Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học

2.2 .Phương pháp nghiên cứu

2.2.2. Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học

2.2.2.1. Phương pháp chiết xuất, phân lập và tinh chế các hợp chất

Mẫu nghiên cứu là lá cây Xăng xê được thu hái và được phơi sấy, bảo quản trong túi nilon kín. Để tiến hành các nghiên cứu lá được chiết xuất bằng phương pháp chiết ngâm ethanol 80% ở nhiệt độ phòng ba lần (3 x 3 ngày), cất thu hồi dung môi và cô đến khối lượng không đổi được cao chiết toàn phần. Tiến hành chiết theo phương pháp chiết phân đoạn để thu được các phân đoạn n-hexan, ethyl acetat và

Giám định tên khoa học Mẫu

Xăng xê

Chiết xuất cao tổng và các cao phân đoạn

Đánh giá độc tính cấp

Đánh giá TD trên viêm loét dạ dày của cao tổng

và các cao phân đoạn

Phân lập và xác định các hợp chất từ các phân

đoạn có tác dụng

Đánh giá TD giảm đau trung ương

Đánh giá độc tính bán trường diễn ở cao phân

đoạn có tác dụng trên viêm loét dạ dày và có

nước. Cao ethyl acetat được chiết bằng phương pháp chiết acid-base thu được cao chiết alcaloid tồn phần E1. Phần dung dịch cịn lại sau khi chiết alcaloid được tiếp tục chiết bằng ethyl acetat, thu hồi dung môi dưới áp suất giảm, thu được cao ethyl acetat E2.

Phân lập các hợp chất từ cao chiết n-hexan, phân đoạn alcaloid E1 và phân đoạn E2 bằng cách sử dụng phương pháp sắc ký cột pha thường, pha đảo, sephadex và sắc

kí lỏng điều chế.

2.2.2.2. Phương pháp xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất

Cấu trúc hóa học của các hợp chất được xác định dựa vào các hằng số vật lý (điểm chảy, góc quay cực) phổ khối phun mù điện tử ESI-MS, phổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1D (1H-NMR, 13C-NMR, DEPT) kết hợp với phổ 2D (HMBC, HSQC, COSY và NOESY) và so sánh với các dữ liệu phổ đã công bố trong tài liệu tham khảo.