4.1 Kết luận
Tinh trùng cá chẽm mõm nhọn bảo quản ở tỷ lệ 1:3 cho hoạt lực và vận tốc cao nhất (84,89±1,21% và 137,22±1,12 µm/s) và thấp nhất ở tỷ lệ 1:10 (52,00±1,57% và 135,56±1,79 µm/s).
Hoạt lực và vận tốc tinh trùng là cao nhất khi bảo quản trong ASP (84,89±1,21% và 137,22±1,12 µm/s) và thấp nhất trong RSW (34,78±2,20% và 105,56±2,03 µm/s).
DMSO ở nồng độ 10% là chất chống đông thích hợp cho bảo quản tinh trùng cá chẽm mõm nhọn với kết quả hoạt lực và vận tốc tốt nhất 84,89±1,21% và 137,22±1,12 µm/s. Trong khi đó, tinh trùng bảo quản trong Methanol ở nồng độ 20% cho kết quả thấp nhất 8,78±1,02% và 69,44±2,12 m/s.
Hoạt lực và vận tốc tinh trùng cá chẽm mõm nhọn quan sát được khi bảo quản theo quy trình 2 bước là cao nhất (84,89±1,21% và 137,22±1,12 µm/s) và thấp nhất ở quy trình làm lạnh trực tiếp (7,44±0,82% và 71,78±2,67µm/s).
Tỷ lệ thụ tinh và tỷ lệ nở sau khi bảo quản thu được:
- Sau 1 tuần: tỷ lệ thụ tinh: 66,93 ± 0,93% và tỷ lệ nở: 44,16 ± 1,47% - Sau 1 tháng: tỷ lệ thụ tinh: 65,40±1,11% và tỷ lệ nở: 43,88±1,54% - Sau 1 năm: tỷ lệ thụ tinh 65,13 ± 1,31% và tỷ lệ thụ tinh 43,24 ± 1,41%
4.2 Đề xuất ý kiến:
Kết quả tốt nhất đạt được khi sử dụng ASP làchất bảo quản tinh trùng cá chẽm mõm nhọn trong nitơ lỏng, ASP được tạo nên dựa vào các thành phần trong dịch tương của cá. Tuy kết quả tốt hơn các chất bảo quản khác song vẫn chưa cao do đó, cần có thêm nghiên cứu về các chất bảo quản để có thể đạt được kết quả cao nhất.
DMSO là chất chống đông thích hợp để bảo quản tinh trùng cá trong nitơ lỏng trong nghiên cứu này nhưng cũng cần có những nghiên cứu sâu hơn về các chất chống đông khác nhằm mang lại kết quả tốt hơn.
Tương tự cần có nhiều hơn những nghiên cứu về tỷ lệ pha lỗng và quy trình làm lạnh nào là phù hợp nhất cho bảo quản tinh trùng cá chẽm mõm nhọn trong nitơ lỏng.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tài liệu tiếng Việt
1. Hồ Thu Cúc (1996), "Tổ chức học - Phôi sinh học", Tài liệu lưu hành nội bộ. 2. Hồ Kim Diệp, Trần Thị Thúy Hà, Đặng Thị Tuyết Mai, Phạm Anh Tuấn và Trần
Vũ Hùng (2002), "Báo cáo tổng kết đề tài bảo quản tinh cá", Viện nghiên cứu Nuôi
trồng thủy sản 1.
3. Lưu Thị Dung và Phạm Quốc Hùng (2005), "Bài giảng mô phôi học thuỷ sản",
NXB Nơng nghiệp thành phớ Hờ Chí Minh, tr. 47-49.
4. Nguyễn Hữu Hùng (2001), "Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản cá Chẽm mõm nhọn Psammoperca waigiensis Cuvier & Valencienes, 1828 tại Khánh Hòa", Luận văn thạc sĩ, Đại học Thủy sản, Nha Trang.
5. Phạm Quốc Hùng (2010), "Nghiên cứu sự biến động hàm lượng hormon steroid sinh dục và sinh sản trong huyết tương cá chẽm mõm nhọn (Psammoperca
waigiensis Cuvier, 1828) ở điều kiện nuôi vỗ", Luận án tiến sĩ nông nghiệp, trường Đại học Nha Trang, tr. 38-39.
6. Bùi Lai, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Quang Long và Mai Đình Yên (1985), "Cơ sở sinh lý, sinh thái cá", Nhà xuất bản Nông Nghiệp.
7. Nguyễn Trọng Nho và Lục Minh Diệp (2003), "Nghiên cứu sản xuất giống nhân tạo cá Chẽm Mõm Nhọn Psammoperca waigiensis (Cuvier và Valenciennes,
1828), 2003", Hợp phần nghiên cứu khoa học và phát triển công nghệ giữa trường
Đại Học Thủy Sản với Ban quản lý hợp phần SUMA, Bộ Thủy Sản.
8. Nguyễn Thị Hồng Nhung (2013), "Nghiên cứu đánh giá chất lượng tinh trùng và ảnh hưởng của một số yếu tố lên hoạt lực tinh trùng cá chẽm mõm nhọn
Psammoperca wagiensis", Luận văn thạc sĩ, Đại học Thủy sản, Nha Trang.
9. Nguyễn Hữu Phụng và Đỗ Thị Như Nhung (1995), "Danh mục cá biển Việt Nam, tập 3", Nhà xuất bản Khoa học & Kỹ thuật., Hà Nội.
10. Võ Ngọc Thám (1985), "Điều tra một số đặc điểm sinh học sinh sản của cá Chẽm
Lates calcarifer Bloch ở đầm Nha Phu, Khánh Hòa", Luận văn thạc sĩ, Đại học Thủy sản, Nha Trang.
11. Nguyễn Minh Thành, Trịnh Quốc Trọng, Hoàng Quang Bảo và Nguyễn Thị Hồng Vân (2003), "Bảo quản tinh cá Tra Pangasianodon hypophthalamus dài hạn bằng nitơ lỏng", Viện nghiên cứu nuôi trồng Thuỷ sản II (RIA2).
12. Nguyễn Nhật Thi (1991), "Cá biển Việt Nam - cá xương vịnh Bắc Bộ", Nhà xuất
bản Khoa học & Kỹ thuật.
13. Nguyễn Văn Tính (2006), "Báo cáo tốt nghiệp Nghiên cứu bảo quản tinh trùng cá Trê đen (Clarias fuscus, Lacepede 1803) trong tủ lạnh và nitơ lỏng", Truờng Đại
học Nha Trang.
14. Dương Tuấn (1981), "Sinh lý học động vật và cá", Đại học Hải Sản.
Tài liệu tiếng Anh
15. Aas, G.H., Terje, R. and Bjarne, G. (1991), "Evaluation of milt quality of Atlantic salmon", Aquaculture, Elsevier Science, pp. 125-132.
16. Akbar, S. and Zakimin, T. H. (2005 ), "Mass seed production of sand sea bass
Psammoperca waiginensis at the Regional Center for Mariculture Development
RCMD in Batam, Indonesia", Asia-Pacific Marine Finfish Aquaculture Network NACA. 10(2).
17. Alavi, S.H.M. and J., Cosson (2006), "Sperm motility in fishes. (II) Effects of ions and osmolality: A review", Cell Biology International, pp. 1-14.
18. Alavi, S.M.H. and Cosson, J. (2005), "Sperm motility and fertilizing ability in the Persian sturgeon (Acipenser persicus)", Aquaculture Research. 36, pp. 841 - 850. 19. Alavi, S.M.H., Cosson, J., Karami, M. and Pourkazemi, M. (2007), "Seminal
plasma composition in Acipenser Persicus: effect of stripping frequency on ionic
content and osmolality", Iranian journal of natural resources. 59(4), pp. 865-874. 20. Alavi, S.M.H., Karami, M., Hossein, A. and Amiri, B.M. (2004), "Chemical
composition and osmolality of seminal fluid of Acipenser persicus; their
physiological relationship with sperm motility", Aquaculture Research.
21. Alavi, S.M.H., Rodina, D.G.M. and Linhart, O. (2011), "Roles of osmolality, calcium -Potassium antagonist and calcium in activation and flagellar beating
pattern of sturgeon sperm", Comparative Biochemistry and Physiology. 160(2),
pp. 166-174.
22. Alavi, S.M.H., Rodina, M., Policar, T., Kozak, P., Psenicka, M. and Linhart, O. (2007), "Semen of Perca fluviatilis L.: Sperm volume and density, seminal plasma indices and effects of dilution ratio, ions and osmolality on sperm motility",
Theriogenology. 68(2), pp. 276-283.
23. Aral, F., Şahinöz, E. and Dogu, Z. (2007), "A Study on the Milt Quality of
Oncorhynchus mykiss (Walbaum, 1972) and Carasobarbus luteus (Heckel, 1843)
in Atatürk Dam Lake, Southeastern Turkey", Turkish Journal of Fisheries and Aquatic Sciences.
24. Babiak, I. (2009), "Cryopreservation of Atlantic halibut sperm, Hippoglossus hippoglossus", in Cabrita, E., Robles, V., and Herraez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC Press, pp. 433-
435.
25. Babiak, I., Glogowski, J., Luezynski, M. J., Luenzynski, M. and Demianowiez, W. (1999), "The effect of egg yolk, low density lipoprotein, methylxanthines and fertilization diluent on cryopreservation efficiency of Northern pike (Esox lucius) spermatozoa", Theriogenology. 52, pp. 473-479.
26. Baynes, S.M. and Scott, A.P. (1987), "Cryopreservation of Rainbow Trout Spermatozoa: The Influence of Sperm Quality, Egg Quality and Extender Composition on Post-Thaw Fertility", Aquaculture. 66, pp. 53 - 67.
27. Billard, R. (1992), "Reproduction in rainbow trout: sex differentiation, dynamics of gametogenesis, biology and preservation of gametes", Aquaculture. 100, pp.
263 - 298.
28. Billard, R. (2000), "Biology and control of reproduction of sturgeons in fish farm",
Iranian Journal of Fisheries Sciences. 2(2), pp. 1-20.
29. Billard, R. and Cosson, M.P. (1992), "Some problems related to the assessment of sperm motility in freshwater fish", Zool, J. Exp. 216, pp. 122-131.
30. Blaxter, J.H.S. (1953), "Sperm storage and cross-fertilization of spring and autumn spawning herring", Nature. 172, pp. 1189 -1190.
31. Borges, A.D.R.S., Follmann, J.D., Zanini, R., Amaral, F., Grillo, M.L., Rosana, O.E. and Federico, W.G. (2005), "Composition of Seminal Plasma and Annual Variations in Semen Characteristics of Jundiá Rhamdia quelen (Quoy and Gaimard, Pimelodidae)", Biochemical Fish Physiology and Biochemistry. 31(1),
pp. 45-53.
32. Bozkurt, Y., Gretmen, F., Kokcu, O. and Erỗin, U. (2011), "Relationships between seminal plasma composition and sperm quality parameters of the Salmo trutta macrostigma (Dumeril, 1858) semen: with emphasis on sperm motility", Czech J. Anim. Sci. 56(8), pp. 355-364.
33. Cabrita, E., Robles, V., Alvarez, R. and Herraez, M.P. (2001), "Cryopreservation of rainbow trout sperm in large volume straws: application to large scale fertilization", Aquaculture. 201, pp. 301 - 314.
34. Cabrita, E., Robles, V. and Heraez, P. (2009), "Sperm Quality Assessment", pp. 94-130.
35. Cabrita, E., Robles, V. and Herraez, P. (2009), "Methods in reproductive aquaculture marine and freshwater species".
36. Cabrita, E., Robles, V., Sarasquete, C. and Herraez, P. (2009), "Sperm Cryopreservation from the Marine Teleost, Sparus aurata", in Cabrita, E., Robles, V., and Herraez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC Press, pp. 447-451.
37. Chang, Y.J. (2001), "Milt preservation and juvenile production from cryopreseved sperm in flatfish", Ph.D thesis, Pukyong National University, Korea (216 p). 38. Chao, N. H. (1991), "Fish sperm cryopreservation in Taiwan: Technology
advancement and extention efforts. International Symposium on Reproductive Biology in Aquaculture", Taipei: Department of Aquaculture, Taiwan Fisheriesv Research Institute.
39. Chao, N. H. (1996), "Cryopreservation of finfish and shellfish sperms", Taiwan Fisheries Research. 4, pp. 157-170.
40. Chao, N. H., Chao, W. C., Liu, K. C. and Liao, I. C. (1987), "The properties of tilapia sperm and its cryopreservation", Journal of Fish Biology. 30, pp. 107-118. 41. Chao, N.H. , Chao, W.C. , Liu, K.C. and Liao, I.C. (1986), "The biological
properties of black porgy (Acanthopagrus schlegeli) sperm and its cryopreservation", Proc Natl Sci Counc, B. ROC. 10, pp. 145-149.
42. Chao, N.H. and Liao, I.C. (2001), "Cryopreservation of finfish and shellfish gametes and embryos", Aquaculture. 197, pp. 161-189.
43. Chen, S.L., Ji, X.S. and Tian, Y.S. (2009), "Sperm cryopreservation from sea perch, Lateolabrax japonicus", in Cabrita, E., Robles, V., and Herraez, P., Editors,
Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC
Press, pp. 357-360.
44. Chen, S.L. and Tian, Y.S. (2005), "Cryopreservation of flounder Paralichthys olivaceus embryos by vitrification", Theriogenology. 63, pp. 1207-1219.
45. Ciereszko, A., Ramseyer, L. and Dabroski, K. (1993), "Crypreservation of yellow perch semen", Progressive Fish-Culturist, American Fisheries Society. 55, pp.
261-264.
46. Cloud, J. and Patton, S. (2009), "Basic principles of fish spermatozoa cryopreservation", in Cabrita., E., Robles., V., and Herráez., P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC Press Taylor,
pp. 237 - 249.
47. Erin, W.F., Ian, A., Butts, E., Mariola, S., Cierszko, A. and Trevor, E.P. (2012), "Reproductive investment patterns, sperm characteristics, and seminal plasma physiology in alternative reproductive tactics of Chinook salmon (Oncorhynchus
tshawytscha)", Biological Journal of the Linnean Society.
48. Fan, B., Liu, X.C., Meng, Z.N., Tan, B.H., Wang, L., Zhang, H.F., Zhang, Y., Wang, Y.X. and Lin, H.R. (2014), "Cryopreservation of giant grouper Epinephelus
lanceolatus (Bloch, 1790) sperm", Journal of Applied Ichthyology. 30, pp. 334-
339.
49. Fauvel, C., Savoye, O., Dreanno, C., Cosson, J. and Suquet, M. (1999), "Characteristics of sperm of captive seabass in relation to its fertilization potential", Journal of Fish Biology. 54(2), pp. 356-369.
50. Fauvel, C. and Suquet, M. (2009), "Sperm cryopreservation: an actual tool for Seabass (Dicentrarchus labrax) reproduction and breeding control in research and production", in Cabrita, E., Robles, V., and Herraez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC Press, pp. 437-
441.
51. Ferguson-Smith, M.A. and Handmaker, S.D. (1961), "Observations on the satellited human chromosomes", Lancet. 1, pp. 638 - 640.
52. Flannery, E.W., Butts, I.A.E., Siowinska, M., Ciereszko, I. and Pitcher, T. (2012), "Reproductive investment patterns, sperm characteristics, and seminal plasma physiology in alternative reproductive tactics of Chinook salmon (Oncorhynchus
tshawytscha)", Biological Journal of the Linnean Society.
53. Franỗois, C.L.Z., Sebastiano, V. and Joan, C. (2010), "Aquaporins and teleost spermatogenesis: insights into their physiological roles and potential use for sperm cryopreservation", The Spanish Ministry of Science and Innovation.
54. Gallant, R. K., Richardson, G. F. and McNiven, M. A. (1993), "Comparison of different extender for the cryopreservation of Atlantic salmon spermatozoa",
Theriogenology. 40, pp. 479-486.
55. Golpour, A.M.I. and Hosseini, S.A. (2011), "Changes in Ionic Ratios of Seminal Plasma and its Effect on Sperm Characteristics in Caspian Roach (Rutilus rutilus
caspicus) During Spawning Migration", Fisheries and Aquaculture Journal. 17.
56. Gwo, J.C. (1993), "Cryopreservation of black grouper (Epinephelus malabaricus) spermatozoa", Theriogenolgy. 39, pp. 1331 - 1342.
57. Gwo, J.C. (2009), "Cryopreservation of seabream semen", in Cabrita, E., Robles, V., and Herraez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC Press, pp. 453-457.
58. Gwo, J.C. and Ohta, H. (2009), "Cryopreservation of grouper semen", in Cabrita, E., Robles, V., and Herraez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species, CRC Press, pp. 469-474.
59. Hajirezaee, S., Amiri, B.M. and Alireza, M. (2010), "Fish milt quality and major factors influencing the milt quality parameters: A review", African Journal of Biotechnology. 9(54), pp. 9148-9154.
60. Harald, B.T., Tillmann, T., Benfey, J., Deborah, J., Robichaud, M. and Power, J. (2001), "The relationship between sperm density, spermatocrit, sperm motility and fertilization success in Atlantic halibut, Hippoglossus hippoglossus", Aquaculture. 194, pp. 191-200.
61. Harvey, B. (1983), "Cryopreservation of Sarotherodon mossambicous
spermatozoa", Aquaculture. 32, pp. 313-320.
62. Horváth, A., Miskolczi, E., Mihalffy, S., Osz, K., Szabo, K. and Urbanyi, B. (2007), "Cryopreservation of common carp (Cyprinus carpio) sperm in 1.2 and 5 ml straws and occurrence of haploids among larvae produced with cryopreserved sperm", Cryobiology. 54, pp. 251 - 257.
63. Horváth, A., Miskolczi, E. and Urbányi, B. (2003), "Cryopreservation of common carp sperm", Aquatic Living Resources. 16, pp. 457 - 460.
64. Horváth, A. and Urbanyi, B. (2000), "The effect of cryoprectants on the motility and fertilizing capacity of cryopreserved African catfish Clarias gariepinus
(Burchell 1822) sperm", Aquac Res.
65. Horváth, Á., Urbányi, B. and Mims, S.D. (2009), "Cryopreservation of sperm from species of the order Acipenseriformes", in Cabrita, E., Robles, V., and Heraez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculuture Marine and Freshwater Species, CRC Press.
66. Irawan, H., Vuthiphandchai, V. and Nimrat, S. (2010), "The effect of extenders, cryoprotectants and cryopreservation methods on common carp (Cyprinus carpio) sperm", Animal Reproduction Science. 122, pp. 236-243.
67. Islam, M.S. and Akhter, T. (2011), "Tale of Fish Sperm and Factors Affecting Sperm Motility: A Review", Advances in Life Sciences. 1(1), pp. 11-19.
68. Kazuo, I.C.D. and Cosson, J. (2003), "Control of Flatfish Sperm Motility by CO2 and Carbonic Anhydrase", Cell Motility and the Cytoskeleton. 55, pp. 174-187. 69. Kopeika, J., Kopeika, E., Zhang, T. and Rawson, D. (2009), "Cryopreservation of
spem of loach (Misgurnus fossilis)", in Cabrita, E., Robles, V., and Herráez, P., Editors, Methods in Reproductive Aquaculture Marine and Freshwater Species,
CRC Press.
70. Kurokura, H., Hirano, R., Tomita, M. and Iwahashi, M. (1984), "Cryopreservation of carp sperm", Aquaculture. 37, pp. 267 - 273.
71. Lahnsteiner, F., Berger, B., Horvath, A., Weismann, T. and Patzner, R. (1996), "The influence of various cryoprotectants on semen quality of the rainbow trout (Ochorhynchus mykiss) before and after cryopreservation", Journal of Applied Ichthyology. 12, pp. 99-106.
72. Lahnsteiner, F., Mansour, N. and Weismann, T. (2002), "Cryopreservation of spermatozoa of the burbot Lota lota", Cryobiology. 45, pp. 195-203.
73. Lahnsteiner, F. and Patzner, R.A. (1998), "Sperm motility of the marine teleosts
Boops boops, Diplodus sargus, Mullus barbatus and Trachurus mediterraneus", Journal of Fish Biology. 52(4), pp. 726-742.
74. Lahnsteiner, F., Weismand, T. and Patzner, R. (1997), "Sperm motility and seminal fluid composition in the burbot, Lota lota", Blackwell Wissenschafts- VerlaE, Berli, pp. 113-119.
75. Le, M.H., Lim, H.K., Min, B.H., Park, M.W. and Chang, Y.J. (2011), "Semen cryopreservation of yellow croaker Larimichthys polyactis", Rev Fish Biol Fisheries. 21, pp. 789 - 797.
76. Legendre, M. and Billard, R. (1980), "Cryopreservation of rainbow trout sperm by deep-freezing", Reprod Nutr Dev. 20, pp. 1859-1868.
77. Legendre, M., Linhart, O. and Billard, R. (1996), "Spawning and management of gametes, fertilized eggs and embryos in Siluroidei", Aquat. Liv. Res. 9, pp. 59-80. 78. Lim, H.K. and Le, M.H. (2013), "Evaluation of extenders and cryoprotectants on
motility and morphology of longtooth grouper (Epinephelus bruneus) sperm",
Theriogenology.
79. Linhart, O., Mims, S.D., Gomelsky, B., Hiott, A.E., Shelton, W.L., Cosson, J., Rodina, M., David, G. and Bastl, J. (2003), "Ionic composition and osmolality of paddlefish (Polyodon spathula, Acipenseriformes) seminal fluid", Aquaculture International. 11(4), pp. 357-368.
80. Linhart, O., Rodinaa, M. and Cosson, J. (2000), "Cryopreservation of Sperm in Common Carp Cyprinus carpio: Sperm Motility and Hatching Success of
Embryos", Cryobiology. 41, pp. 241 - 250.
81. Magyary, I., Urbanyi, B. and Horvath, L. (1996), "Cryopreservation of common carp (Cyprinuscarpio L.) sperm II.Optimal conditions for fertilization",
J.Appl.Ich-thyol. 12, pp. 117-119.
82. Mazur, P. (1984), "Freezing of living cells: Mechanisms and implications", Amer
J Physiol.
83. Mazur, P. (2004), "Principles of cryobiology", in Fuller, B., Lane, N., and Benson, E., Editors, Life in the Frozen State, CRC Press, Boca Raton.
84. McAndrew, B.J. (2000), "Evolution, phylogenetic relationships and biogeography", in Beveridge, M.C.M. and McAndrew, B.J., Editors, Tilapias: Biology and Exploitation, Kluwer Academic, Dordrecht, pp. 1 - 32.
85. Moczaski, M. (1976), "Cryobiological factors in grass carp preservation", Pro. Int.
Congr. Amin. Reprod. Artif. Insemin. 4, pp. 1030 - 1033.
86. Morisawa, M., Morisawa, S., Shimizu, H. and Yasuda, K. (1983), "Effects of osmolality and potassium on motility of spermatozoa from freshwater cyprinid fishes", J. exp. Bio. 107, pp. 95-103.
87. Morisawa, M., Suzuki, K. and Morisawa, S. (1983), "Effects of potassium and osmolality on spermatozoa motility of salmonid fishes", J Exp Biol. 107, pp. 105- 113.
88. Muchlisin, Z.A. (2005), "Review: Current Status of Extenders and Cryoprotectants on Fish Spermatozoa Cryopreservation", Biodiversitas. 6.
89. Noveiri, S.B., Alipour, A. and Pourkazemi, M. (2006), "Sperm morphometry, density and spermatocrit study in Persian sturgeon (Acipenser persicus)", J. Appl.