2.2.4.1. Bố trí thí nghiệm tổng quát
Hình 2.1. Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng quát Chuẩn bị mẫu:
Lá bắp tươi rửa sạch, để ráo, lấy 8,5kg lá bắp tươi cắt nhỏ.
Cho vào máy xay cùng với một lượng MgCO3 chiếm khoảng 0,05% so với lá bắp. Xay nhiều lần, mỗi lần xay với thời gian ngắn khoảng từ 5-7 giây để tránh sự gia tăng nhiệt độ, gây ảnh hưởng đến thành phần chlorophyll.
Mẫu đồng nhất trên được bảo quản trong ngăn lạnh để sử dụng cho tất cả các thí nghiệm chiết.
Chiết:
Cân chính xác 100g mẫu đã chuẩn bị vào cốc thủy tinh được bọc tối, thêm dung môi chiết với lượng xác định, bổ sung MgCO3 với lượng chiếm khoảng 0,05% so với mẫu chiết, cho mẫu vào bể điều nhiệt giúp cho sự ổn định nhiệt độ chiết để tiến hành ngâm chiết. Sau khoảng thời gian xác định, mẫu chiết được đem đi lọc bằng giấy lọc.
Dịch chiết sau lọc được tiến hành xác định hoạt tính chống oxy hóa và hàm lượng chlorophyll. Lá bắp Rửa sạch Xay nhỏ Chiết Dịch Chlorophyll thô Xác định: Hàm lượng chlorophyll Hoạt tính chống oxy hóa
2.2.4.2. Bố trí thí nghiệm xác định loại dung môi chiết
Hình 2.2. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định loại dung môi chiết
Cách tiến hành:
Chuẩn bị 3 mẫu, mỗi mẫu lấy 100g lá đã xay nhỏ cho vào lọ chiết tối màu. Mẫu 1: bổ sung dung môi acetone nồng độ 100% với tỉ lệ giữa nguyên liệu và dung môi là 25:1.
Mẫu 2, mẫu 3 bổ sung dung môi lần lượt là methanol và ethanol với nồng độ và tỉ lệ tương tự.
Sau đó cho vào cả 3 mẫu một lượng MgCO3 nhất định là 0,05%, lắc đều rồi tiến hành ngâm chiết trong bể ổn nhiệt ở chung một điều kiện: ở nhiệt độ 600C trong thời gian 24h.
Lọc
Đánh giá:
Hoạt tính chống oxy hóa Hàm lượng chlorophyll
Chọn loại DM Chiết
Aceton Methanol Ethanol
Nồng độ dung môi 80% Tỷ lệ DM:NL 25:1
Thời gian: 24h MgCO3: 0,05% Nhiệt độ chiết: 600C
2.2.4.3. Bố trí thí nghiệm xác định nồng độ dung môi chiết
Hình 2.3. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nồng độ dung môi chiết
Cách tiến hành:
Chuẩn bị 3 mẫu, mỗi mẫu lấy 100g lá đã xay nhỏ cho vào lọ chiết tối màu. Mẫu 1, mẫu 2, mẫu 3 bổ sung dung môi đã chọn với nồng độ lần lượt là 70%, 80% và 96% với tỉ lệ dung môi: nguyên liệu là 25/1.
Sau đó lắc đều rồi ngâm chiết trong bể ổn nhiệt ở nhiệt độ 600C trong 24h.
70% 80% 96%
Lọc
Chọn nồng độ dung môi chiết Đánh giá:
Hoạt tính chống oxy hóa Hàm lượng chlorophyll (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Tỉ lệ DM/NL: 25/1 Nhiệt độ chiết: 600C Thời gian: 24h Chiết
2.2.4.4. Bố trí thí nghiệm xác định tỉ lệ dung môi/nguyên liệu
Hình 2.4. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỉ lệ dung môi/nguyên liệu
Cách tiến hành:
Chuẩn bị 5 mẫu, mỗi mẫu lấy 100g lá bắp cho vào lọ chiết tối màu.
Mỗi mẫu tiến hành bổ sung dung môi với nồng độ đã chọn theo các tỉ lệ dung môi/nguyên liệu tương ứng sau: 10/1, 20/1, 30/1, 40/1, 50/1.
Sau đó lắc đều rồi ngâm chiết trong bể ổn nhiệt ở nhiệt độ 600C trong 24h. Chiết 10/1 20/1 30/1 40/1 50/1 Nhiệt độ chiết: 600C Thời gian: 24h Lọc Đánh giá:
Hoạt tính chống oxy hóa Hàm lượng chlorophyll
Chọn tỉ dung môi/nguyên liệu ng môi
2.2.4.5. Bố trí thí nghiệm xác định thời gian chiết
Hình 2.5. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian chiết
Cách tiến hành
Chuẩn bị 10 mẫu, mỗi mẫu lấy 100g lá bắp cho vào lọ chiết tối màu. Mỗi mẫu tiến hành bổ sung dung môi với nồng độ và tỉ lệ đã chọn.
Sau đó lắc đều rồi tiến hành ngâm chiết trong bể ổn nhiệt ở nhiệt độ 600C trong thời gian các khoảng khác nhau, lần lượt là 0,5h, 1h, 1,5h, 2h, 2,5h, 8h, 16h, 24h, 32h, 48h.
Chiết
U
0,5h 1h 1,5h 2h 2,5h
Đánh giá:
Hoạt tính chống oxy hóa Hàm lượng chlorophyll
8h 16h 24h 40h 48h
Lọc
Nhiệt độ 600C
2.2.4.6. Bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ chiết
Hình 2.6. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ chiết
Cách tiến hành:
Chuẩn bị 6 mẫu, mỗi mẫu lấy 100g lá bắp cho vào lọ chiết tối màu. Mỗi mẫu tiến hành bổ sung dung môi với nồng độ và tỉ lệ đã chọn.
Sau đó cho vào cả 6 mẫu một lượng MgCO3 nhất định là 0,05%, lắc đều rồi tiến hành ngâm chiết trong bể ổn nhiệt ở các nhiệt độ khác nhau, lần lượt là nhiệt độ phòng (300C), 400C, 500C, 600C, 700C và 800C trong thời gian đã chọn.
700C 600C 500C 800C Nhiệt độ phòng 400C Lọc Chọn nhiệt độ chiết Đánh giá:
Hoạt tính chống oxy hóa Hàm lượng chlorophyll (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chiết