Một số kỹ thuật ghi phổ trong đầu dò khối phổ ba tứ cực
+ Full Scan
Khi thao tác với chế độ full scan, đầu dò sẽ nhận được tất cả các mảnh ion để cho khối phổ toàn ion đối với tất cả các chất trong suốt q trình phân tích. Thường dùng để nhận danh hay phân tích khi chất phân tích có nồng độ đủ lớn. Đối với đầu dò khối phổ ba tứ cực, chế độ full scan thường được lựa chọn để khảo sát ion mẹ.
+ Selected Ion Monitoring (SIM)
Trong chế độ SIM, đầu dị MS chỉ ghi nhận tín hiệu một số mảnh ion đặc trưng cho chất cần xác định. Khối phổ SIM chỉ cho tín hiệu của các ion đã được lựa chọn trước đó, do vậy khơng thể dùng để nhận danh hay so sánh với các thư viện có sẵn. Đối với đầu dị khối phổ ba tứ cực, chế độ SIM thường được lựa chọn để khảo sát năng lượng phân mảnh khi đã biết ion mẹ.
+ Product ion: với kỹ thuật này các ion sẽ qua tứ cực thứ nhất để chọn ion của chất cần phân tích (thường là ion mẹ) rồi đi qua tứ cực thứ hai. Tại tứ cực thứ hai, ion mẹ sẽ đập thành nhiều ion con. Các ion này sẽ tiến thẳng đến đầu dò. Đầu dò sẽ cung cấp toàn bộ mảnh phổ của ion ban đầu.
+ SRM (Selected Reaction Monitoring): cô lập ion cần chọn (ion mẹ) ở tứ cực thứ nhất, phân mảnh ion cơ lập đó tại tứ cực thứ 2 (thực chất là buồng va chạm) thu được các ion con. Tại tứ cực thứ 3, cô lập 1 mảnh ion con cần quan tâm và đưa vào đầu dò để phát
hiện.
+ MRM (Multiple Reaction Monitoring): trên thực tế, do yêu cầu về mặt kỹ thuật đối với phân tích vi lượng nên các ion con cần quan tâm thường từ 2 trở lên, do vậy kỹ thuật ghi phổ MRM thông dụng hơn SRM. Kỹ thuật này tương tự SRM nhưng ở tứ cực thứ 3, cô lập 2 (hoặc nhiều) ion con cần quan tâm và đưa vào đầu dò để phát hiện.
1.5.8. Bộ phận ghi nhận tín hiệu
Bộ phận này ghi tín hiệu do đầu dị phát hiện.
Đối với các hệ thống HPLC hiện đại, phần này được phần mềm trong hệ thống ghi nhận, lưu các thông số, sắc ký đồ, các thơng số liên quan đến peak như tính đối xứng, hệ số phân giải… đồng thời tính tốn, xử lý các thơng số liên quan đến kết quả phân tích.
1.5.9. In dữ liệu
Sau khi phân tích xong, dữ liệu sẽ được in ra qua máy in kết nối với máy tính có cài phần mềm điều khiển.
2. KỸ THUẬT CHIẾT PHA RẮN (SOLID PHASE EXTRACTION: SPE)
Chiết pha rắn (SPE) là một phương pháp chuẩn bị mẫu để làm giàu và làm sạch mẫu phân tích từ dung dịch, bằng cách cho chất cần phân tích hấp phụ lên một cột pha rắn sau đó chất phân tích sẽ được rửa giải bằng dung mơi thích hợp. Cơ chế của quá trình lưu giữ bao gồm phân bố pha đảo, pha thường và trao đổi ion.
Ưu điểm của phương pháp SPE là khả năng làm giàu mẫu cao, giúp loại bỏ ảnh hưởng của các chất gây nhiễu, dễ thực hiện, tiết kiệm thời gian và giảm lượng dung môi sử dụng so với phương pháp chiết lỏng- lỏng.
Cột SPE có nhiều dạng nhưng loại thường sử dụng là những cột nhỏ có dạng thân ống tiêm, bên trong nhồi các pha tĩnh. Pha tĩnh nhồi vào cột chiếm bề dày cột khoảng 0,5- 2 cm, lượng sử dụng từ 100 mg đến 1 g, trong một số trường hợp có thể lên đến vài gram. Trong cột có 2 đĩa thuỷ tinh xốp giúp giữ chất tách không cho rơi theo dung môi để giữ cho cột ổn định. Cột SPE có 3 loại:
Loại chứa các pha tĩnh như C18, C8, C4, C2, cyclophenyl...là silic ghép các nhánh không phân cực dùng để tách các chất khơng phân cực hay ít phân cực. Loại chứa các chất tách như silica, florisil, amino alumina,... có ghép các
nhóm như –OH, -NH2, -CN dùng chủ yếu để tách các chất tương đốiphân cực. Phần lớn được sử dụng để tách chiết trong điều kiện pha thường (cột ghép –CN có thể sử dụng trong pha đảo).
Loại chứa nhựa trao đổi ion để tách các hợp chất ion (cột SAX tách anion, cột SCX tách cation).