* Trắc tính thơm bằng KOH 1,7% (IRRI, 1988)
Bước 1: chuẩn bị mẫu
+ Lấy khoảng 40–50 hạt gạo cho vào ống nghiệm 15 ml.
+ Bơm vào mỗi ống nghiệm 5 ml dung dịch KOH 1,7%, đậy kín ống nghiệm bằng giấy bạc.
Bước 2: Sấy và ngửi mùi + Sấy ở 500C trong 30 phút. + Sau đó đem ra ngửi mùi.
+ Năm người cùng ngửi ở 3 mức độ: thơm, thơm nhẹ và khơng thơm. + Tính trung bình.
Bảng 2.1 Phân cấp mùi thơm theo thang đánh giá của IRRI (1986)
CẤP ĐÁNH GIÁ 0 1 2 Không thơm Thơm nhẹ Thơm
* Chiều dài và hình dạng hạt gạo:
Để xác định kích thước hạt gạo, ta dùng thước kẻ li đo 3 lần ở mỗi giống, mỗi lần đo lấy 10 hạt gạo, rồi lấy giá trị trung bình. Đánh giá chiều dài và hình dạng hạt gạo theo (IRRI, 1988) như sau:
C (hạt) + L (hạt) Bông C (hạt) + L (hạt) Bông C (hạt) + L (hạt) C (hạt) + L (hạt) C (hạt) NSTT (tấn/ha) = = W x 2 (tấn/ha) 1000 X 5 m2 W 10 000
Bảng 2.2 Tiêu chuẩn đánh giá chiều dài và hình dạng hạt gạo của IRRI (1993)
* Độ trở hồ
Theo phương pháp IRRI (1979):
Chuẩn bị 2 mẫu cho mỗi giống/dòng được thử. Mỗi mẫu lấy 6 hạt gạo cạo sạch lớp cám, chọn hạt không bị nứt, để vào đĩa Petri.
Thêm 10 ml KOH 1.7% vào mỗi đĩa.
Đậy đĩa petri và để yên khoảng 23 giờ ở nhiệt độ phòng.
Đáng giá độ lan rộng và độ trong suốt của hạt gạo theo thang điểm của IRRI (1979), được trình bày ở bảng 2.4.
Bảng 2.3 Bảng phân cấp độ trở hồ (IRRI, 1979)
Cấp Độ lan rộng
1 Hạt gạo còn nguyên. 2 Hạt gạo phồng lên.
3 Hạt gạo phồng lên; viền còn nguyên hay rõ nét. 4 Hạt gạo phồng lên; viền còn nguyên và nở rộng. 5 Hạt rã ra; viền hoàn toàn nở rộng.
6 Hạt tan ra và hòa chung với viền. 7 Hạt tan hoàn toàn và quyện vào nhau.
Cấp trở hồ trung bình sẽ được tính theo công thức:
N
n xi
Trong đó: xi : cấp độ trở hồ, n: số hạt có cấp độ trở hồ xi, N: số hạt thử nghiệm.
Bảng 2.4 Đánh giá cấp độ trở hồ theo thang điểm IRRI (1979)
Cấp Độ trở hồ
1-3 Cao
4-5 Trung bình 6-7 Thấp
Loại hạt Chiều dài gạo
trắng (mm)
Hình dạng hạt Tỷ lệ dài/
ngang
Rất dài > 7,50 Thon dài >3,0 Dài 6,61 – 7,50 Trung bình 2,1-3,0 Trung bình 5,51 – 6,60 Mập 1,1-2,0 Ngắn <5,50 Tròn <1,1
* Hàm lượng Amylose
Theo phương pháp của Cagampang và Rodriguez (1980)
Bước 1: Chuẩn bị dung dịch: Ethanol 95%, HCl 30%, NaOH 1N, dung dịch Iod (0,2% I2 và 2% KI).
Bước 2: Chuẩn bị mẫu
Cân 50 mg bột gạo đã nghiền mịn, cho vào ống đong 50 ml. Thêm 0,5 ml ethanol 95%, lắc nhẹ cho tan đều.
Thêm 9,5 ml NaOH 1N. Đun sôi trong 10 phút và lắc đều. Để qua đêm ở nhiệt độ phòng.
Bước 3: Pha loãng và đo mẫu
Rút 100 µl dịch trích cho vào bình định mức 25 ml (đối với mẫu thử thay
dịch trích bằng 100 µl NaOH 1N).
Thêm nước cất khoảng ½ bình, lắc đều. Thêm 250 µl HCl 30%, lắc đều.
Thêm 250 µl dung dịch Iod, lắc đều. Thêm nước cất đến vạch định mức.
Chuyển sang ống 50 ml, lắc đều và để yên trong 30 phút.
Lắc đều trước khi cho vào cuvette. Đo độ hấp thụ ở bước sóng 600 nm. Bước 4: Dựng đường chuẩn và tính kết quả
Đường chuẩn có dạng: Y = aX + b
Trong đó: Y là độ hấp thụ OD, X là lượng amylose có trong mẫu đem đo (mg/ml). Tính hàm lượng amylose theo công thức:
Đánh giá hàm lượng amylose theo thang đánh giá của IRRI (1996), như sau:
Bảng 2.5 Đánh giá hàm lượng amylose theo tiêu chuẩn của IRRI (1996)
Phân hạng gạo Hàm lượng amylose (%)
Nếp 0-2 Rất thấp 3-9 Thấp 10-19 Trung bình 20-25 Cao >25 Amylose (%) = X 2 X 100
* Hàm lượng protein
Theo phương pháp của Lowry O.H. (1951): Bước 1: Chuẩn bị dung dịch ly trích
Dung dịch NaOH 0.1 N.
Dung dịch A (Na2CO3 2% + Na-K-tatrate 0.05% + NaOH 0.1 N). Dung dịch B (CuSO4 0.1%).
Dung dịch C (A : B = 45 : 5). Dung dịch Folin 1 N.
Bước 2: Chuẩn bị mẫu
Cân 20 mg bột gạo (gạo lức) + 1 ml NaOH 0.1 N. Lắc ít nhất 2 giờ hay để qua đêm.
Bước 3: Pha loãng mẫu và đo
Ly tâm mẫu 14000 vòng/phút trong 3 phút.
Hút 50 µl mẫu + 5 ml dung dịch C. Đối với mẫu blank, thay dung dịch ly
trích bằng 50 µl NaOH 0.1 N.
Trộn đều và để yên trong 10 phút.
Thêm 50 µl Folin 1 N, trộn đều và để yên trong 30 phút. Lắc đều mẫu, cho vào cuvette và đo ở bước sóng 600 nm. Bước 4: Dựng đường chuẩn và tính kết quả
Pha dung dịch gốc Bovine serum albumin (BAS). Đường chuẩn có dạng:
Y = aX + b Trong đó: Y : Độ hấp thụ OD
X : Lượng protein có trong mẫu đem đo (mg/ml). Hàm lượng protein theo công thức:
P rotein (%) =
X 2