Sắc ký lớp mỏng cho phép xác định mẫu cần phân tích có chứa bao nhiêu chất khác nhau. Khi lựa chọn được hệ dung môi giải ly phù hợp, các vết rải đều ra trên bản mỏng với màu sắc và đ đậm nhạt khác nhau. Nhìn màu sắc, đ đậm nhạt, giá trị của Rf của các vết chất ta có thể đoán biết sơ b trong mẫu phân tích có các loại hợp chất nào, nhiề ha t, đâ à các tạp chất.
Sắc ký lớp mỏng à phương pháp định t nh và có đ phân giải thấp, nếu sau khi giải ly, quan sát thấy m t vết trên bản mỏng hông có nghĩa chỉ là m t chất mà có thể là hai hay vài chất tụ lại với nhau. M t hợp chất tinh khiết chỉ có duy nhất m t vết trên sắc ký lớp mỏng, với giá trị Rf hông đổi, trong m t hệ dung môi giải xác định, bởi bản sắc ký của m t lô sản xuất nhất định.
SV: Huỳnh Thị Thanh Nguyệt Lớp: 16CHDE Trang 51 3.4.1. Kết quả sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao n - Hexane
Kết quả sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao n - Hexane tách từ tổng cao Ethanol giải ly bằng các d ng môi có đ phân cực khác nhau được thể hiện trên hình 3.7.
Hình 3.7. Kết quả chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao n - Hexane giải ly bằng các dung môi đơn n - Hexane (a), Dichloromethane (b), Ethyl Acetate (c),và các hệ dung môi Hexane :
Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8 (d), 4:6 (e), 6:4 (f), 8:2 (g).
Nhận xét: Với d ng môi đơn n - Hexane và Dichlorometane cấu tử được tách ra hông đáng ể và hầu như vẫn ở gần điểm chấm mẫu. Với dung môi Ethyl Acetate cấu tử được tách ra gần rõ, kéo dài trong khoảng từ 1/2 đến 2/3 từ mức xuất phát đến mức tiền tuyến. Khi sử dụng hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate với các tỷ lệ lần ượt là 2:8; 4:6; 6:4; 8:2 cho kết quả ở tỷ lệ 2:8 là t t nhất cho thấy có 3 nhóm chất rõ rệt.
Màu sắc và giá trị Rf của các vết chất được thể hiện trên bảng 3.12.
Bảng 3.12. Kết quả giá trị Rf của các chất xuất hiện trên bản mỏng của phân đoạn cao Hexane giải ly bằng hệ dung môi Hexane - Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8 (d).
Nhóm chất 1 2 3
Màu sắc Vàng chanh Xanh dương Đỏ anh đào
Giá trị của a 3,10 3,40 3,77
Giá trị của b 5,00 5,00 5,00
Giá trị của Rf 0,62 0,68 0,75
Kết quả: Chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao n - Hexane giải ly bằng hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8 cho thấy có 3 nhóm chất rõ rệt với giá trị Rf
=0,62 (màu vàng chanh), Rf =0,68 (màu xanh dương) và Rf =0,75 (mà đỏ anh đào).
SV: Huỳnh Thị Thanh Nguyệt Lớp: 16CHDE Trang 52 3.4.2. Kết quả sắc ký lớp mỏn phân đoạn cao Dichloromethane
Kết quả sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Dichloromethane tách từ tổng cao Ethanol giải ly bằng các d ng môi có đ phân cực khác nhau được thể hiện trên hình 3.8.
Hình 3.8. Kết quả chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Dichloromethane giải ly bằng các dung môi đơn n - Hexane (a), Dichloromethane (b), Ethyl Acetate (c),và các hệ dung môi n –
Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8 (d), 4:6 (e), 6:4 (f), 8:2 (g).
Nhận xét: Với d ng môi đơn n - Hexane, Dichlorometane và hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate ở tỷ lệ 6:4; 8:2 cấu tử được tách ra hông đáng ể và gần như vẫn ở gần điểm chấm mẫu. Với dung môi Ethyl Acetate cấu tử được tách ra khá rõ nhưng các vết khá gần nhau. Khi sử dụng các hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate ở tỷ lệ 2:8; 4:6 cho kết quả các chất tách rời t t nhất, nhưng hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate ở tỷ lệ 4:6 cho khoảng cách giữa các vết t t nhất. Màu sắc và giá trị Rf của các vết chất được thể hiện trên bảng 3.13.
Bảng 3.13. Kết quả x c đinh gi trị Rf của các chất xuất hiện trên bản mỏng của phân đoạn cao Dichloromethane giải ly bằng Hexane : Ethyl Acetate ở tỷ lệ 4:6(e).
Nhóm chất 1 2
Màu sắc Xanh nhạt Xanh dương Giá trị của a 2,80 3,58 Giá trị của b 5,00 5,00 Giá trị của Rf 0,56 0,72
Kết quả: Chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Dichloromethane giải ly bằng hệ dung môi Hexane - Ethyl Acetate tỷ lệ 4:6 cho thấy có 2 nhóm chất rõ rệt với giá trị Rf =0,56 (màu xanh nhạt), Rf =0,72 (màu xanh dương).
SV: Huỳnh Thị Thanh Nguyệt Lớp: 16CHDE Trang 53 3.4.3. Kết quả sắc ký lớp mỏn phân đoạn cao cao Ethyl Acetate
Kết quả sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Ethyl Acetate tách từ tổng cao Ethanol giải ly bằng các d ng môi có đ phân cực khác nhau được thể hiện trên hình 3.9.
Hình 3.9. Kết quả chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Ethyl Acetate giải ly bằng các dung môi đơn n - Hexane (a), Dichloromethane (b), Ethyl Acetate (c),và các hệ dung môi n -
Hexane: Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8 (d), 4:6 (e), 6:4 (f), 8:2 (g).
Nhận xét: Về cơ bản với cả d ng môi đơn n - Hexane (a), Dichloromethane (b) và hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 8:2 không thấy cấu tử được tách ra và vết mẫu gần như vẫn tập tr ng nga điểm chấm mẫu. Với các hệ dung môi n – Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 2 (d), 4 6 ( ), 6 4 (f) và d ng môi đơn Eth Ac tat thì có d nhất m t vệt chất xuất hiện. Màu sắc và giá trị Rf của các vết chất được thể hiện trên bảng 3.14.
Bảng 3.14. Kết quả x c đinh gi trị Rf của các chất xuất hiện trên bản mỏng của phân đoạn cao Ethyl Acetate, giải ly bằng Ethyl Acetate (c).
Chất 1
Màu sắc Xanh dương
Giá trị a 2,90
Giá trị b 5,00
Giá trị Rf 0,58
Kết quả: Chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Ethyl Acetate giải ly bằng dung môi đơn Ethyl Acetate cho thấy có 1 nhóm chất rõ rệt với giá trị Rf = 0,58 (màu xanh dương)
SV: Huỳnh Thị Thanh Nguyệt Lớp: 16CHDE Trang 54 3.4.4. Kết quả sắc ký lớp mỏn phân đoạn cao Nước
Kết quả sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Nước tách từ tổng cao Ethanol giải ly bằng các d ng môi có đ phân cực khác nhau được thể hiện trên hình 3.10.
Hình 3.10. Kết quả chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao nước giải ly bằng c c dung môi đơn Hexane (a), Dichloromethane (b), Ethyl Acetate (c),và các hệ dung môi Hexane - Ethyl
Acetate tỷ lệ 2:8 (d), 4:6 (e), 6:4 (f), 8:2 (g).
Nhận xét: Với d ng môi đơn H xan (a) cấu tử được tách ra hông đáng ể và gần như vẫn ở nga điểm chấm mẫu. Với dung môi Dichloromethane (b), hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 8:2 (g) 1 cấu tử được tách ra tương đ i t t, nhưng còn vài cấu tử gần như vẫn ở nga điểm chấm mẫu. Với dung môi Ethyl Acetate (c) cấu tử được tách ra há rõ nhưng các vết chất còn khá gần nhau. Với hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8 (d), 4:6 (e) cấu tử được tách ra t t nhất. Với hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 6:4 (f) cấu tử được tách ra tương đ i t t, khoảng cách giữa các vết tương đ i xa nhưng còn há gần với điểm chấm mẫu. Màu sắc và giá trị Rf của các vết chất được thể hiện trên bảng 3.15.
Bảng 3.15. Kết quả x c đinh gi trị Rf của các chất xuất hiện trên bản mỏng của phân đoạn cao Nước, giải ly bằng hệ dung môi Hexane: Ethyl Acetate tỷ lệ 4:6(e).
Chất 1 2
Màu sắc Vàng chanh Xanh dương
Giá trị a 3,20 3,88
Giá trị b 5,00 5,00
Giá trị Rf 0,64 0,78
SV: Huỳnh Thị Thanh Nguyệt Lớp: 16CHDE Trang 55 Kết quả: Chạy sắc ký lớp mỏng phân đoạn cao Nước giải ly bằng hệ dung môi Hexan: Ethyl Acetate tỷ lệ 4:6 cho thấy có 2 nhóm chất rõ rệt với giá trị Rf =0,64 (màu vàng chanh), giá trị Rf = 0,7 (mà xanh dương)
Nhận xét chung: Kết quả chạy sắc ký lớp mỏng đ i với các cao phân đoạn:
Hexane, Dich orom than , Eth Ac tat và cao Nước đều cho kết quả gần như nha Với d ng môi đơn Eth Ac tat và hệ dung môi Hexane : Ethyl Acetate tỷ lệ 2:8; 4:6 các cấu tử tách ra rõ nhất và xuất hiện được nhiều vết nhất và ở phân đoạn cao Hexane, các chất xuất hiện trên bản mỏng rất rõ ràng, đặc trưng hơn so với các phân đoạn cao đ hảo sát.