I = I0. exp(-εd)
Độ hấp thụ A= - lg T , trong đó T là độ truyền qua và được tính bằng cơng thức sau
Độ hấp thụ A (mật độ quang A ) của dung dịch tỷ lệ thuận với nồng độ C của dung dịch theo biểu thức
Trong đó: ε là hệ số hấp thụ phân tử, c là nồng độ dung dịch (mol/l), d (cm) là độ dày truyền ánh sáng.
Đường cong biểu diễn sự phụ thuộc của hệ số hấp thụ ɛ vào tần số hoặc bước sóng gọi là đường cong hấp thụ (hay phổ hấp thụ). Mỗi chất đều hấp thụ lọc lựa những tần số hay bước sóng khác nhau.
Nguyên tắc đo phổ hấp thụ:
Nếu ta gửi một bức xạ đơn sắc cường độ I0 tới một mẫu đồng thể có độ dài d, cường độ I cịn lại ở lối ra khỏi mẫu thì nhỏ hơn I0. Thường thường ta quan tâm tới độ truyền qua T = I/I0. Đôi khi người ta quan tâm tới độ hấp thụ A= - log10 T. Các phổ được vẽ với các thiết bị truyền thống là "hai chùm tia" cho một cách trực tiếp độ truyền qua T. Với kỹ thuật máy tính, hiện nay người ta cũng dùng một cách dễ dàng cả độ truyền qua và độ hấp thụ.
Các máy quang phổ được dùng, giống như sự bố trí các máy tán sắc, gồm các lăng kính NaCl hoặc tốt hơn là các cách tử với các kính lọc giao thoa. Hệ quang học với hai chùm tia cho phép nhận được trực tiếp tỷ lệ I/Iref. giữa cường độ I của chùm đã xuyên qua mẫu và cường độ I của chùm đã xuyên qua phần mẫu so sánh. Sự so sánh trực tiếp này cho phép bảo đảm rằng phổ I và I ref.được ghi trong cùng một điều kiện. Các phép đo phổ hấp thụ được tiến hành trên hệ máy quang phổ UV-visible-Nir Absorption Spectrophotometer (Jasco V770) tại Khoa Vật lý và Công nghệ- Trường Đại học Khoa học- Đại học Thái Nguyên. Sơ đồ hệ đo hấp thụ được trình bày trên hình 2.9.