C HƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP
2.4.BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIấN CỨU
2.4.1. Bụ́ trớ điều tra và phƣơng phỏp nghiờn cứu đặc điểm dịch tễ bệnh giun đũa bờ, nghộ ở hai huyện của tỉnh Nghệ An.
2.4.1.1. Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ nghộ dưới 3 thỏng tuổi.
* Bụ́ trớ điều tra:
Mẫu đƣợc thu thập theo phƣơng phỏp lấy mẫu chựm nhiều bậc. Chỳng tụi đã thu thập và xột nghiệm phõn của 1776 bờ, nghộ dƣới 3 thỏng tuổi tại 2 huyện của tỉnh Nghệ An.
+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa bờ, nghộ tại 2 huyện của tỉnh Nghệ An.
Việc thu thập, xột nghiệm mẫu phõn bờ, nghộ ở 2 huyện đã đƣợc bố trớ cụ thể nhƣ sau: Địa phƣơng (huyện, xó) Sụ́ bờ, nghộ xột nghiệm phõn (con) Nghĩa Đàn Nghĩa Sơn 315 Nghĩa Lõm 286 Nghĩa Bỡnh 263 Quỳ Hợp Chõu Quang 326 Tam Hợp 279 Nghĩa Xuõn 307 Tớnh chung 1776
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn + Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo địa hỡnh.
Địa hỡnh đƣợc đỏnh giỏ theo 2 loại - Địa hỡnh bằng phẳng, cao rỏo.
- Địa hỡnh xen kẽ đồi nỳi và ruộng nƣớc. Sơ đồ bố trớ lấy mẫu nhƣ sau:
Địa hình Địa phƣơng
Nghĩa Đàn (con) Quỳ Hợp (con)
Địa hỡnh bằng phẳng, cao rỏo 431 434 Địa hỡnh xen kẽ đồi nỳi và ruộng nƣớc 433 478
Tớnh chung 864 912
+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo mựa vụ.
Mựa vụ trong năm đƣợc theo dừi gồm:
- Vụ Đụng - Xuõn : từ thỏng 10 - thỏng 3 năm sau. - Vụ Hố - Thu: từ thỏng 4 - thỏng 9.
Chỳng tụi đã theo dừi ở hai mựa vụ, bờ nghộ tƣơng đối đồng đều về tuổi, tớnh biệt, điều kiện chăm súc nuụi dƣỡng.
Mựa vụ Địa phƣơng
Nghĩa Đàn (con) Quỳ Hợp (con)
Đụng - Xuõn 429 418
Hố - Thu 435 494
Tớnh chung 864 912
+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo tỡnh trạng vệ sinh chuồng nuụi.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Tình trạng vệ sinh Địa phƣơng
Nghĩa Đàn (con) Quỳ Hợp (con)
Tốt 279 302
Trung bỡnh 299 302
Kộm 286 308
Tớnh chung 864 912
+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo tuổi. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chỳng tụi đã theo dừi bờ, nghộ ở 5 lứa tuổi và lặp lại 2 lần tại 2 huyện Nghĩa Đàn và Quỳ Hợp. Bờ, nghộ cỏc lứa tuổi tƣơng đối đồng đều về tớnh biệt, điều kiện chăm súc nuụi dƣỡng, trong cựng một mựa vụ, đƣợc bố trớ theo sơ đồ sau:
Tuổi bờ, nghộ (ngày tuổi)
Địa phƣơng
Nghĩa Đàn (con) Quỳ Hợp (con)
< 15 164 175 > 15 - 30 172 184 > 30 - 45 157 161 > 45 - 60 195 210 > 60 - 90 176 182 Tớnh chung 864 912
+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo tớnh biệt.
Tớnh biệt Địa phƣơng
Nghĩa Đàn (con) Quỳ Hợp (con)
Đực 434 447
Cỏi 430 465
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn + Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa theo loại gia sỳc.
Loại gia sỳc Địa phƣơng
Nghĩa Đàn (con) Quỳ Hợp (con)
Bờ 439 462
Nghộ 425 450
Tớnh chung 864 912
* Phƣơng phỏp xột nghiệm mẫu.
Xột nghiệm mẫu bằng phƣơng phỏp Fulleborn.
Sử dụng dung dịch NaCl bóo hoà để làm nổi trứng giun đũa bờ , nghộ. Soi trƣ́ng giun đũa trờn kính hiờ̉n vi có đụ̣ phóng đại 100 lõ̀n.
* Phương pháp đờ́m trứng giun đũa bằng buụ̀ng đờ́m Mc. Master:
Cƣờng độ nhiễm giun đũa Neoascaris vitulorum đƣợc đỏnh giỏ bằng số lƣợng trứng/gam phõn:
< 500 trứng/gam phõn : nhiễm nhẹ (+)
500 - 800 trứng/gam phõn : nhiễm trung bỡnh (++) 800 - 1200 trứng/gam phõn : nhiễm nặng (+++) > 1200 trứng/gam phõn : nhiễm rṍt nặng (++++)
Số trứng/gam phõn đƣợc đếm bằng phƣơng phỏp Mc Master: Cõn 4 gam phõn cho vào cốc thuỷ tinh, thờm 56 ml dung dịch nƣớc muối bóo hoà, khuấy đều cho tan phõn. Lọc qua lƣới thộp vào một cốc khỏc và khuấy đều. Trong khi đang khuấy dƣ̀ng lại đụ̣t ngụ̣t và lấy cụng tơ gỳt hỳt dung dịch phõn nhỏ đầy cả hai buồng đếm Mc Master (mỗi buồng đếm cú dung tớch 0,5 ml), để yờn 5 phỳt rồi kiểm tra dƣới kớnh hiển vi quang học (độ phúng đại 100 lõ̀n). Đếm toàn bộ số trứng trong những ụ của 2 buồng đếm.
Số trứng/1 gam phõn = ∑ số trứng ở hai buồng đếm x 60 4
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.4.1.2. Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu sự phỏt triển của trứng giun đũa bờ, nghộ và khả năng sống của trứng cú sức gõy bệnh ở ngoại cảnh. + Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu tỡnh trạng ụ nhiễm trứng giun đũa bờ, nghộ ở chuồng nuụi, khu vực xung quanh chuồng nuụi.
* Phương phỏp thu thập mẫu:
- Mẫu đất hoặc cặn nền chuồng nuụi bờ, nghộ: tại mỗi ụ chuồng, lấy mẫu đất (cặn) ở 4 gúc chuồng và ở giữa chuồng, trộn đều đƣợc một mẫu xột nghiệm (khoảng 80 - 100 gam/mẫu). Mỗi mẫu đƣợc để riờng trong tỳi nilon cú nhón ghi: loại mẫu, địa điểm và thời gian lấy mẫu.
- Mẫu đất bề mặt khu vực xung quanh chuồng: lấy mẫu đất bề mặt tƣơng tự nhƣ cỏch lấy mẫu cặn nền chuồng.
* Sụ́ mẫu đã thu thập: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Địa phƣơng Huyợ̀n - Xã
Sụ́ mẫu thu thập
Nờ̀n chuụ̀ng Xung quanh chuồng nuụi
Nghĩa Đàn Nghĩa Sơn 33 33 Nghĩa Lõm 34 32 Nghĩa Bỡnh 29 30 Quỳ Hợp Chõu Quang 31 31 Tam Hợp 28 30 Nghĩa Xuõn 34 34
* Phương phỏp xột nghiệm mẫu:
Xột nghiệm bằng phƣơng phỏp Fulleborn để phỏt hiện trứng giun đũa bờ nghộ.
+ Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu sự tồn tại trứng giun đũa bờ, nghộ ở khu vực bói chăn thả.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
- Mẫu đất bề mặt ở khu vực bói chăn thả bờ, nghộ: tại mỗi khu vực chăn thả, cứ khoảng 20 - 30 m2
lấy ngẫu nhiờn ở vị trớ 4 gúc và ở giữa, trộn đều đƣợc một mẫu xột nghiệm (khối lƣợng khoảng 80 - 100 g/mẫu). Mỗi mẫu đƣợc để riờng trong tỳi nilon cú nhón ghi: loại mẫu, địa điểm và thời gian lấy mẫu.
- Mẫu nƣớc ở những vũng nƣớc trờn khu vực bói chăn thả: dựng que khuấy đều vũng nƣớc, lấy cốc thuỷ tinh mỳc khoảng 150 - 200 ml/vũng, cho vào tỳi nilon nhỏ, cú nhón ghi loại mẫu, địa điểm và thời gian lấy mẫu.
* Số mẫu đã thu thập:
Địa phƣơng Huyợ̀n - Xó Sụ́ mẫu thu thập Đất bề mặt Vũng nƣớc đọng Nghĩa Đàn Nghĩa Sơn 32 32 Nghĩa Lõm 27 27 Nghĩa Bỡnh 29 29 Quỳ Hợp Chõu Quang 33 33 Tam Hợp 29 29 Nghĩa Xuõn 34 34
* Phương phỏp xột nghiệm mẫu:
Xột nghiệm mẫu bằng phƣơng phỏp Fulleborn để phỏt hiện trứng giun đũa bờ, nghộ.
+ Bố trớ điều tra và nghiờn cứu sự phỏt triển của trứng, khả năng sống của trứng cú sức gõy bệnh trong phõn.
* Phương phỏp thu thập mẫu:
Thu thập mẫu phõn của những bờ, nghộ nhiễm giun đũa cƣờng độ nhiễm nặng (mỗi mẫu 300 - 400 gam).
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
* Phương phỏp bố trớ thớ nghiệm: