Vị trí C #δC δCa,b DEPT δHa,cđợ bợi,
(J = Hz) HMBC 1 151,5 151,7 C - 2 141,2 141,4 C - 3 151,8 151,9 C - 4 110,4 110,6 CH 6,71 s 2, 16 5 131,3 131,4 C - 6 80,7 80,8 CH 5,84 d (7,6) 8, 16, 1’ 7 38,7 38,8 CH 2,12 m 8 38,7 38,8 CH 2,21 m 9 80,7 80,8 CH 5,74 d (2,8) 15, 1′′ 10 133,1 133,2 C - 11 102,2 102,4 CH 6,43 s 13, 15 12 148,6 148,7 C - 13 135,9 136,1 C - 14 141,7 141,9 C - 15 121,1 121,3 C -
16 121,1 123,2 C - 17 15,6 15,7 CH3 0,93 d (6,8) 6, 7 18 19,9 20,0 CH3 1,02 d (5,6) 7, 8, 9 19 101,3 101,2 CH2 5,94 s 12, 13 OMe-1 59,3 59,4 CH3 3,87 s 1 OMe-2 60,6 60,3 CH3 3,77 s 2 OMe-3 56,0 56,1 CH3 3,90 s 3 OMe-14 60,2 60,7 CH3 3,57 s 14 1′ 166,7 166,9 C - 2′ 127,8 127,9 C - 3′ 138,6 138,7 CH 5,94 s 4′ 15,6 15,7 CH3 1,85 d (6,0) 2’, 3’ 5′ 20,7 20,8 CH3 1,50 br s 1’, 2’, 3’ 1′′ 170,0 170,2 C - 2′′ 20,7 20,8 CH3 1,58 s 1′′
#δC của interiotherin C [77] đo trong chloroform-d1, achloroform-d1, b100 MHz, c400 MHz
4.2.7. Hợp chất KC7: (S)-1-phenylethyl-6-α-L-arabinopyranosyl-β-D-
glucopyranoside (hợp chất mới)
Hình 4.2.7.a: Cấu trúc của hợp chất KC7 và (S)-1-phenylethyl-β- D- glucopyranoside
Hình 4.2.7.b: Các tương tác HMBC, COSY chính của KC7
Hợp chất KC7 thu được ở dạng dầu không màu với độ quay cưc riêng - 60,2 (c 0,05, MeOH). Công thức phân tử là C19H28O10 dưa trên pic ion giả phân tử HR-ESI-MS của nó ở m/z 439,1577 [M+Na] + (tính cho C19H28O10Na; 439,1580).
Hình 4.2.7.c. Phổ HR-ESI-MS của hợp chất KC7
Hình 4.2.7.d. Phổ 13C-NMR của hợp chất KC7 đo trong methanol-d4
Trên phổ 1H-NMR của KC7 cho thấy các tín hiệu của nhóm methyl bậc hai ở δH 1,47 (3H; d; J = 6,5 Hz, H3-2), nhóm methine ở δH 5,01 (1H; d; J = 6,5 Hz; H-1), và 3 tín hiệu của các proton thơm ở δH 7,27 (1H; t; J = 7,3 Hz, H-4′); 7,35 (2H; t; J
= 7,3 Hz; H-3′/H-5′) và 7,44 (2H; d; J = 7,3 Hz; H-2′/H-6′).
Ngoài ra, phổ 13C-NMR và HMQC của KC7 cho thấy tín hiệu của 19 carbon bao gồm 8 tín hiệu của gớc phenylethanol ở δC 24,6 (C-2); 76,2 (C-1); 143,9 (C-1′); 128,0 (C-2′/C-6′); 129,4 (C-3′/C-5′) và 128,7 (C-4′) và 11 tín hiệu béo khác của phần đường.
Hình 4.2.7.e. Phổ 1H-NMR của hợp chất KC7 đo trong methanol-d4
Thêm vào đó, các tương tác trên phổ 1H-1H COSY giữa H3-2 (δH 1,47) và H-1 (δH 5,01) và của H-2′ (δH 7,44)/H-3′ (δH 7,35)/H-4′ (δH 7,27)/H-5′ (δH 7,35)/H-6′ (δH 7,44); cùng với các tương tác trên phổ 1H-13C HMQC, khẳng định cấu trúc của phenylethanol. Thật vậy, các tương quan HMBC của mợt tín hiệu doublet của proton nhóm methyl ở H3-2 (δH 1,47) với C-1′ (δC 143,9); và của một proton methine từ H-1 (δH 5,01) đến C-2′ /6′ (δC 128,0)/C-1′ (δC 143,9); từ H-2′/H-6′ (δH 7,44) đến C-1 (δC 76,2)/C-2′/6′ (δC 128,0)/C-4′ (δC 128,7) càng làm chắc chắn thêm khẳng định này.
Phân tích sâu hơn về dữ liệu phổ của KC7 gợi ý rằng trong cấu trúc của nó có chứa bợ khung phenylethanol cùng với hai phân tử đường [78].
Thật vậy, các giá trị chuyển dịch hóa học của mợt hexose [δC 101,1 (CH, C-1′′); 75,2 (CH, C-2′′); 77,9 (CH, C-3′′); 72,1 (CH, C-4′′); 76,9 (CH, C-5′′); 68,1 (CH2, C-
D-glucose và L-arabinose được phát hiện bằng HPLC so sánh thời gian lưu của các sản phẩm thủy phân của chúng (tR-L-ara = 24,3 phút và tR-D-glc = 27,3 phút) với các mẫu chuẩn (tR-L-ara = 24,3 phút tương ứng và tR-D-glc = 27,3 phút) [58].
Hình 4.2.7.f. Phổ 1H-1H COSY của hợp chất KC7 trong methanol-d4
Hình 4.2.7.h. Phổ HMBC của hợp chất KC7 trong methanol-d4
.
Hình 4.2.7.i. So sánh HPLC sự thủy phân bằng acid của KC7 (A, tR-L-ara = 24.385 and tR-D-glc = 27.282 min) và các mẫu chuẩn [L-arabinose (B, tR-L-ara = 24.238 min),
Ngoài ra, một tương tác trên HMBC từ H-1′′ (δH 4,07) đến C-1 (δC 76,2) chỉ ra chuỗi disaccharide kết nối thông qua C-1 của bộ khung phenylethanol. Trong khi đó, mợt tương tác HMBC khác từ H-1′′′ (δH 5,02) đến C-6′′ (δC 68,2) của đơn vị glucose, đã xác nhận một kết nối arabinofuranosyl- (1′′′→ 6′′) - glucopyranosyl. Điều này cũng giải thích sư dịch chuyển x́ng vùng trường thấp ở δC 68,1 (C-6′′)
của phần glucopyranosyl.
Sư hiện diện của hai proton anome ở δH 4,07 (1H; d; J = 7,2 Hz; H-1′′) và 5,02 (1H; br s; H-1′′′) được xác định cho các các proton loại β- và α thuộc đơn vị đường. Cấu hình tương đối của KC7 được xác định bằng cách phân tích dữ liệu phổ và tương quan NOESY. Đáng chú ý, phổ 13C-NMR của KC7 đã giải thích các giá trị dịch chuyển hóa học cho carbon xung quanh trung tâm trung tâm bất đối C-1 theo bảng sau đây:
Bảng 4.2.7.a. So sánh dữ liệu phổ 13C của KC7 và hợp chất tham khảo [78]
Vị trí C Cấu hình S Cấu hình R KC7 1 76,0-76,9 77,8 76,2 2 24,6 22,3 24,6 1′ 144,1 145,2 143,9 2′; 6′ 127,9-128,0 127,4 128,0 1′′ 101,1-101,2 102,5 101,1
Hơn nữa, giá trị dịch chuyển hóa học của mợt proton anome tại H-1′′ (δH 4,07) cũng giải thích cho sư xuất hiện của gốc (S)-1-phenylethyl-β-D-glucopyranosyl [79]. Vì vậy, cấu hình của C-1 được đề xuất là S.
Ngoài ra trên phổ CD của KC7 cho thấy hiệu ứng Cotton âm ở bước sóng 210 nm, ngược với hiệu ứng Cotton dương của cấu hình C-1R xác nhận cấu hình C-1S tụt đới [80].
Hình 4.2.7.k. Phổ CD của hợp chất KC7 trong methanol-d4
Với tất cả các dữ kiện trên, hợp chất KC7 được khẳng định là mợt hợp chất mới và có tên IUPAC là (S)-1-phenylethyl-6-α-L-arabinopyranosyl-β-D-
glucopyranoside (chi tiết phổ xem phụ lục 27).