111,00 122,00 Trung bình 100 44,81 69,28 101,37 104,50 121,33 10 100 70,40 62,40 48,80 105,60 100,80 11 100 40,37 69,72 111,93 85,32 103,67 Tiêm
hai mũi vacxin
12 100 46,94 73,47 85,71 57,14 91,16 Trung bình 100 52,76 68,77 81,10 81,10 97,90
6 100 39,57 78,42 92,81 111,51
7 100 45,30 91,45 105,13 124,79 Chết
8 100 42,55 54,61 99,29
Không tiêm vacxin
9 100 55,63 36,88 81,88 Chết
Trung bình 100 46,14 63,20 93,90 108,08 Chết Bạch cầu là những tế bào có vai trò cực kì quan trọng trong cơ chế bảo vệ cơ thể thông qua chức năng thực bào và các phản ứng miễn dịch. Bạch cầu ở lợn khoẻ trong ủiều kiện sinh lý dao ủộng ở khoảng 6,7- 22,9 nghỡn/mm3 mỏu.
Theo (Hồ Văn Nam và cs, 1996) [10], số lượng bạch cầu của lợn ở trạng thái sinh lý như sau:
+ Tối ủa: 22,9 nghỡn/mm3 mỏu.
+ Trung bình (Tốt): 14,8 nghìn/mm3 máu.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………57
+ Tối thiểu: 6,7 nghìn/mm3 máu.
Từ số liệu trong bảng 4.7 và bảng 4.8 cho thấy:
Lợn ở nhúm tiờm một mũi vacxin: Số lượng bạch cầu ủều tuõn theo một quy luật chung là: giảm rất nhanh vào ngày thứ 4 sau cụng cường ủộc, ủặc biệt là lợn số 4 số lượng bạch cầu giảm xuống chỉ cũn 2,4 nghỡn/mm3 mỏu (chỉ bằng 18,18% so với trước khi cụng cường ủục), nhưng sau ủú số lượng bạch cầu của lợn tăng dần lờn rồi ổn ủịnh xung quanh ngưỡng sinh lý.
Ngày thứ 10 sau cụng cường ủộc, số lượng bạch cầu ủạt 101,37% so với trước khi cụng cường ủộc. Sau ủú bạch cầu cú xu hướng tăng mạnh, nhưng vẫn nằm trong ngưỡng sinh lý. Riờng lợn số 3, trước khi cụng cường ủộc, số lượng bạch cầu tương ủối thấp, sự sụt giảm về số lượng bạch cầu sau cụng cường ủộc là tương ủối lớn, ở ngày thứ 7 sau cụng cường ủộc, số lượng bạch cầu chỉ cũn 1,8 nghỡn/mm3 mỏu, chỉ bằng 22,5% so với trước khi cụng cường ủộc.
` Lợn ở nhúm ủối chứng (khụng tiờm vacxin): Ngày thứ 4 sau cụng cường ủộc, số lượng bạch cầu cú xu hướng giảm, nhưng ngay sau ủú tăng dần lờn và ổn ủịnh về số lượng từ ngày 10. Tuy nhiờn số lượng bạch cầu ở thời gian cuối thấp hơn so với thời gian trước khi cụng cường ủộc (chỉ bằng 90,033% ủến 91,56% so với trước khi cụng cường ủộc).
Lợn ở nhóm tiêm hai mũi vacxin: Số lượng bạch cầu cũng tuân theo quy luật của nhóm tiêm một mũi vacxin. Số lượng bạch cầu giảm vào ngày thứ 4, rồi tăng dần và ổn ủịnh số lượng từ ngày thứ 10 sau cụng cường ủộc, nhưng số lượng bạch cầu ít hơn (chỉ bằng 81,10% so với trước khi công công cường ủộc). Ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc, số lượng bạch cầu lớn hơn, nhưng khụng nhiều (chỉ chiếm 105,51%) so với trước khi cụng cường ủộc.
Kết quả của chúng tôi phù hợp với nhận xét của (Tô Long Thành, Nguyễn Văn Long và cs, 2008) [14]: Có hiện tượng giảm bạch cầu khi lợn nhiễm PRRSV.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………58
4.3.4 Kết quả phát hiện PRRSV trong huyết thanh và phủ tạng của lợn sau cụng cường ủộc
Toàn bộ lợn thớ nghiệm ủược lấy mỏu ủỳng lịch, mỏu sau lấy ủược bảo quản, chắt huyết thanh và khi lợn thớ nghiệm chết hoặc ủó kết thỳc thớ nghiệm sẽ ủược mổ khỏm lấy phủ tạng ủể xỏc ủịnh sự cú mặt của PRRSV. Kết quả phỏt hiện PRRSV ủược trỡnh bày ở bảng 4.9.
Bảng 4.9. Kết quả phát hiện PRRSV trong huyết thanh và phủ tạng của lợn thớ nghiệm sau cụng cường ủộc (Ct)
Mẫu huyết thanh Ngày sau cụng cường ủộc Nhóm lợn Lợn
TN
số 0 4 7 14 21
Mẫu phủ tạng
1 - - 20,56 34,69 - 30,1
2 - 30,78 21,01 27,71 - 25,87
3 - 22,58 18,29 24,96 Chết 17,33
4 - 25,31 19,71 30,67 - 26,81
Tiêm một mũi vacxin
5 - 24,92 23,46 32,16 - 29,49
10 - 28,34 22,79 31,22 - 25,18
11 - 25,28 22,49 27,01 35,33 22,19 Tiêm hai mũi
vacxin
12 - 25,02 22,34 29,37 - 29,11
6 - 28,58 19,3 28,82 Chết 19,07
7 - 24,76 18,69 25,69 Chết 18,41
8 - 25,15 19,83 21,22
Không tiêm vacxin
9 - 22,89 18,72 Chết
19,58
4.3.4.1 Xỏc ủịnh sự cú mặt của PRRSV trong huyết thanh của lợn thớ nghiệm.
Kết quả tổng hợp trong bảng 4.9 cho thấy: Toàn bộ 12 lợn thí nghiệm trước khi cụng cường ủộc (ngày 0), xột nghiệm mẫu huyết thanh ủều khụng
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………59
thấy sự cú mặt của PRRSV. Nghĩa là trước khi cụng cường ủộc lợn thớ nghiệm không mắc PRRS.
Sau khi cụng cường ủộc bằng chủng PRRSV- 07196 với liều 1ml/con, mỗi ml huyễn dịch virus có chứa 106TCID50:
+ Ngày thứ 4 sau cụng cường ủộc 11/12 mẫu huyết thanh ủó phỏt hiện cú PRRSV, duy nhất mẫu huyết thanh của lợn số 1 chưa phỏt hiện ủược PRRSV.
+ Ngày thứ 7 sau cụng cường ủộc, tất cả 12 lợn ủều phỏt hiện thấy cú PRRSV trong mỏu, nhưng ở cỏc mức ủộ khỏc nhau và lợn ở nhúm ủược tiờm vacxin lượng virus trong huyết thanh ớt hơn lợn ở nhúm khụng ủược tiờm vacxin.
Lợn ở nhúm tiờm vacxin: Ngày thứ 14 sau cụng cường ủộc, trong huyết thanh lợn lượng virus ủó giảm so với ngày thứ 7 sau khi cụng cường ủộc và khụng cú lợn nào chết. Ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc cú 1 lợn trong số 8 lợn chết và 7 lợn cũn sống trong ủú cú 6 mẫu huyết thanh õm tớnh và 1 mẫu huyết thanh nghi ngờ. ðiều này cú nghĩa là ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc, thì 6 trong số 7 lợn không còn PRRSV huyết và 1 trong số 7 lợn còn sống vẫn tìm thấy PRRSV, nhưng ở mức thấp.
Lợn ở nhúm khụng ủược tiờm vacxin: Ngày thứ 14 sau cụng cường ủộc cú 2 trong 4 lợn bị chết, 2 lợn cũn sống, nhưng lượng virus trong mỏu bắt ủầu giảm so với ngày thứ 7 sau cụng cường ủộc. Ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc, toàn bộ lợn ở nhúm này ủó chết.
4.3.4.2 Xỏc ủịnh sự cú mặt của PRRSV trong phủ tạng lợn thớ nghiệm.
Sau khi lợn chết hoặc ủến ngày thứ 21 tất cả lợn thớ nghiệm ủều ủược mổ khỏm kiểm tra bệnh tớch và lấy mẫu phổi và hạch lõm ba ủể xỏc ủịnh sự có mặt của PRRSV bằng phương pháp Realtime RT- PCR. Kết quả cũng
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………60
ủược tổng hợp ở bảng 4.9. Qua bảng 4.9 cho thấy:
Lợn ở nhúm ủược tiờm vacxin: Lượng virus là ớt hơn so với lợn ở nhúm khụng ủược tiờm vacxin. Cú 3 lợn (lợn số 1, 5 và 12) trong số 8 con ủược tiờm vacxin cú mức Ct từ 29- 30. Ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc cú 7/8 con còn sống và trong huyết thanh của 6 trong số 7 lợn còn sống không phát hiện ủược PRRSV trong mỏu, nhưng giết lợn ủể lấy hạch lõm ba và phổi phõn lập virus thỡ vẫn xỏc ủịnh cú virus. ðiều ủú cú nghĩa ngày thứ 21 sau cụng cường ủộc, virus khụng cũn trong mỏu hoặc cũn rất ớt mà chủ yếu tập trung ở phủ tạng. Tuy nhiên, thời gian thí nghiệm mới chỉ kéo dài 21 ngày, nên không thể xỏc ủịnh ủược bao nhiờu lõu thỡ cơ thể lợn mới trung hoà hết PRRSV.
Lợn ở nhúm khụng ủược tiờm vacxin: Lượng PRRSV trong phủ tạng ở mức cao, cao nhất ở lợn số 7 và thấp nhất ở lợn số 8.
4.3.5 Kết quả kiểm tra kháng thể trong huyết thanh của lợn thí nghiệm.
4.3.5.1 Kết quả kiểm tra kháng thể bằng phương pháp ELISA (ELI)
Tiến hành kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh của lợn thí nghiệm vào ngày 0 (trước khi cụng cường ủộc), ngày 4, 7, 14, 21 sau cụng cường ủộc. Ngày thứ 7 sau cụng cường ủộc, trong huyết thanh của toàn bộ lợn thớ nghiệm ủó xuất hiện khỏng thể và ngày thứ 14 sau cụng cường ủộc bắt ủầu cú lợn chết ở nhúm lợn ủối chứng (khụng tiờm vacxin). Vỡ thế chỳng tụi lấy mốc ngày thứ 7 ủể so sỏnh, kết quả cụ thể của phương phỏp ELISA xem tại phụ lục. Kết quả tổng hợp ủược trỡnh bày ở bảng 4.10.
Từ số liệu trong bảng 4.10 cho thấy:
Lợn ở nhúm ủược tiờm vacxin và nhúm ủối chứng trước khi cụng cường ủộc (ngày 0) và ngày thứ 4 sau cụng cường ủộc, bằng phương phỏp ELISA chưa phỏt hiện ủược khỏng thể PRRS trong huyết thanh. Ngày thứ 7 sau cụng cường ủộc, kiểm tra huyết thanh thấy hiệu giỏ khỏng thể ở mức khỏ cao, ủặc biệt tập trung vào nhúm lợn ủược tiờm vacxin. Lợn ở nhúm ủược