3.3. Kết quả khảo sát hoạt tính kháng viêm trên chuột nhắt trắng dòng BALB/c
3.3.1. Kết quả khảo sát hoạt tính kháng viêm trên mô hình gây phù chân và gây u hạt trên chuột nhắt trắng dòng BALC/c
Để khảo sát hoạt tính kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất, chúng tôi sử dụng mô hình gây viêm cấp ở chân bằng carrageenan và mô hình gây u hạt ở nách phải chuột nhắt trắng dòng BALB/c. Các kết quả thu được trong 2 mô hình nghiên cứu này cho phép đánh giá sơ bộ hoạt tính kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất.
❖ Kết quả hoạt tính kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất trên mô hình gây phù chân chuột
Sau khi gây phù chân chuột bằng dung dịch carrageenan, thể tích bàn chân chuột được đo ở thời điểm trước khi gây viêm và ở các thời điểm 2h, 4h, 6h và 24h sau khi gây viêm. Tính độ tăng thể tích chân chuột và % ức chế phù ở các lô chuột, từ đó đánh giá hoạt tính kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất.
Kết quả đánh giá ảnh hưởng của cao chiết ethanol từ cây Sài đất đối với mức độ tăng thể tích và tỉ lệ phần trăm ức chế phù chân chuột được thể hiện qua hình 3.1. và 3.2.
29 Hình 3.1. Ảnh hưởng cao chiết ethanol từ cây Sài đất đối với mức độ tăng
thế tích chân chuột (V%)
Hình 3.2. Tỉ lệ phần trăm ức chế phù (I%) của các lô chuột thực nghiệm.
Từ kết quả hình 3.1. và 3.2. cho thấy cao chiết ethanol từ cây Sài đất có tác dụng giảm viêm trên mô hình viêm cấp thực nghiệm bằng carrageenan.
- Tại các thời điểm 2h, 4h, 6h, 24h mức độ tăng thể tích chân chuột ở lô 5 (lô đối chứng) lớn hơn so với mức độ tăng thể tích chân chuột của các nhóm chuột ở lô 1, lô 2 và lô 3 (lô thí nghiệm). Kết quả này cho thấy cao chiết
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
2h 4h 6h 24h
lô 1 -liều 500mg/kgP lô 2 -liều 250mg/kgP Lô 3 -liều 125mg/kgP lô 4 uống indomethacin lô đối chứng
0 10 20 30 40 50 60 70
2h 4h 6h 8h
thời gian theo dõi
lô 1 -uống CCCSĐ liều 500mg/kgP
lô2-uống CCCSĐ liều 250mg/kgP
lô 3-uống CCCSĐ liều 125mg/kgP
lô 4 -uống indomethacin
%
%
`
30 ethanol từ cây Sài đất có tác dụng giảm viêm.
- So sánh mức độ tăng thể tích chân chuột ở lô 1, lô 2 và lô 3 cho thấy tại các thời điểm nghiên cứu, mức độ tăng thể tích chân chuột giảm từ lô 1 giảm đến lô 3.
+ Tại thời điểm 2h, mức độ tăng thể tích chân chuột trung bình ở lô 1 là: 26,48%; lô 2 là: 34,1% và lô 3 là 37,01%.
+ Tại thời điểm 4h, mức độ tăng thể tích chân chuột trung bình ở lô 1 là: 34,13%; lô 2 là: 45,03% và lô 3 là 47,03%.
+ Tại thời điểm 6h, mức độ tăng thể tích chân chuột trung bình ở lô 1 là: 36,88%; lô 2 là: 50,37% và lô 3 là 53,37%.
+ Tại thời điểm 24h, mức độ phù chân chuột trung bình ở lô 1 là:
25,46%; lô 2 là: 35,06% và lô 3 là 37,12%.
Kết quả so sánh cho thấy khả năng kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất phụ thuộc vào nồng độ. Cao chiết ethanol từ cây Sài đất ở nồng độ 500mg/kgP có khả năng kháng viêm tốt hơn ở nồng độ 250mg/kgP và 125mg/kgP.
- Khi so sánh mức độ tăng thể tích chân chuột ở lô 1, lô 2 và lô 3 với lô uống indomethacin cho thấy: mức độ tăng thể tích chân chuột ở lô uống indomethacin thấp hơn so với lô 2 và lô 3 nhưng cao hơn so với lô 1. Khi so sánh phần trăm giảm phù của chân chuột ở các lô cho thấy phần trăm giảm phù chân chuột ở lô 2, 3 thấp lô uống indomethacin. Trong khi đó phần trăm giảm phù của lô 1 cao hơn so với lô uống indomethacin.
Kết quả so sánh này một lần nữa cho thấy cao chiết ethanol từ cây Sài đất có hoạt tính kháng viêm và hoạt tính khả năng kháng viêm phụ thuộc vào nồng độ. Ở các nồng độ thử nghiệm, nồng độ cao chiết càng cao thì hoạt tính càng mạnh.
Carrageenan là một polysacarid mạch thẳng sulfat hóa, được chiết từ loài rong sụn và rong đỏ và thường được sử dụng để gây viêm cấp tính.
31 Carrageenan gây phản ứng viêm qua 2 giai đoạn: giai đoạn đầu tiên là do giải phóng histamine và serotonin; giai đoạn thứ hai là do sự giải phóng bradykinin protease, prostaglandin và lysosome [54].
Như cậy, cao chiết ethanol từ cây sài đất có thể thông qua hoạt động ức chế quá trình giải phóng các chất trung gian ở giai đoạn đầu hoặc ức chế cyclo-oxygenase ở giai đoạn tiếp để kháng viêm.
Theo kết quả khảo sát sơ bộ về thành phần hóa học cho thấy trong cao chiết ethanol từ cây Sài đất có các hợp chất thuộc lớp chất flavonoid, ancaloid, tannin và saponin. Theo kết quả nghiên cứu đã được công bố các hợp chất thuộc các lớp này có hoạt tính kháng viêm.
+ Hoạt động kháng viêm của flavonoid có thông qua hoạt động ức chế các hoạt động COX và LOX, sinh tổng hợp eicosanoid và khử bạch cầu trung tính [33].
+ Ancaloid có khả năng tham gia hoạt động kháng viêm thông qua hoạt động ức chế các yếu tố gây viêm như các chất trung gian hóa học, cytocin,…
[35].
+ Hoạt tính kháng viêm của tannin cũng đã được chứng minh thông qua 2 mô hình gây viêm phù chân chuột bằng carrageenan gây phù chân chuột và thử nghiệm u hạt bông. Ở liều cao hơn, tannin dùng đường uống cũng có hoạt động trong các thí nghiệm phù chân [37].
+ Saponin là một nhóm glycoside được tìm thấy trong nhiều loại thực vật. Saponin có thể được phân loại thành hai nhóm dựa trên bản chất của bộ xương aglycone của chúng. Theo kết quả nghiên cứu, nhiều hợp chất thuộc lớp chất saponin có hoạt tính kháng viêm thông qua các hoạt động như tăng tính thấm của mạch máu, ức chế quá trình giải phóng PFE2 và TNF-α hay ức chế sự hình thành gốc tự do NO[38, 39].
❖ Kết quả hoạt tính kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất trên mô hình gây u hạt ở chuột nhắt trằng dòng BALB/c
32 Kết quả hoạt tính kháng viêm của cao chiết ethanol từ cây Sài đất trên môn hình gây u hạt ở chuột nhắt trắng được trình bày qua bảng 3.3.
Bảng 3.3. Tác dụng của chiết xuất Wedelia Chinensis đối với bệnh u hạt gây ra ở chuột.
Lô thí nghiệm Liều dùng
(mg/kgP)
Trọng lượng u hạt (mg)
Khả năng ức chế Sự tăng lên u hạt (%)
Bệnh lý 0 27,8 ± 0,71
Lô uống indomethacin 10 11,7 ± 2,72 57,45
Lô uống cao chiết ethanol
từ cây Sài đất 125 21,2 ± 3,31 25,27
Lô uống cao chiết ethanol
từ cây Sài đất 250 17,4 ± 2,95 36,73
Lô uống cao chiết ethanol
từ cây Sài đất 500 9,8 ± 1,77 64,36
Qua bảng số liệu trên ta thấy rằng trọng lượng tăng của u hạt giảm dần từ lô uống cao chiết từ nồng độ 125mg/kg (21,2 ± 3,3mg) đến lô uống cao chiết ở nồng độ 500mg/kgP (9,8 ± 1,77mg).
Khi so sánh trọng lượng tăng u hạt của các lô uống cao chiết với lô uống indomethacin cho thấy: trọng lượng tăng u hạt ở lô uống indomethacin thấp hơn sơ với lô uống ở nồng độ cao chiết 125mg/kgP và 250mg/kgP nhưng lại cao hơn so với lô uống 500mg/kgP. Phần trăm ức chế sự tăng lên u hạt của lô uống indomethacin (57,45%) cao hơn so với lô uống liều 125mg/kgP (25,27%) và lô uống liều 250mg/kgP (36,73%) nhưng thấp hơn lô uống liều 500mg/kgP (64,36%).
U hạt là một đặc điểm điển hình của phản ứng viêm cấp. Phương pháp u hạt dạng bông đã được sử dụng rộng rãi để đánh giá các giai đoạn
33 viêm: xuất tiết và giai đoạn tăng sinh của viêm cấp. Dịch rĩ viêm được hấp phụ bởi các viên ảnh hưởng rất lớn đến trọng lượng ướt của u hạt, trong khi đó trọng lượng khô tương quan tốt với lượng mô hạt hình thành [46]. Khi đánh giá về trọng lượng khô của u hạt cho thấy cao chiết ethanol của cây Sài đất có hoạt tính ngăn cản sự tăng sinh trọng lượng u hạt. Kết quả này một lần nữa cho thấy cao chiết ethanol của cây Sài đất có hạt tính kháng viêm. Hoạt tính kháng viêm thông qua hoạt động ngăn cản quá trình xuất tiết dịch rĩ viêm và giai đoạn đoạn tăng sinh của quá trình viêm của cao chiết ethnol của cây Sài đất cũng có thể được giải thích do sự xuất hiện các hợp chất thuộc lớp chất flavonoid, ancaloid, tanin và saponin trong thành phần hóa học của cây Sài đất.
Như vậy, qua cả hai mô hình thử nghiệm: gây viêm cấp ở chân bằng carrageenan và mô hình gây u hạt ở nách phải trên chuột nhắt trắng đều cho thấy cao chiết ethanol từ cây Sài đất có hoạt tính kháng viêm và hoạt tính kháng viêm tăng khi tăng nồng độ cao chiết trong các mức nồng độ nghiên cứu.