2.2 Quy trình chế tạo giá thể
2.2.1 Quy trình chế tạo giá thể chitosan/tinh bột/HA
Trong nghiên cứu này giá thể chitosan/tinh bột được chế tạo theo phương pháp đông tụ - sấy thăng hoa với quy trình chung được trình bày theo sơ đồ hình 2.4.
Hình 2. 4 Quy trình chế tạo giá thể chitosan/tinh bột/hydroxyapatite
Bột chitosan có khối lượng (tỷ lệ) theo bảng 2.1, được cho vào dung dịch acid acetic và khuấy trên máy khuấy từ ở nhiệt độ 40-50 oC trong vòng 3 giờ, tạo dung dịch chitosan hồ tan hồn tồn. Sau đó, tinh bột biến tính có khối lượng (tỷ lệ) theo bảng 2.1 được trộn vào dung dịch và khuấy đều trên máy khuấy từ ở nhiệt độ 90-100oC đến khi tất cả tinh bột chuyển sang dạng hồ tinh bột, tiếp tục khuấy hỗn hợp thêm 3 giờ hoặc 7 giờ dựa vào hai khoảng thời gian khảo sát (do các dung dịch tạo gel có độ nhớt khá cao vì
thể chỉ có thể khuấy ở tốc độ thấp). Gel được bơm vào xylanh và được bơm dung dịch chứa NaOH 0,25M và Na2SO4 0,375M hoặc trong dung dịch Ethanol 2M và NaOH 0,7M và được ngâm 8 giờ để tạo dạng viên đông tụ và tạo ổn định cho các viên kết tủa. Sau đó, các kết tủa chitosan-tinh bột sẽ được rửa với nước cất nhiều lần đến khi đạt được pH trung tính và loại bỏ hoàn toàn lượng muối dư thừa. Các mẫu sau khi rửa sạch sẽ được đông lạnh ở nhiệt độ -40oC trước khi được sấy thăng hoa và thu thành phẩm cuối cùng. Các mẫu được bảo quản trong bình hút ẩm để tránh hư hại.
Với giá thể có hydroxyapatite, HA sẽ được siêu âm với 30ml dung dịch acid acetic 1% (v/v) trong vịng 30 phút, sau đó bột chitosan có khối lượng (tỷ lệ) theo bảng 2.1 sẽ được cho vào dung dịch acid acetic đã được phân tán HA và khuấy trên máy khuấy từ ở nhiệt độ 40-50oC trong vòng 3 giờ, tiếp theo giá thể sẽ được tiếp tục chế tạo theo quy trình giá thể khơng có HA.