(Bằng phƣơng phỏp trắc quang với thuốc thử Nessler).
2.3.1. Khảo sỏt cỏc điều kiện tối ƣu
2.3.1.1. Nghiờn cứu ảnh hưởng của pH đến phản ứng tạo phức màu
Chuẩn bị 13 bỡnh định mức 50ml, hỳt vào mỗi bỡnh 10ml dung dịch NH4Cl làm việc (10mg NH4+-N /l). Thờm vào mỗi bỡnh ~ 10ml nƣớc cất và 2ml thuốc thử Nessler và điều chỉnh pH trong cỏc bỡnh ở cỏc giỏ trị khỏc nhau trong khoảng từ 11,30 13,70, lắc kỹ, định mức tới vạch. Đợi màu phỏt triển ổn định, đo mật độ quang của loạt dung dịch màu trờn mỏy UV-Vis Biochrom Ltd ở bƣớc súng lớ thuyết 400 425nm. Từ đú tỡm đƣợc giỏ trị mật độ quang A lớn và ổn định nhất ứng với khoảng pH tối ƣu.
2.3.1.2. Nghiờn cứu độ bền của phức màu NH4 +
- Nessler theo thời gian
Chuẩn bị một dung dịch màu bằng cỏch: Hỳt 6 ml dung dịch NH4Cl làm việc (10mg NH4+-N /l) cho vào bỡnh định mức 50ml. Thờm ~10ml nƣớc cất và 2ml thuốc thử Nessler, lắc kỹ, định mức tới vạch. Đo mật độ quang trờn mỏy UV-Vis Biochrom Ltd tại bƣớc súng lớ thuyết 400 425nm trong khoảng thời gian từ 5 90 phỳt. Từ đú tỡm đƣợc khoảng thời gian tối ƣu ứng giỏ trị mật độ quang ổn định và lớn nhất.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
2.3.2. Đo phổ hấp thụ electron của dung dịch màu
- Chuẩn bị một dung dịch màu (cú nồng độ 1,80 mg NH4+ -N/l) ở cỏc điều kiện tối ƣu đó chọn, quột phổ của dung dịch màu trong dải bƣớc súng từ 300 500 nm, từ đú ta chọn đƣợc giỏ trị max ứng với trị số Amax.
- Tƣợng tự nhƣ trờn, ta chuẩn bị một loạt dung dịch màu ở cỏc nồng độ từ 0,60 1,80 mg NH4+ -N/l, quột phổ của loạt dung dịch màu trờn mỏy trong khoảng bƣớc súng từ 300 500nm, so sỏnh cỏc giỏ trị max của cỏc phổ ở cỏc nồng độ khỏc nhau. Nếu chỳng cú cực đại hấp thụ ở cựng một bƣớc súng, chứng tỏ hợp chất màu bền, ổn định và cú thành phần cỏc cấu tử trong phản ứng đỳng bằng quan hệ tỉ lƣợng. Đú là bƣớc súng thực nghiệm tối ƣu, đƣợc sử dụng cho cỏc phộp đo [13]-tr. 25.
2.3.3. Xõy dựng đƣờng chuẩn xỏc định hàm lƣợng N
Chuẩn bị một dóy dung dịch màu chuẩn trong cỏc bỡnh định mức 50ml cú khoảng nồng độ từ 0,20 2,00 mgNH4
+
- N/l , ở cỏc điều kiện tối ƣu đó chọn. Đo quang của loạt dung dịch màu trờn mỏy UV-Vis Biochrom Ltd tại giỏ trị bƣớc súng tối ƣu max, đƣờng chuẩn sẽ tự động thiết lập. Dung dịch nền đƣợc chuẩn bị tƣơng tự, nhƣng khụng chứa amoni.
2.3.4. Đỏnh giỏ độ tin cậy của đƣờng chuẩn xỏc định N
Chuẩn bị một số dung dịch amoni đó biết chớnh xỏc nồng độ (nằm trong khoảng tuyến tớnh của đƣờng chuẩn). Tiến hành tạo phản ứng màu nhƣ khi xõy dựng đƣờng chuẩn và xỏc định lại nồng độ theo đƣờng chuẩn. Lặp lại phộp đo nhiều lần và xử lớ kết qủa đo bằng thống kờ toỏn học [28,65].
2.4. PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ DO VÀ COD 2.4.1. Xỏc định chỉ số DO 2.4.1. Xỏc định chỉ số DO
2.4.1.1. Cố định oxi
- Dựng xiphụng chuyển mẫu nƣớc vào đầy chai cố định oxi, trỏnh sục bọt, đầu xiphụng để sỏt đỏy chai, trong khi chai đầy dần thỡ từ từ rỳt lờn và tiếp tục cho chảy tràn khoảng 100ml.
- Dựng pipet thờm vào chai 1ml dung dịch A, Dựng pipet khỏc thờm vào chai 1ml dung dịch B. Khi thờm, đầu pipet để ở giữa chai, vừa cho dung dịch vào chai vừa rỳt pipet lờn. Đậy nỳt cẩn thận trỏnh bọt khớ. Lắc trộn chai nhiều
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
lần rồi để yờn cho kết tủa lắng xuống. Bảo quản chai chỗ tối và mỏt cho đến khi phõn tớch tiếp. Nhƣ vậy ta chỉ cố định V – 2 ml mẫu.
2.4.1.2. Axit húa và chuẩn độ
- Dựng pipet thờm vào chai mẫu đó cố định oxi 2ml axit sunfuric đặc, để đầu pipet sỏt lớp kết tủa, vừa cho axit chảy vừa rỳt dần pipet lờn. Phần chất lỏng trong suốt phớa trờn chảy tràn ra ngoài khụng ảnh hƣởng đến kết quả phõn tớch. Đậy nỳt chai và lắc kỹ cho đến khi kết tủa tan hoàn toàn.
- Lấy chớnh xỏc Vo ml dung dịch trong chai mẫu đó axit húa, chuyển vào bỡnh erlen dung tớch 250ml, chuẩn độ bằng dung dịch natrithiosunfat 0,02M đến màu vàng nhạt. Thờm 1ml dung dịch hồ tinh bột và chuẩn độ tiếp đến vừa mất màu (khụng quan tõm đến việc trở lại màu). Cú thể lấy Vo = 20 ữ 150ml.
2.4.1.3. Cụng thức tớnh kết quả
Nồng độ oxi hũa tan đƣợc tớnh theo cụng thức CT1: 32 / 4 .1000.V . . 2 TD o N V DO V V (mgO2/l) CT1 Trong đú:
32/4: là đƣơng lƣợng của oxi trong phản ứng.
VTĐ, N: là thể tớch (ml) và nồng độ của dung dịch chuẩn natrithiosunfat. V: Thể tớch chai cố định oxi (ml).
2: là thể tớch mẫu bị tràn ra ngoài do thờm cỏc dung dịch cố định oxi. V – 2: là thể tớch mẫu thực tế đƣợc cố định oxi. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
2.4.2. Xỏc định chỉ số COD
2.4.2.1. Cỏch tiến hành
- Lấy V = 50ml mẫu phõn tớch (nếu mẫu cú chỉ số COD > 900mg/l, cú thể lấy thể tớch mẫu nhỏ hơn và thờm nƣớc cất tới 50ml), chuyển vào bỡnh cầu dung tớch 500ml. Thờm 1g HgSO4 và vài viờn đỏ bọt, thờm từ từ 5ml H2SO4 (cú Ag2SO4), lắc nhẹ để HgSO4 tan hoàn toàn, cần làm lạnh trong khi lắc để trỏnh phản ứng mất chất hữu cơ. Thờm tiếp 25,00ml dung dịch K2Cr2O7 0,0417M và lắc đều. Lắp ống sinh hàn và cho nƣớc lạnh chảy. Thờm tiếp 70ml H2SO4 (cú Ag2SO4) cũn lại qua đầu mở của ống sinh hàn, lắc kĩ và đều. Đun hồi lƣu hỗn hợp trong 2 giờ, để nguội và dựng nƣớc cất để trỏng rửa ống sinh hàn chảy xuống bỡnh cầu.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Thỏo ống sinh hàn và pha loóng gấp đụi hỗn hợp trong bỡnh bằng nƣớc cất. Để nguội tới nhiệt độ phũng, thờm 2-3 giọt chỉ thị Feroin, và chuẩn độ bằng dung dịch muối Mo cú nồng độ 0,25M đến khi chuyển màu từ xanh sang màu đỏ nõu. Thu đƣợc VTĐ1.
- Làm tƣơng tự với mẫu trắng, thay 50,00ml mẫu phõn tớch bằng 50,00ml nƣớc cất, và cũng chuẩn độ bằng dung dịch muối Mo cú nồng độ 0,0417M đến khi chuyển màu từ xanh sang màu nõu đỏ. Thu đƣợc VTĐ2.
Chỳ ý: Đối với cỏc mẫu phõn tớch cú chỉ số COD <50mg/l, ta cũng tiến hành tƣơng tự nhƣ trờn, nhƣng thay bằng dung dịch K2Cr2O7 0,00417M, và chuẩn độ bằng dung dịch muối Mo cú nồng độ 0,025M.
2.4.2.2. Cụng thức tớnh toỏn kết quả Chỉ số COD đƣợc tớnh theo cụng thức CT2: 32 / 4 .1000.C . M VTD2 VTD1 COD V (mgO2/l) CT2
Trong đú: 32/4: là đƣơng lƣợng của oxi trong phản ứng. CM: là nồng độ của dung dịch muối Mo (mol/l).
V: Thể tớch mẫu phõn tớch = Thể tớch mẫu trắng (ml).
VTĐ1: là thể tớch dung dịch muối Mo chuẩn độ mẫu phõn tớch. VTĐ2: là thể tớch dung dịch muối Mo chuẩn độ mẫu trắng.
2.5. ĐỐI TƢỢNG NGHIấN CỨU VÀ VỊ TRÍ LẤY MẪU 2.5.1. Đối tƣợng nghiờn cứu 2.5.1. Đối tƣợng nghiờn cứu
1. Bói chứa nƣớc thải làng nghề giết mổ gia sỳc Phỳc Lõm, huyện Việt Yờn, tỉnh Bắc Giang.
Tỡnh hỡnh ụ nhiễm tại là nghề giết mổ gia sỳc:
Mọi hoạt động giết mổ của làng nghề Phỳc Lõm chỉ diễn ra vào ban đờm từ 11h đờm hụm trƣớc đến 4h sỏng hụm sau, giết mổ nhiều tập trung vào mựa đụng từ thỏng 10 năm trƣớc đến thỏng 3 năm sau. Với hơn 30 lũ mổ hoạt động thƣờng xuyờn lỳc cao điểm lờn tới 50 lũ mổ. Mỗi ngày cỏc ao hồ xung quanh Phỳc Lõm tiếp nhận khoảng 100m3 nƣớc thải cộng với 200 đến 300kg chất thải khụng qua xử lý. Điều nguy hiểm là tất cả cỏc hộ này dều khụng cú hệ thống xử lý, nƣớc thải đổ trực tiếp ra đồng ruộng, kờnh rạch, ao hồ, sau đú ứ đọng lại trong cỏc cống rónh, ao hồ gõy mựi hụi thối nồng nặc. Do địa hỡnh ở Phỳc Lõm
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
thấp, hệ thống kờnh rạch, ao hồ hẹp, khả năng thoỏt nƣớc kộm nờn nƣớc thải cứ ứ đọng lại khiến cho mụi trƣờng ngày càng ụ nhiễm nghiờm trọng hơn. Hầu hết cỏc ao, hồ ở Phỳc Lõm đó trở thành những ao, hồ ―chết‖. Những đống da, xƣơng trõu bũ để lõu ngày bốc mựi xỳ uế, ụ nhiễm khụng khớ, nhất là vào mựa khụ. Nƣớc thải đó làm nƣớc ở nhiều ao hồ đen ngũm, ụ nhiễm đến mức khụng thể thả cỏ đƣợc vỡ cỏ bị chết.
Hỡnh 2.1. Một phần của bói nước thải
2. Bốo tõy (Eichornia Crassipes Solms)
Bốo tõy thuộc họ lục bỡnh (Pontederiaceae), cũn gọi là bốo sen, bốo Nhật Bản, hoặc bốo lục bỡnh, [9]-274, [14] - tr. 580, [15] - tr. 170. Bốo tõy cú nguồn gốc ở Nhật Bản đƣợc nhập nội vào nƣớc ta từ thế kỷ XX, cú tài liệu cho rằng bốo tõy cú nguồn gốc từ Braxin, vào nƣớc ta từ năm 1902 [14].
Đặc tớnh: là thực vật thõn cỏ, sống nổi trờn mặt nƣớc, sinh trƣởng nhanh, sản lƣợng cao thớch hợp với khớ hậu nhiệt đới. Bốo tõy cú thể sinh trƣởng tốt trong khoảng to
=10 40oC, tốt nhất to
= 20 30oC. ở miền bắc Việt Nam, bốo tõy sống quanh năm, phỏt triển mạnh nhất từ thỏng 4 10. Nhƣ vậy, thời gian sinh trƣởng của bốo trong một năm là từ 7 8 thỏng. Bốo tõy là loại bốo dễ tớnh, ăn phàm sống
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
đƣợc ở bất cứ ao, hồ nào nhƣng phỏt triển rất mạnh ở cỏc hồ ao nƣớc lặng và nhiều dinh dƣỡng. Ở nƣớc ta, trong thực tế đó cú những vựng chỉ cần thả một đỏm bốo nhỏ và chỉ trong một thời gian ngắn, bốo đó phỏt triển lan rộng khắp cỏc ao, hồ và lấn ỏp cỏc thực vật thủy sinh khỏc. Mỗi gốc bốo bỡnh quõn phỏt triển thành trờn 140 gốc. Bốo tõy đƣợc bà con sử dụng làm thức ăn cho gia sỳc và làm phõn xanh để bún ruộng [14,15]. 2.5.2. Vị trớ lấy mẫu M1 M2 M3 M5 M7 M8 M10 M9 M6 M4 Vùng ngâm da trâu bò Vùng ngâm x-ơng trâu bò
Hỡnh 2.2. Sơ đồ vị trớ lấy mẫu nước thải
- Mẫu 1 (M1): Tại cửa xả nƣớc thải của một lũ giết mổ gia sỳc. - Mẫu 2 (M2): Tại cống dẫn nƣớc thải trong làng.
- Mẫu 3 (M3): Tại cửa cống đầu làng.
- Mẫu 4 (M4): Tại đoạn giữa của cống dẫn nƣớc thải (từ đầu làng đến ao làng).
- Mẫu 5 (M5): Tại ven bờ ao làng. - Mẫu 6 (M6): Tại vị trớ giữa ao làng. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Mẫu 7 (M7): Tại vũng ven bờ ao làng nơi cú ngõm da trõu bũ. - Mẫu 8 (M8): Tại vị trớ giữa vũng nơi cú ngõm da trõu bũ.
- Mẫu 9 (M9): Tại vũng ven bờ ao làng nơi cú ngõm xƣơng trõu bũ. - Mẫu 10 (M10): Tại vị trớ giữa vũng ngõm xƣơng trõu bũ.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
2.5.3. Lấy mẫu và bảo quản mẫu 1. Lấy mẫu 1. Lấy mẫu
Tiến hành theo cỏc tiờu chuẩn:
- TCVN 5992:1995 (ISO 5667-2: 1991) - Chất lƣợng nƣớc- Lấy mẫu. Hƣớng dẫn kỹ thuật lấy mẫu.
- TCVN 6000:1995 (ISO 5667-11: 1992) Chất lƣợng nƣớc- Lấy mẫu. Hƣớng dẫn lấy mẫu nƣớc ngầm).
Mỗi đợt thớ nghiệm lấy 10 mẫu. Cỏc mẫu nƣớc thải đƣợc lấy trực tiếp từ cỏc vị trớ đó chọn, cho vào bỡnh nhựa polietylen dung tớch 500ml và 1000ml đó đƣợc xử lớ sạch bằng axit HNO3 và HCl, rửa sạch và trỏng lại bằng chớnh nƣớc thải tại vị trớ lấy mẫu.
Hỡnh 2.3. Mẫu nước thải được chứa trong chai polietilen
2. Bảo quản mẫu
Cỏc mẫu lấy về phũng thớ nghiệm cần đƣợc phõn tớch ngay trong ngày, đối với cỏc mẫu chƣa thể phõn tớch ngay đƣợc bảo quản lạnh ở ~50
C, nhằm hạn chế sự hoạt động của vi sinh vật.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
2.6. PHÂN TÍCH MẪU NƢỚC THẢI
2.6.1. Phõn tớch mẫu xỏc định nồng độ photphat
Khi xỏc định nồng độ octophotphat, cần phải lọc mẫu nƣớc bằng giấy lọc, hoặc bằng màng lọc 0,45m để loại bỏ cỏc chất huyền phự lơ lửng. Đem phõn tớch ngay hoặc bảo quản lạnh.
- Lấy khoảng 500ml mẫu, lọc thu lấy khoảng 400 450ml. Dung dịch thu đƣợc, gọi là dung dịch phõn tớch X kớ hiệu là DDX.
- Hỳt voX = 5,00ml DDX cho vào bỡnh định mức 50ml, thờm ~ 35ml nƣớc cất, lắc đều. Thờm 1 giọt chỉ thị phenolphtalein, nếu xuất hiện màu hồng cần trung hoà bằng từng giọt dung dịch H2SO45N đến khi vừa mất màu. Thờm tiếp ~ 8,00ml dung dịch TNKH, lắc kỹ, định mức đến vạch. Đợi màu phỏt triển ổn định trong thời gian thớch hợp, xỏc định nồng độ photphat theo đƣờng chuẩn. Sử dụng mẫu trắng gồm tất cả cỏc tỏc nhõn trừ photphat. Nếu màu quỏ nhạt hoặc quỏ đậm, ta cần tăng hoặc giảm thể tớch DDXsao cho nồng độ photphat trong mẫu đo nằm trong khoảng tuyến tớnh của đƣờng chuẩn (phụ lục 2).
- Tớnh nồng độ PO43- -P trong mẫu gốc DDX theo cụng thức CT3:
50. o P X o X C C v CT3 Trong đú: o X C : nồng độ PO43-
-P trong dung dịch mẫu gốc DDX, (mg/l). 50: thể tớch trong bỡnh tạo phản ứng màu (ml).
CP: nồng độ trong dung dịch màu tớnh đƣợc nhờ đƣờng chuẩn (mg/l).
o X
v : Thể tớch DDX lấy để tạo phản ứng màu (ml).
2.6.2. Phõn tớch mẫu xỏc định hàm lƣợng P tổng
- Giai đoạn oxi húa mẫu:
Khi xỏc định hàm lƣợng P tổng, khụng đƣợc lọc mẫu nƣớc, phỏ mẫu oxi húa bằng phƣơng phỏp trỡnh bày ở mục 1.3.2:
Hỳt VP = 50ml mẫu nƣớc cho vào bỡnh Micro-kjeldahl dung tớch nhỏ khoảng 100 250ml, thờm vào 1ml H2SO4 đặc và 5ml HNO3 đặc. Đun trờn bếp cỏch cỏt và trong tủ hốt tới cũn thể tớch ~1ml, đun tiếp cho đến khi dung dịch trở
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
thành khụng màu để loại bỏ hoàn toàn axit HNO3. Để nguội, thờm 20ml nƣớc cất và 1 giọt (0,05ml) chỉ thị phenolphtalein, thờm dần dung dịch NaOH1M đến khi vừa xuất hiện màu hồng nhạt. Cú thể lọc để loại bỏ cỏc tỏc nhõn gõy đục, rửa kỹ bằng nƣớc cất, thu lấy dung dịch và định mức vào bỡnh VDM1 = 100ml (đƣợc mẫu đó oxi húa gọi là dung dịch định mức 1, kớ hiệu là DM1). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Giai đoạn xỏc định nồng độ PO4 3-
- P trong dung dịch DM1 bằng phƣơng phỏp trỡnh bày ở mục 2.6.1 để tớnh hàm lƣợng P tổng.
- Tớnh nồng độ P tổng trong mẫu nƣớc theo cụng thức CT4:
1 50. . . o P DM P o P P C V C v V CT4 Trong đú: o P C : nồng độ P tổng trong mẫu nƣớc (mg/l).
50: thể tớch trong bỡnh tạo phản ứng màu (ml).
CP: nồng độ P tổng trong dung dịch màu tớnh đƣợc nhờ đƣờng chuẩn (mg/l). VDM1: thể dung dịch DM1 chứa trong bỡnh định mức (ml).
o P
v : thể tớch DM1 lấy để tạo phản ứng màu (ml).
VP: thể tớch mẫu nƣớc đem phõn tớch (ml).
2.6.3. Phõn tớch mẫu xỏc định nồng độ NH4+
- Lấy khoảng 500ml mẫu, lọc để loại bỏ phần cặn lơ lửng khụng tan, thu đƣợc mẫu đó lọc gọi là dung dịch phõn tớch Y, kớ hiệu là DDY. Hỳt chớnh xỏc VY = 400ml dung dịch DDY, cho vào bỡnh Kjeldahl, thờm tỏc nhõn loại bỏ clo, điều chỉnh pH ~ 9,50 bằng dung dịch NaOH 1M, thờm tiếp 25ml dung dịch đệm borat. Cất lấy 300ml thu vào bỡnh erlen cú chứa 50ml dung dịch H3BO3 với tốc độ 6 8 ml/phỳt. Chuyển toàn bộ phần cất vào bỡnh định mức VDM2 = 500ml, thờm nƣớc cất đến vạch (gọi là dung dịch định mức 2, kớ hiệu là DM2).
- Hỳt vYo ml dung dịch DM2 cho vào bỡnh định mức 50ml, thờm ~10ml