VI. Cấy truyền phôi cho lợn
7. Chuẩn bị tinh dịch
Khi sử dụng cấy phôi để cải tiến một đàn lợn cái thông qua việc truyền đạt những đặc tính ưu việt của cả đực giống và lợn nái, điều đó không thể được vì loại chương trình nhảy trực tiếp được mô tả ở trên phải cho lợn đực giống nhảy trực tiếp lần đầu sang lần tiếp theo. Để tránh sử dụng quá sức đực giống trong trường hợp như thế, cần phải bảo quản tinh dịch ở nhiệt độ thấp, và sử dụng tinh đông lạnh này cho ít nhất một lần phối giống một con cho phôi. Đã có nhiều tài liệu viết về bảo quản lạnh tinh dịch. Loại môi trường pha loãng được sử dụng rộng rãi với mục đích này là Modena, thành phần của nó được nêu ở bảng 3.
Bảng 21: Thành phần phôi trường Modena (đơn vị: g)
Thành phần Khối lượng Thành phần Khối lượng
Glucose 27,5 Citrate 2,9
Na citrate 6,9 Trisaminomethane 5,65 Na
bicarbonate
1,0 Polymixin B Sulfate 0,0167
EDTA-Na2 2,35 Gentamicin sulfate 0,150
Ở đây không mô tả chi tiết kỹ thuật bảo quản lạnh, mà chỉ giới thiệu bằng một tổng quan ngắn. Trước hết phải lấy tinh trong điều kiện vệ sinh và giữ tinh dịch (phần đậm đặc) ở nhiệt độ ấm. Sau đó kiểm tra dưới kính hiển vi để xem xét khả năng sống của tinh trùng, hoạt lực và không có kỳ hình. Tất cả các quan sát cần phải được ghi lại đầy đủ. Trong thực tế không kiểm tra cẩn thận mật độ tinh trùng (mặc dầu đó là một chỉ tiêu tốt nhất
nếu tính được), nhưng nếu mật độ tinh trùng quá thấp, để an toàn hơn thì không nên sử dụng. Môi trường Modena, đã được chưng ấm ở nhiệt độ tương đương nhiệt độ tinh dịch, được rót (theo thành bình) vào lọ đựng tinh dịch. Đồng thời mẫu tinh trùng đang ở trong bình được khuấy nhẹ trong quá trình rót môi trường pha loãng. Lượng môi trường rót vào phụ thuộc lượng tinh pha cần sử dụng, nhưng thường thường bằng 1 - 2 lần lượng tinh dịch. Bảo quản trong máy lạnh 150C. Mặc dầu có những khác biệt cá thể giữa các đực giống, những tinh trùng này có thể thường được sử dụng trong 1 tuần khi chúng vẫn giữ được khả năng sống và hoạt lực của chúng khi được làm ấm. Tinh trùng được sử dụng mà không biết chất lượng sẽ làm giảm số phôi được thụ tinh. Nếu bảo tồn trong máy lạnh mà không được sử dụng, sức sống tinh trùng sẽ giảm dần. Để tránh điều này, khuấy mẫu 1 ngày 1 lần.
Các hoá chất trên được cân và được trộn lẫn với nước lọc để đạt tới 1000ml dung dịch Modena. Dung dịch này được bảo quản ở 40C và làm ấm lên khi nó được sử dụng. Không cần thiết phải lọc vô trùng