BÀI 4: TRÍCH LY CURCUMIN TỪ CỦ NGHỆ VÀNG
4.2.2. Định tính sản phẩm bằng phương pháp sắc ký bản mỏng
Curcumin
Etanol Hồ tan
Chấm chất phân tích lên bản mỏng
Triển khai sắc ký 5 ml dung môi
Quan sát Để khô và dùng đèn UV Hiện màu sản phẩm Đánh giá
Dung mơi lên vạch trên
λ=365mm
- Định tính curcumin bằng sắc ký bản mỏng: Lấy một ít curcumin hịa tan
trong etanol, dùng ống mao quản chấm lên bản mỏng sắc ký, đợi cho etanol khơ hồn tồn sau đó cho vào bình sắc ký đã chứa 5 ml dung môi sắc ký với tỷ lệ đã cho sẵn, tiến hành đậy nắp bình sắc ký. Quan sát thấy dung mơi di chuyển lên đến vạch trên của bản mỏng thì lấy bản mỏng ra. Để khơ và dùng đèn UV (bước sóng 365 nm) phát hiện sản phẩm, dùng bút chì khoanh trịn các sản phẩm lại.
- Hiện màu sản phẩm: Bản mỏng sau khi đã soi UV đem nhúng vào dung dịch
hiện màu (Thuốc thử: 15 ml dung dịch acid boric 3% trộn với 5 ml dung dịch acid oxalic 10%).
- Chú ý: Khi chấm bản mỏng đường xuất phát phải cách mép dưới của
bản mỏng 1,5÷2 cm và cách bề mặt dung mơi từ 0,8÷1 cm. Các vết chấm phải nhỏ, có đường kính 2÷6 mm và cách nhau 15 mm. 4.2.3. Tách curcumin bằng sắc ký cột Silicagel Hexan Curcumin Chuẩn bị cột Đưa chất phân tích vào cột Sản phẩm
Cột sắc ký được nhồi theo phương pháp nhồi cột ướt. Silicagel được hịa trong dung mơi hexan, sau đó cho vào cột sắc ký và cho một ít bơng vào phía trên mặt silicagel, khi dung hexan di chuyển đến phía mặt trên silicagel, tiến hành cho curcumin đã hòa tan trong dung mơi sắc ký vào cột. Đợi ít phút dung dịch curcumin sẽ di chuyển đế silicagel, tiến hành rót dung mơi sắc ký vào cột và thu sản phẩm bằng các lọ nhỏ. Để xắc định được giai đoạn của sản phẩm dùng sắc ký bản mỏng như trên để xác định. Gom toàn bộ các giai đoạn có cùng Rf và tiến hành bay hơi, tính hiệu suất sản phẩm