Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Đối tượng nghiên cứu
Những nam giới được chẩn đốn vơ sinh đã được xét nghiệm tinh dịch đồ, xác định là VT hoặc TTN tại Bộ môn Y sinh học - Di truyền, Đại học Y Hà Nội trong thời gian từ 1/2012 đến 6/2014.
2.1.1. Số bệnh nhân và cỡ mẫu
- Nhóm nghiên cứu: các nam giới trong độ tuổi sinh sản: tuổi 18 trở lên, có mật độ tinh trùng < 5 triệu tinh trùng/ml tinh dịch.
- Nhóm chứng: nam giới đã có 2 con khỏe mạnh (tinh dịch đồ bình thường và được mặc định là NST bình thường).
Cỡ mẫu nghiên cứu:
* Cỡ mẫu xét nghiệm NST, lập karyotyp và phân tích ADN xác định theo cơng thức:
n = Z2 1-/2.
Trong đó: n là cỡ mẫu cần thu thập.
Z 1-/2 là độ tin cậy 95% với 0,05 thì Z 1-/2 = 1,96
p: Tỉ lệ bất thường NST và mất đoạn AZFabcd ở bệnh nhân vô sinh dựa trên các nghiên cứu trước (lấy p = 0,12).
là khoảng cách sai lệch mong muốn được tính 30% của p = 0,3. Thay các giá trị vào được n = 1,962. = 313
Trên thực tế chúng tôi nghiên cứu:
* 553 nam giới vừa được khai thác các chỉ số nghiên cứu về tuổi, nghề nghiệp, tiền sử và xét nghiệm tinh dịch đồ (gồm 101 nam giới ở nhóm chứng
) . ( ) 1 .( 2 p p p ) 12 , 0 . 3 , 0 ( ) 12 , 0 1 .( 12 , 0 2
và 452 nam giới vô sinh). Trong số 553 người này, chúng tôi thăm khám lâm sàng được 484 người để ghi nhận các chỉ số về mật độ, thể tích tinh hồn và bất thường bộ phận sinh dục ngoài (gồm 91 nam giới ở nhóm chứng và 393 nam giới vô sinh).
* 469 nam giới vừa được xét nghiệm tinh dịch đồ, xét nghiệm NST lập
karyotyp và phân tích ADN. Trong đó có 354 người VT và 115 người TTN. Trong số 469 nam giới này có 95 người VT và TTN nằm trong số 393 người được khám lâm sàng.
2.1.2. Tiêu chuẩn chọn đối tượng nghiên cứu
Đối tượng được chọn đưa vào nghiên cứu là những người vô sinh nam đã được xác định là:
- VT hoặc TTN (≤ 5 triệu tinh trùng/ml tinh dịch) khơng thuộc nhóm tắc nghẽn.
- Những người khơng có bệnh cấp tính (viêm nhiễm). - Hợp tác trong nghiên cứu.
2.1.3. Tiêu chuẩn loại trừ
Ở nhóm nghiên cứu: Những người có một trong các tiêu chuẩn sau sẽ bị loại trừ khỏi nghiên cứu:
- Tinh trùng < 5 triệu/ml.
- Vơ sinh thuộc nhóm tắc nghẽn: Dựa vào kết quả xét nghiệm fructose để xác định có tắc nghẽn hay khơng.
- Người đang có bệnh cấp tính, bị tâm thần… - Người không hợp tác.