Thu nhận ít nhất 10 khuẩn lạc trắng, tăng sinh trong 3 ml môi trường BHI chứa các kháng sinh kanamycine 50 μg/ml và gentamicin 7 μg/ml, tetracycline 10 μg/ml khoảng 16-18 giờ, ở 370C. Tiếp tục tăng sinh dịch vi khuẩn nuôi cấy qua đêm trong 50 ml môi trường BHI chứa kháng sinh như trên ở 370C, lắc 225 vòng/phút, khoảng 4 giờ. Tái tổ hợp được tách chiết sử dụng bộ Kit QIAfilter Midi, theo hướng dẫn cảu nhà sản xuất. Quy trình được thực hiện như sau: ly tâm để thu sinh khối vi khuẩn ở 6000xg trong 15 phút, 40C. Hòa cặn trong 4ml dung dịch P1. Bổ sung 4ml dung dịch P2, trộn đều bằng cách đảo 4-6 lần và ủ ở nhiệt độ phòng
trong 5 phút. Bổ sung 4 ml dung dịch P3 đã được làm lạnh, trộn đều hỗn hợp bằng cách đảo 4-6 lần. Chuyển dịch ly giải vào trong ống của cartridge và ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Cân bằng QIAGEN tip 100 bằng cách cho 4 ml QBT vào và để chảy tự do. Mở nắp QIAfilter cartridge, nhẹ nhàng đưa pittông vào QIAfilter cartridge và lọc dịch ly giải tế bào trong QIAGEN tip. Cho dịch ly giải đã được làm sạch vào resin bằng dòng trọng lực. Rửa QIAGEN tip với 20 ml dung dịch QC. Dung giải DNA với 5 ml QF. Tủa DNA bằng cách bổ sung 3.5 ml isopropanol (giữ ở nhiệt độ phòng) và trộn đều. Ly tâm 16000 vòng/phút trong 30 phút, 40C. Cẩn thận loại bỏ dịch nổi. Rửa cặn DNA với 2ml ethanol 70% (giữở nhiệt độ phòng) và ly tâm 16000 vòng/phút trong 10 phút, 40C. Cẩn thận loại bỏ dịch nổi. Cặn được làm khô trong 5-10 phút và tái hòa tan trong dung dịch đệm TE [32].
Sản phẩm bacmid tái tổ hợp tách chiết được định lượng bằng thiết bị GeneQuant II (nhưđã trình bày ở phần trên).