4.1 Tối ưu hóa các thơng số hệ thống HPLC
4.1.1 Cố định cột phân tích với cột Gemini C18
pha động là ACN - NaH2PO4
Cố định bước sóng được sử dụng tại: 260 nm và 350 nm.
Pha động được sử dụng: Dung dịch acetonitrile (Pha A) và sodium dihydrogen phosphate 1-hydrate (NaH2PO4) tại pH= 2.8 (Pha B) với tỉ lệ được sử dụng là:
ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 80 : 20 ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 20 : 80
Kết quả chạy chuẩn được thể hiện qua sắc kí đồ
(1): Bước sóng 260 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 80 : 20, nồng độ 4 chất 500 ppb
(2): Bước sóng 350 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 80 : 20 nồng độ 4 chất 500 ppb
(3): Bước sóng 260 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 20 : 80, nồng độ 4 chất 250 ppb
(4): Bước sóng 350 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 20 : 80, nồng độ 4 chất 250 ppb
(5): Bước sóng 350 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 20 : 80, nồng độ 4 chất 500 ppb
(6): Bước sóng 260 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 20 : 80, nồng độ 4 chất 500 ppb
(7): Bước sóng 350 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 80 : 20, nồng độ 4 chất 250 ppb
(8): Bước sóng 350 nm; tỉ lệ pha động ACN – NaH2PO4 tỉ lệ 80 : 20, nồng độ 4 chất 250 ppb
26 (7) (6) (3) (1) (5) (2) (4) (8) OTC DOC CT TC
27 260 nm 350 nm 500 ppb; A:B là 80:20 260 nm 350 nm 250 ppb; A:B là 20:80 260 nm 350 nm 500 ppb; A:B là 80:20
4.1.2 Cố định cột phân tích với cột Synersi C18 (4µm, 2.00 x 50 mm) với pha động sử dụng là ACN – NaH2PO4