Chiết, tách và phân lập chất: Chiết mẫu bằng các phương pháp chung đối với mẫu thực vật. Riêng đối với mẫu chè phế phẩm ngoài chiết theo quy trình chung còn chiết theo phương pháp cổ truyền. Trước khi tiến hành các phương pháp sắc ký cột để phân tách chất, mẫu cao chiết etyl acetat được tiến hành phân tích bằng sắc ký lớp mỏng và sắc ký lỏng hiệu năng cao với các hệ dung môi thích hợp để xác định sơ bộ thành phần và hàm lượng của các cấu tử trong cao chiết, giúp cho việc định hướng và theo dõi quá trình phân lập chất một cách có hệ thống.
Để phân tích và phân tách các phần dịch chiết, phân lập các hợp chất cũng như các chất sau các phản ứng chuyển hóa, chúng tôi đã sử dụng các phương pháp sắc ký như: sắc ký lớp mỏng, sắc ký cột thường, sắc ký cột nhanh với pha tĩnh là silica gel (Merck), sắc ký cột pha đảo với chất hấp phụ là RP-18 và sắc ký lọc gel Sephadex LH-20.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 27
Hoạt tính sinh học của các dịch chiết và các chất phân lập được
Các phép thử hoạt tính sinh học được thực hiện tại Phòng thử hoạt tính sinh học, Viện Hóa học thuộc Viện khoa học và công nghệ Việt Nam và tiến hành nghiên cứu với 02 mẫu:
- Mẫu chè khô chiết nước (CK)
- Mẫu dịch chiết EtOAc (chứa poliphenol tổng, TCTN)
Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định với các chủng vi sinh : Lactobacillus fermentum, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Salmonella enterica,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa và nấm Candida albicans;
Hoạt tính gây độc tế bào đối với các dòng tế bào ung thư người: KB (ung thư mô biểu mô)
Hoạt tính chống oxi hóa DPPH