L ỜI MỞ ĐẦU 1.
2.2.2. Phương pháp tinh sạch
Thành phần polysaccharide rong nâu bao gồm alginate, laminaran và fucoidan. Các hợp chất này có một số các đặc tính hóa lý khác nhau, dựa vào đó chúng ta có thể tách riêng từng chất.
a. Alginate
Alginic acid là polysacarit dị hợp được tạo thành từ các khối mannuronic acid và guluronic acid. Thành phần của các khối phụ thuộc vào loài rong được
Hình 2.1 phân tử alginic axít (G: guluronic axít, M: mannuronic axít) Trong rong alginic axít cùng với fucoidan nằm ở màng tế bào xen lẫn với các sợi cellulose.
Một đặc tính hóa học của alginate là kết hợp với calcium tạo thành gel, khi nồng độ calcium đủ lớn thì tạo thành kết tủa. Alginate calcium được tạo thành là do calcium kết hợp với gốc carboxylate của các guluronic axít nằm trong mạch alginate.
b. laminaran
http://ars.els-cdn.com/content/image/1-s2.0-S0043135403002938-gr4.gif
Laminaran là polysacarit của glucose (1(3)-(-D-glucan, gốc đường cuối mạch có thể là mannitol (M-series) hoặc vẫn là glucose (G-series). Laminaran kết tủa trong etahnol ở nồng độ 85% (v/v).
Để thu nhận fucoidan tinh sạch có thể sử dụng một số phương pháp đã được nghiên cứu như sau :
Kết tủa fucoidan bằng nhựa lỏng hoặc cho hấp thụ lên nhựa trao đổi ion, fucoidan là anion polysaccharide vì vậy cần loại bỏ alginate, một anion polysaccharide khác, đồng thời phải loại được các muối trong dung dịch vì ion âm trong dung dịch sẽ đẩy fucoidan ra khỏi nhựa hoặc đẩy ra khỏi kết tủa làm mất đi một lượng lớn fucoidan.
Do đó sử dụng phương pháp này cần chú ý:
Loại bỏ alginate : alginate kết tủa dưới 2 dạng : alginate calcium và axít alginic.
Loại bỏ muối trong dung dịch: pha loãng dung dịch để giảm nồng độ muối, dùng hệ thống siêu lọc tách loại đồng thời muối và nước, cô đặc dung dịch.
Kết tủa fucoidan bằng cách kết tủa phân đoạn các polysaccharide có trong dịch chiết bằng dung môi hữu cơ ví dụ như kết tủa polysaccharide trong dịch chiết rong nâu bằng ethanol.