Tiến hành pha thuốc viên nén Ibuparavic do công ty cổ phần dƣợc phẩm và dịch vụ y tế Khánh Hội sản xuất. Thành phần theo công bố là 300 mg PRC, 200 mg IBU và 20 mg CF/1viên. Ngày sản xuất 12/7/2009, hạn sử dụng 8/2013.
Khối lƣợng trung bình viên thuốc: m = 0,53757 g.
Xử lý mẫu thuốc: Cân 10 viên thuốc, tính khối lƣợng trung bình của 1 viên, đem nghiền nhỏ thành bột mịn, rồi lấy chính xác lƣợng bột tƣơng đƣơng chứa 300 mg PRC, 200 mg IBU và 20 mg CF cho vào bình định mức 100 mL, thêm dung dịch HCl 0,1 M, lắc kỹ cho tan hoàn toàn, định mức đến vạch, ta đƣợc 100 mL, đem lọc, bỏ khoảng 20 mL dung dịch đầu, lấy 10 mL dung dịch lọc pha loãng thành 100 mL ta đƣợc dung dịch chứa hàm lƣợng tƣơng đƣơng PRC là 30 g/mL, IBU là 20 g/mL và CF là 2 g/mL. Tiếp tục pha loãng đến khi dung dịch thuốc có hàm lƣợng PRC là 15 g/mL, IBU là 10 g/mL và CF là 1 g/mL và có hàm lƣợng P RC là 7,5 g/mL, IBU là 5 g/mL và CF là 0,5
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
4 7,50 5,00 0,50 7,52 4,90 0,49 0,21 -2,03 -2,77 5 9,00 6,00 0,60 9,01 5,88 0,58 0,16 -2,04 -2,53 5 9,00 6,00 0,60 9,01 5,88 0,58 0,16 -2,04 -2,53 6 10,50 7,00 0,70 10,52 6,86 0,68 0,16 -1,94 -2,45
Nhận xét: Kết quả thu đƣợc ở bảng 3.25. cho thấy khi nồng độ nhỏ thì sai số lớn . Trong mẫu thuốc có tỷ lệ nồng độ các chất PRC:IBU:CF là 300:200:20 nên ta dễ dàng xác định đƣợ c nồng độ chính xác của PRC và IBU vì có hàm lƣợng lớn . Tuy nhiên việc xác định nồng độ CF gặp khó khăn vì hàm lƣợng nhỏ nên mắc sai số lớn hơn . Vì vậy để xác định đồn g thời hàm lƣợng PRC, IBU và CF trong mẫu thuốc ibuparavic đƣợc chính xác ta sử dụng phƣơng pháp thêm chuẩn .
Pha các dung dịch chuẩn PRC, IBU, CF có CPRC = 25 μg/mL, CIBU = 25 μg/mL và CCF = 25 μg/mL. Sau đó , lấy 12,5 mL dung dịch thuốc ibuparavic cho vào 10 bình định mức 25 mL, đánh số thƣ́ tƣ̣ rồi tiến hành thêm lần lƣợt thể tích các dung dịch chuẩn PRC, IBU và CF nhƣ bảng 3.26, sau đó định mƣ́c bằng dung dịch HCl 0,1M.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.26. Thành phần các dung dịch chuẩn PRC, IBU và CF thêm vào dung dịch mẫu Ibuparavic
Mẫu Vthuốc (mL) VPRC (mL) VIBU (mL) VCF (mL)
1 12,5 2,0 2 12,5 3,0 3 12,5 4,0 4 12,5 5,0 5 12,5 1,0 6 12,5 0,5 7 12,5 0,5 8 12,5 1,0 9 12,5 6,0 10 12,5 2,0 2,0 Trong đó:
Vthuốc là thể tích mẫu thuốc Ibuparavic có chứa hàm lƣợng tƣơng đƣơng PRC là 7,5 g/mL, IBU là 5 g/mL và CF là 0,5 g/mL.
VPRC là thể tích PRC có nồng độ tƣơng ứng làCPRC = 25 μg/mL thêm vào dung dịch mẫu.
VIBU là thể tích IBU có nồng độ tƣơng ứng là CIBU = 25 μg/mL thêm vào dung dịch mẫu.
VCF là thể tí ch CF có nồng độ tƣơng ứng là CCF = 25 μg/mL thêm vào dung dịch mẫu.
Đem quét phổ ở bƣớc sóng tƣ̀ 210-285nm và dùng kết quả đo độ hấp thụ quang để tính toán xác định hàm lƣợ ng PRC, IBU và CF qua đó tính độ thu hồi của chúng.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn [PRC] 2,0 3,0 4,0 5,0 0 0 0,5 0 0 0 [IBU] 0 0 0 0 1,0 0,5 0 0 0 2,0 [CF] 0 0 0 0 0 0 0 1,0 6,0 2,0 CPRC 7,50 7,50 7,50 7,50 7,51 7,51 8,01 7,50 7,50 7,51 CIBU 4,97 4,98 4,99 5,00 5,95 5,45 4,95 4,96 5,01 6,96 CCF 2,48 3,47 4,46 5,45 0,49 0,49 0,49 1,48 6,44 2,47 Rev% CPRC - - - - - - 101,54 - - - Rev% CIBU - - - - 95,33 98,54 - - - 99,02 Rev% CCF 98,81 98,89 98,93 98,95 - - - 98,45 98,97 98,71 Trong đó:
C0PRC, C0IBU và C0CF (μg/mL) là hàm lƣợng PRC, IBU và CF trong thuốc ibuparavic trƣớc khi thêm chuẩn.
[PRC], [IBU] và [CF] là lƣợng chất chuẩn PRC, IBU và CF thêm vào mẫu pha chế.
CPRC, CIBU và CCF (μg/mL) là hàm lƣợng PRC, IBU và CF xác định đƣợc sau khi thêm chuẩn.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Nhận xét: Qua bảng số liệu trên cho thấy độ thu hồi của PRC, IBU và CF là từ 95,33% đến 101,54% . Chƣ́ng tỏ dùng phƣơng pháp thêm chuẩn để tính hàm lƣợng các chất PRC, IBU và CF trong mẫu thuốc ibuparavic có độ đúng tốt.
Kết luận : Tƣ̀ các kế t quả xác định hàm lƣợng P RC, IBU và CF trong các mẫu tƣ̣ pha ch ế cũng nhƣ trong mẫu thuốc i buparavic ta thấy , phƣơng pháp trắc quang có độ đúng , độ lặp lại tốt và độ thu hồi cao , điều đó cho phép ƣ́ng dụng phƣơng pháp vào phâ n tích kiểm tra chất lƣợng , thành phần thuốc một cách đơn giản và nhanh chóng.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
- Bƣớc sóng thích hợp để quét phổ từ 210285 nm và ứng với độ hấp thụ quang cực đại của dung dịch PRC λmax = 244 nm, IBU λmax = 220 nm và CF λmax = 272 nm.
- Trong môi trƣờng axit HCl 0,1M độ hấp thụ quang của PRC, IBU và CF ổn định và đạt cực đại.
- Khoảng thời gian tối ƣu để tiến h ành thí nghiệm đo quang là khoảng 30 phút sau khi pha và tại nhiệt độ phòng.
- Kiểm tra đƣợc tính cộng tính độ hấp thụ quang của các chất trong hỗn hợp đối với các mẫu giả tự pha. Xác định đƣợc LOD, LOQ và khoảng tuyến tính của PRC là từ 0,2 đến 25 g/mL, của IBU là từ 1 đến 40 g/mL và của CF là từ 0,2 đến 40 g/mL.
2. Đánh giá độ tin cậy của phƣơng pháp trắc quang sƣ̉ dụng chƣơng trình lọc Kalman đối với các mẫu tự pha chủ yếu mắc sai số lớn đối với cấu tử có nồng độ nhỏ khi nồng độ của cấu tƣ̉ này nhỏ hơn cấu tƣ̉ kia 10 lần thì mắc sai số > 10%. 3. Xác định đƣợc đồng thời P RC, IBU và CF trong mẫu thuốc ibuparavic tự pha với độ lặp, độ đúng, độ chính xác cao. Độ thu hồi của PRC, IBU và CF là 95,33101,54%
Quá trình nghiên cứu cho thấy phƣơng pháp có độ đúng , độ lặp và độ thu hồi cao có sƣ̉ dụng chƣơng trình lọc Kalman trong xử lý kết quả đo qua ng để xác định hàm lƣợng PRC, IBU và CF với thời gian nhanh, thao tác đơn giản điều đó cho thấy hi vọng của phƣơng pháp này là rất lớn nếu đƣợc áp dụng vào thực tế và đặc biệt áp dụng vào các trung tâm kiểm nghiệm thuốc ở các địa phƣơng.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn