PHẦN 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.3. Thí nghiệm 3: ảnh hƣởng của thời gian bảo quản và phản ứng hoạt hóa
4.3.5. Cƣờng độ hoạt động của tinh trùng
Cƣờng độ hoạt động của tinh trùng cũng đƣợc khảo sát trƣớc tác động của thời gian bảo quản và phản ứng hoạt hóa. Kết quả đƣợc trình bày ở bảng 4.6.
7 6
5 Trước hoạt hóa
Sau hoạt hóa 4 3 2 1 0 0 giờ 24 giờ
Thời gian bảo quản 48 giờ
Bảng 4.6 Sự thay đổi cƣờng độ hoạt động của tinh trùng
Thời gian
bảo quản 0 giờ 24 giờ 48 giờ
Phản ứng
hoạt hóa hoạt hóaTrƣớc Sau hoạt hóa Trƣớc hoạt hóa Sau hoạt hóa hoạt hóaTrƣớc Sau hoạt hóa Cƣờng độ hoạt động 1 ± 0,00 6,33 ± 1,03 0,94 ± 0,02 4,4 ± 0,81 0,88 ± 0,03 2,95 ± 0,51 n 6 PTG 0,0000 PPƢ 0,0000 PTG - PƢ 0,0000
Biểu đồ 4.5 So sánh cƣờng độ hoạt động của tinh trùng
Kết quả bảng 4.6 cho thấy cƣờng độ hoạt động của tinh trùng thay đổi rất ý nghĩa (PTG < 0,001)giữa các mốc thời gian bảo quản (0 giờ, 24 giờ và 48 giờ) . Cƣờng độ hoạt động của tinh trùng cao nhất ở mốc thời gian là 0 giờ và giảm dần theo thời gian bảo quản. Có lẽ tinh trùng đã tiêu tốn năng lƣợng khá nhiều cho việc di chuyển trong mơi trƣờng bảo quản. Tinh trùng có đặc tính ln chuyển động về phía trƣớc (Trần Tiến Dũng, 2002).
Cƣờng độ hoạt động của tinh trùng trƣớc và sau phản ứng hoạt hóa cũng thay đổi rất ý nghĩa(PPƢ < 0,001). Sau phản ứng hoạt hóa cƣờng độ hoạt động của tinh trùng đƣợc cải thiện. Trong mơi trƣờng Tris – glucose, sự hiện diện của lịng đỏ trứng và citrate natri làm tăng độ nhớt của môi trƣờng nên làm hạn chế hoạt động của tinh trùng (trích dẫn từ Thái Thị Mỹ Hạnh, 2005). Do đó cƣờng độ hoạt động của tinh trùng trong môi trƣờng Tris – glucose thấp hơn trong tinh nguyên và trong môi trƣờng C ư ờ n g đ ộ
Sperm – TALP – 1. Ngồi ra pH của mơi trƣờng Tris – glucose hơi toan tính (6,82) nên sức hoạt động của tinh trùng bị ức chế (trích dẫn từ Thái Thị Mỹ Hạnh, 2005). Ngƣợc lại pH của môi trƣờng Sperm – TALP – 1 hơi kiềm tính (7,21) thì sức hoạt động của tinh trùng đƣợc tăng cƣờng (Nguyễn Tấn Anh và Nguyễn Quốc Đạt, 1997). Sự tƣơng tác giữa thời gian bảo quản và phản ứng hoạt hóa rất ý nghĩa (PTG – PƢ < 0,001). Nhƣ vậy, thời gian bảo quản có ảnh hƣởng đến cƣờng độ hoạt động của tinh trùng thu đƣợc sau phản ứng hoạt hóa.
Tóm lại, thí nghiệm 3 cho thấy chất lƣợng tinh trùng thu đƣợc sau phản ứng hoạt hóa ở mốc thời gian khảo sát 0 giờ là tốt nhất. Tinh trùng đƣợc hoạt hóa ngay sau khi pha lỗng có hoạt lực trung bình cao nhất (0,78 ± 0,08) và cƣờng độ hoạt động trung bình cũng cao nhất (6,33 ± 1,03). Do đó, khi thụ tinh in vitro nên chọn tinh trùng đƣợc hoạt hóa ngay sau khi pha lỗng. Tuy nhiên, để kết luận đƣợc chính xác hơn, cần chọn cả 3 mẫu tinh trùng đƣợc hoạt hóa ở các mốc thời gian bảo quản 0 giờ, 24 giờ và 48 giờ tiến hành thụ tinh in vitro. Tỉ lệ phơi 2 tế bào đƣợc tạo ra từ q trình thụ tinh này là chỉ tiêu quyết định trong việc đánh giá chất lƣợng tinh trùng sau khi hoạt hóa ở các mốc thời gian bảo quản khác nhau (0 giờ, 24 giờ và 48 giờ).
Trong quá trình khảo sát 5 chỉ tiêu nêu trên, một đặc điểm khác của tinh trùng cũng đƣợc quan sát. Tinh trùng có đặc tính tiếp xúc với vật lạ (Trần Tiến Dũng, 2002). Do đó trƣớc khi hoạt hóa, tinh trùng chỉ tiếp xúc với vật lạ (nếu có) mà khơng tiếp xúc với nhau. Tuy nhiên, sau khi hoạt hóa thì tinh trùng thƣờng hay tiếp xúc lẫn nhau (hình 4.5). Các cation hóa trị 2 trong môi trƣờng
Sperm – TALP – 1 (Ca2+ với nồng độ cao, Mg2+) làm mất điện tích bề mặt tinh trùng nên tinh trùng tụ dính lại (Nguyễn Tấn Anh và Nguyễn Quốc Đạt, 1997). Những tinh trùng trƣớc phản ứng hoạt hóa khơng tụ dính với nhau, có lẽ do bề mặt của chúng có cùng điện tích.