BN nghi ngờ u dạng tinh bột đường hô hấp
Sinh thiết u
Mô bệnh học và hóa mô miễn dịch
Âm tính Dương tính
Làm lại xét nghiệm Phẫu thuật lấy u
Âm tính Dương tính Điều trị nội khoa
Loại trừ Theo dõi hàng tháng (6 tháng)
Theo dõi 3 tháng/lần
2.2.2.1. Thăm khám lâm sàng
* Phần hành chính: các yếu tố về tên, tuổi, giới, địa chỉ, số điện thoại liên lạc, mã số hồ sơ nhập viện, mã số hồ sơ nghiên cứu phải được ghi nhận đầy đủ để đảm bảo liên lạc và đánh giá sau mổ .
* Bệnh sử
- Lý do vào viện:
+ Chảy máu mũi + Ù tai
+ Giảm hoặc mất ngửi + Khàn tiếng
+ Khó thở
- Triệu chứng toàn thân: phù, cao huyết áp … - Triệu chứng cơ năng:
+ Chảy máu mũi + Ù tai
+ Giảm hoặc mất ngửi + Khàn tiếng
+ Khó thở
+ Ho kéo dài hoặc ho ra máu
- Triệu chứng thực thể: thăm khám bằng nội soi ống cứng hoặc ống mềm phóng đại có màn hình để mô tả, ghi nhận các tổn thương lâm sàng, chụp ảnh phục vụ cho nghiên cứu (nếu có thể).
+ U dạng tinh bột mũi xoang: khối u thường có màu vàng, hồng hoặc đỏ, mật độ mềm, ranh giới rõ.
+ U dạng tinh bột thanh quản: có thể có những dạng tổn thương sau: - Tổn thương dưới niêm mạc
- Tổn thương dạng nhân - Tổn thương dạng giả u
- Tổn thương dầy thành xung quanh
+ U dạng tinh bột ở khí phế quản: thường có biểu hiện tổn thương dưới niêm mạc lan tỏa hay khối u như san hô.
Quan sát bệnh tích trong khi nội soi và lấy khối u để đánh giá tổn thương trên lâm sàng.
Thu thập mẫu bệnh phẩm trong quá trình phẫu thuật u dạng tinh bột để làm mô bệnh học.
Đối với bệnh nhân hồi cứu phải còn tiêu bản mô bệnh học, bác sỹ giải phẫu bệnh đọc lại theo tiêu chí mô bệnh học của u dạng tinh bột
Tai Mũi Họng TW và bộ môn Giải Phẫu Bệnh Đại học Y Hà Nội.
2.2.2.2. Làm xét nghiệm mô bệnh học
Bệnh phẩm là u dạng tinh bột lấy dược trong quá trình phẫu thuật, được thực hiện theo các bước sau :
+ Nguyên tắc của phương pháp: cố định của chất đỏ Congo trên chất dạng bột.
+ Các loại dung dịch sử dụng: - Dung dịch Ethanol kiềm:
Ethanol 80 độ bão hoà Chloruasodium 50ml Dung dịch nước 1% sút 0,5 ml
Lọc sau đó dùng ngay trong vòng 15p sau khi điều chế. - Dung dịch mẹ:
Ethanol 80 độ bão hoà đỏ Congo và Chloruasodium - Dung dịch nhuộm:
Lấy 50ml dung dịch mẹ rồi cho vào 0,5ml dung dịch nước 1% sút, lọc đi sử dụng trong vòng 15 phút sau điều chế.
+ Cách tiến hành: tốt nhất là bệnh phẩm được cố định trong formol trung tính, cồn tuyệt đối hoặc Carnoy, cắt đóng băng hoặc chuyển đúc parafin. Mảnh cắt parafin sau khi loại parafin được đưa vào nước.
Phương pháp đỏ Congo kiềm theo Puchtler, Sweal và Levine 1962, được tiến hành tho các bước sau:
- Tẩy Parafin - Chảy nước
- Nhuộm trong Hemalun 10p - Rửa qua 3 lần ngâm nước cất
- Chuyển vào một dung dịch ethanol bão hoà Chlorua sodium trong 20’ - Nhuộm trong dung dịch cồn kiềm đỏ Congo trong 20’
- Loại nước nhanh trong 3 lần ngâm cồn tuyệt đối. Làm qua 2 lần ngâm xylen, gắn Bomcanada.
- Chất dạng bột: bắt màu từ hồng tươi đến đỏ
- Soi kính hiển vi phân cực: tính lưỡng chiết mạnh và tính đổi sắc - Soi kính hiển vi huỳnh quang: huỳnh quang đỏ
2.2.2.3. Làm xét nghiệm hoá mô miễn dịch
Bệnh phẩm nghiên cứu được nhuộm hóa mô miễn dịch với kháng thể đơn dòng CK7, CK19, CK20, Ki-67, p53 và Her-2/neu, sử dụng kỹ thuật Biotin- Avidin Complex (ABC), đánh giá sự bộc lộ p53, Ki-67. Thực hiện theo các bước sau:
1. Bệnh phẩm được cắt dày 3µm, dàn trên các lam kính phủ Silane 2. Ủ qua đêm ở nhiệt độ 56oC
3. Tẩy nến bằng Toluen và cồn như nhuộm thông thường 4. Rửa nước x 5 phút
5. Bộc lộ kháng nguyên bằng nhiệt: đặt tiêu bản trong dung dịch citrate nồng độ 0,01 mol/l, pH = 6,0, đun sôi trong nồi áp suất x 5 phút 6. Rửa nước cất x 5 phút
7. Khử peroxidase nội sinh bằng H2O2 x 10 phút 8. Rửa nước cất x 5 phút
9. Ủ kháng thể thứ nhất 1 giờ
10. Rửa tiêu bản bằng dung dịch TBS 3 lần, mỗi lần 5 phút 11. Ủ kháng thể thứ hai 30 phút
12. Rửa tiêu bản bằng dung dịch TBS 3 lần, mỗi lần 5 phút 13. Phủ ABC x 30 phút
14. Rửa tiêu bản bằng dung dịch TBS 3 lần x 5 phút 15. Ủ với dung dịch màu DAB x 10 phút
16. Rửa nước chảy x 5 phút
18. Tẩy nước, phủ lamen
Đọc tiêu bản: Hình ảnh trên tiêu bản của xét nghiệm hoá mô miễn dịch ghi nhận việc có hay không phản ứng miễn dịch kháng nguyên – kháng thể. Nếu có phản ứng miễn dịch xảy ra trên tiêu bản sẽ xuất hiện màu nâu (DAB) tại vị trí cần đánh giá và bác sỹ giải phẫu bệnh sẽ đưa ra kết luận dương tính (+), ngược lại là âm tính (-).
Kiểm soát chất lượng:
- Kiểm tra chất lượng hoá chất, thuốc nhuộm thường xuyên, đảm bạo đậm độ hợp lý với thời gian nhuộm.
- Sử dụng chứng âm, chứng dương để đối chiếu. - Hạn chế âm tính giả, dương tính giả:
+ Sử dụng lam kính mới, không bị ẩm mốc, có đánh số rõ rang cho từng bệnh phẩm.
+ Sử dụng lưỡi dao cắt tiêu bản không quá nhiều lần (trung bình 1 lưỡi dao cho 5 bệnh phẩm)
+ Cắt lát bệnh phẩm mỏng khoảng 3µm
+ Dàn đều bệnh phẩm lên lam kính, không bị nhăn, không bị rách. + Tẩy sạch parafin bám trên lam kính.
+ Trong quá trình ủ kháng thể không được để khô tiêu bản.
+ Đảm bảo đúng và đủ khi thao tác theo khuyến cáo của nhà cung cấp kháng thể.
+ Dán lamen lên lam kính thật kín, không để không khí ám vào Tất cả các tiêu bản được tiến hành nghiên cứu trên kính hiển vi quang học ở các độ phóng đại khác nhau do hai chuyên gia giải phẫu bệnh có kinh nghiệm kiểm định.
2.2.2.4. Phương pháp điều trị
+ Phương pháp phẫu thuật
+ Tai biến và biến chứng xảy ra sau phẫu thuật - Nội khoa: liệu pháp corticoid
+ 1mg/kg x 7 ngày
+ 0,2mg/kg x 7 ngày + 0,1mg/kg x 7 ngày
+ 1 viên 4mg/ngày duy trì trong 6 tháng