CHƢƠNG 2 : ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Nội dung nghiên cứu, các kỹ thuật thực hiện, đánh giá kết quả
2.4.4. Quy trình kỹ thuật Xpert MTB tại phòng xét nghiệm
Xét nghiệm Xpert MTB được thực hiện tại phòng xét nghiệm Vi sinh các bệnh viện.
2.4.4.1. Mô tả thiết bị được trang bị tại bệnh viện
Máy Xpert MTB được lắp đặt tại các cơ sở nghiên cứu thuộc loại máy có 4 modules, sản xuất bởi cơng ty Cepheid Inc Mỹ, lắp đặt và bảo trì bởi đại diện duy nhất tại Việt Nam. Hộp sinh phẩm thực hiện xét nghiệm chẩn đoán vi khuẩn lao và lao kháng RMP thuộc thế hệ thứ 4.
2.4.4.2. Quy trình thực hiện kỹ thuật Xpert MTB
Quy trình chuẩn thực hiện kỹ thuật Xpert MTB theo tiêu chuẩn của Phòng Xét nghiệm lao chuẩn quốc gia Bệnh viện Phổi Trung ương thống nhất sử dụng trong thực hành tại tất cả các phòng xét nghiệm Vi sinh có sử dụng máy Xpert MTB trong chẩn đoán lao thuộc nghiên cứu (Bệnh viện Phổi TW, Bệnh viện Phổi Hà Nội, Bệnh viện 09). Nghiên cứu sinh đã được tập
huấn và thực hiện một số xét nghiệm Xpert MTB (Phụ lục - Xác nhận thực hiện nghiên cứu) các kỹ thuật viên sinh học phân tử chuyên trách tại các khoa vi sinh là những người cùng thực hiện xét nghiệm [10],[12].
Quy trình kỹ thuật:
a) Mẫu đờmtrong nghiên cứu (đờm tự nhiên hoặc đờm tác động) đạt tiêu chuẩn (≥ 2ml) sau khi làm đồng nhất được lấy khoảng 1ml để làm xét nghiệm MGIT, phần còn lại được chuyển sang làm xét nghiệm Xpert MTBthực hiện ngay trong ngày. Phần cho xét nghiệm nuôi cấy MGIT được thực hiện đồng thời tại khoa Vi sinh của bệnh viện Phổi Trung ương, Phổi Hà Nội, hoặc chuyển từ Bệnh viện 09 tới Bệnh viện Phổi Hà Nội (Phụ lục - Xác nhận kết quả nghiên cứu)
b) Chuẩn bị xét nghiệm:
- Đổ dung dịch đệm (dung dịch này nằm trong bộ xét nghiệm được chuẩn bị sẵn) vào mẫu đờm theo tỷ lệ 2:1 để làm loãng đờm và diệt vi khuẩn
- Lắc hỗn dịch và để trong 10 phút - Tiếp tục lắc lần 2 và để thêm 5 phút
- Dùng Pipet lấy 2ml hỗn dịch đưa vào hộp xét nghiệm (cartridge) - Scan mã số (Code) trên cartridge vào máy
- Đặt cartridge vào máy, từ đây các bước tiếp theo sẽ hồn tồn tự động theo quy trình vận hành của máy
Hình 2.3. Máy Gen Xpert
c) Đọc kết quảxét nghiệm trên màn hình máy tính bao gồm: + Vi khuẩn lao có được phát hiện hay khơng
+ Nếu có, số lượng ở mức thấp trung bình hay cao
+ Vi khuẩn được phát hiện có kháng với RMP hay khơng
Sơ đồ 2.2. Các bước xử trí bệnh phẩm xét nghiệm Xpert MTB [12]