CHƯƠNG 3. THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.2. Đánh giá sinh khả dụng và các thông số dược động học
3.2.2. So sánh nồng độ diclofenac trong dịch tiền phòng của nhũ tương nano và dạng dung dịch
Bố trí 3 lô thí nghiệm theo quy trình ở mục 2.3.5.1 với quy ước là mắt trái nhỏ dạng nhũ tương nano và mắt phải nhỏ dạng dung dịch. Tính toán và xử lý số liệu theo phương pháp đã trình bày ở mục 2.3.5.2, vẽ đường cong nồng độ - thời gian theo giá trị nồng độ quy đổi tính được khi nhỏ 0,05 mL dạng bào chế. Kết quả của 3 lô thí nghiệm được trình bày lần lượt ở bảng 3.9. Kết quả trung bình được trình bày ở bảng 3.10 và hình 3.4.
Bảng 3.9. Kết quả thí nghiệm và tính toán các lô
Mắt trải nhỏ được nhỏ NTN, mắt phải được nhỏ dạng dung dịch
LÔ THỨ 1 Thời
gian (phút)
Diện tích peak (mAU.s)
Khối lượng nhỏ
(mg)
Thể tích nhỏ (ml)
Nồng độ thêm chuẩn
(ng/mL)
Nồng độ thực (ng/mL)
Nồng độ quy đổi (ng/mL) Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải 10 205,5 298,5 42,0 47,4 0,0406 0,0474 1652 2400 1364 2860 1681 3016 20 157,6 235,1 39,1 53,5 0,0378 0,0535 1267 1890 594 1840 786 1720 30 187,4 188,5 29,2 50,4 0,0282 0,0504 1507 1515 1073 1091 1902 1082 40 229,1 178,5 39,8 46,2 0,0385 0,0462 1842 1435 1744 930 2267 1006 50 177,8 178,6 36,4 47,0 0,0352 0,0470 1429 1436 919 932 1306 991 60 178,4 174,3 35,8 45,3 0,0346 0,0453 1434 1401 929 863 1342 952 75 166,6 171,7 44,4 44,5 0,0429 0,0445 1339 1380 739 821 861 922 90 191,8 168,0 37,3 50,9 0,0360 0,0509 1542 1351 1144 761 1587 748 105 170,8 183,6 30,3 52,8 0,0293 0,0528 1373 1476 806 1012 1377 958 120 238,3 204,5 40,1 48,9 0,0387 0,0489 1916 1644 1892 1348 2441 1378 150 147,5 151,5 39,4 55,1 0,0381 0,0551 1186 1218 432 496 567 450 180 137,8 143,6 35,2 50,7 0,0340 0,0507 1108 1155 276 369 405 364
LÔ THỨ 2 Thời
gian (phút)
Diện tích peak (mAU.s)
Khối lượng nhỏ
(mg)
Thể tích nhỏ (ml)
Nồng độ thêm chuẩn
(ng/mL)
Nồng độ thực (ng/mL)
Nồng độ quy đổi (ng/mL) Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải 10 226,3 214,8 35,9 56,9 0,0347 0,0569 1809 1717 1565 1381 2256 1214 20 176,0 263,0 41,6 48,3 0,0402 0,0483 1407 2103 761 2152 947 2227 30 241,4 259,9 40,5 43,7 0,0391 0,0437 1930 2078 1807 2103 2309 2405 40 247,7 235,4 41,4 43,0 0,0400 0,0430 1980 1882 1907 1711 2384 1989 50 231,0 228,7 42,1 48,0 0,0407 0,0480 1847 1828 1640 1604 2016 1670 60 209,9 282,5 26,5 38,6 0,0256 0,0386 1678 2258 1303 2464 2545 3191 75 163,5 186,1 37,5 43,2 0,0362 0,0432 1307 1488 561 923 774 1068 90 170,7 204,9 28,0 42,9 0,0271 0,0429 1365 1638 676 1223 1250 1425 105 195,9 177,6 42,6 48,6 0,0412 0,0486 1566 1420 1079 787 1311 809 120 224,1 228,5 40,1 55,5 0,0387 0,0555 1792 1827 1530 1601 1975 1442 150 178,9 169,6 34,1 45,3 0,0329 0,0453 1430 1356 807 659 1225 727 180 144,0 136,4 37,2 43,4 0,0359 0,0434 1151 1090 249 128 347 147
Mắt trải nhỏ được nhỏ NTN, mắt phải được nhỏ dạng dung dịch LÔ THỨ 3
Thời gian (phút)
Diện tích peak (mAU.s)
Khối lượng nhỏ
(mg)
Thể tích nhỏ (ml)
Nồng độ thêm chuẩn
(ng/mL)
Nồng độ thực (ng/mL)
Nồng độ quy đổi (ng/mL) Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải Trái Phải 10 168,2 178,3 35,8 50,0 0,0346 0,0500 1335 1415 698 858 1009 858 20 154,9 174,8 39,2 52,7 0,0378 0,0527 1229 1387 486 802 643 762 30 166,7 167,4 38,7 36,6 0,0374 0,0366 1323 1328 674 685 900 935 40 159,7 149,1 43,4 56,5 0,0420 0,0565 1267 1183 563 394 670 349 50 146,3 154,8 34,2 51,2 0,0330 0,0512 1161 1228 350 485 530 473 60 156,8 156,7 30,6 44,7 0,0296 0,0447 1244 1244 517 515 874 576 75 172,7 153,3 34,5 49,7 0,0334 0,0497 1370 1217 769 461 1152 463 90 161,5 158,7 32,7 52,2 0,0316 0,0522 1282 1259 591 547 937 523 105 165,4 162,4 29,8 40,7 0,0288 0,0407 1313 1289 653 605 1134 744 120 152,5 164,8 25,6 49,8 0,0247 0,0498 1210 1149 448 326 908 646 150 150,8 159,4 31,9 47,7 0,0309 0,0477 1197 1217 421 463 683 584 180 148,0 160,5 34,9 48,9 0,0337 0,0489 1174 1274 377 575 559 588
Bảng 3.10. Kết quả thí nghiệm và tính toán trung bình 3 lô (n=3) Mắt trải nhỏ được nhỏ NTN, mắt phải được nhỏ dạng dung dịch Thời
gian
Trái
(ng/mL) Trung
bình trái (ng/mL)
SD trái
Phải
(ng/mL) Trung
bình phải (ng/mL)
SD phải Lần
1 Lần
2 Lần
3 Lần
1 Lần
2 Lần
3
10 1681 2256 1009 1649 624 3016 1214 858 1696 1157
20 786 947 643 792 152 1720 2227 762 1570 744
30 1902 2309 900 1704 725 1082 2405 935 1474 810
40 2267 2384 670 1774 958 1006 1989 349 1115 825
50 1306 2016 530 1284 743 991 1670 473 1045 600
60 1342 2545 874 1587 862 952 3191 576 1573 1414
75 861 774 1152 929 198 922 1068 463 818 316
90 1587 1250 937 1258 325 748 1425 523 899 469
105 1377 1311 1134 1274 126 958 809 744 837 110
120 2441 1975 908 1775 786 1378 1442 646 1155 442
150 567 1225 683 825 351 450 727 584 587 139
180 405 347 559 437 110 364 147 588 366 221
Hình 3.4. Đồ thị biểu diễn đường cong nồng độ - thời gian trung bình 3 lô
0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190
Nồng độ (ng/mL)
Thời gian (phút)
NTN Dung dịch
Nhận xét:
Đường cong nồng độ - thời gian không tuân theo một quy luật đã biết nào với nhiều đỉnh hấp thu bởi giá trị nồng độ thu được tại các thời điểm không phải được thu thập từ một cá thể mà là của tới 12 cá thể. Điều này có thể khắc phục được bằng cách lấy kết quả trung bình của nhiều thỏ thí nghiệm. Trên đồ thị biểu diễn đường cong nồng độ - thời gian trung bình 3 lô (hình 3.4) cho thấy sai số này đã được khắc phục một phần, nhất là với đường cong của dạng dung dịch khi chỉ còn thời điểm 60 phút là chưa được hoàn toàn hợp lý.
Nếu xét trên toàn bộ thời điểm thì dao động cá thể lớn, nhưng tính tại từng thời điểm khi so sánh 2 dạng NTN và dạng dung dịch thì sai số này lại không đáng kể. Bởi với mỗi con thỏ, hai mắt có thể được xem như có đặc điểm giải phẫu và sinh lý tương tự nhau. Các thuốc lại được nhỏ gần như cùng lúc, dạng NTN vào mắt trái, dung dịch vào mắt phải. Do vậy có thể kết luận chính xác tại thời điểm nào thì dạng NTN sẽ có nồng độ dược chất trong dịch tiền phòng cao hơn dạng dung dịch.
Dựa trên kết quả trung bình của 3 lô, có thể nhận thấy tại đa phần các thời điểm, nồng độ diclofenac trong dịch tiền phòng của dạng NTN đều cao hơn dạng dung dịch (tới 10/12 thời điểm). Các thời điểm dạng dung dịch có nồng độ cao hơn chủ yếu tập trung vào những phút đầu ở 10 và 20 phút đã phản ánh đúng lý thuyết. Dạng bào chế dung dịch tuy có khả năng thấm nhanh ở giai đoạn đầu nhưng cũng bị rửa trôi, thải trừ rất nhanh. Dạng nhũ tương nano, với các siêu vi hạt chứa dược chất giúp kiểm soát và duy trì giải phóng, giúp nồng độ trong mắt đạt ngưỡng điều trị lâu hơn.
Tuy nhiên, kết quả thu được vẫn chưa hoàn toàn thuyết phục nhất là với kết quả ở lô 2, kéo theo kết quả trung bình không thể hiện được rõ ràng sự chênh lệch nồng độ khi sử dụng hai dạng bào chế như kết quả ở lô 1 và lô 3. Điều này có thể do phương pháp còn chưa được chuẩn hóa ở bước nhỏ thuốc và lấy mẫu.