Phƣơng pháp thực hiện các nội dung nghiên cứu

CHƢƠNG 2 : NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3. Phƣơng pháp thực hiện các nội dung nghiên cứu

2.3.1. Quy trình trích ly trà xanh:

Hình 2. 3 Quy trình trích ly trà xanh

 Ngun liệu và xử lý nguyên liệu

Nguyên liệu trà xanh tƣơi, không bị úa dập, đƣợc vận chuyển từ Lâm Đồng về Nƣớc : trà = 5:1 Trà xanh Xử lí sơ bộ Diệt men Xay nhỏ Đun cách thủy Lọc thơ Dịch trà trích ly Nƣớc Nhiệt độ: 1000C Thời gian: 10 phút Nhiệt độ: 900C Thời gian: 10 phút Ly tâm Lọc tinh

 Diệt men

Cần tiến hành diệt men nhằm vơ hoạt enzyme polyphenoloxydase có trong lá trà để hạn chế sự sẫm màu gây ảnh hƣởng cho các công đoạn tiếp theo nhƣ xay và lọc. Công đoạn sao diệt men này đƣợc tiến hành ở 1000

C trong thời gian 10 phút.  Xay nhỏ

Mục đích của cơng đoạn xay nhỏ là tạo điều kiện thuận lợi để trích ly hồn tồn các hợp chất trong lá trà. Trà xanh sau khi diệt men sẽ đƣợc xay trong máy xay sinh tố ở mức 1, trong thời gian 3 phút. Trong quá trình xay, bổ sung nƣớc cất theo tỷ lệ 5:1.

 Đun cách thủy

Mục đích của cơng đoạn này là trích ly hồn tồn tất cả các hợp chất hoa tan có trong trà xanh. Hỗn hợp sau khi xay xong sẽ cho vào Becker và tiến hành đun cách thủy ở 900C, trong thời gian 10 phút.

 Lọc thơ

Mục đích của cơng đoạn này tách loại bỏ phần bã để lấy phần dịch trà. Lọc thô bằng vải lọc để loại bỏ phần bã lớn.

 Ly tâm

Mục đích là để phân riêng phần rắn hay bã nhỏ trong hỗn hợp trà để thuận tiện cho quá trình lọc tinh. Sử dụng máy ly tâm với tốc độ 1000 vòng/phút, thời gian là 1 phút.

 Lọc tinh

Mục đích loại bỏ các bã nhỏ để dịch trà trong hơn. Tiến hành lọc bằng thiết bị lọc chân không, sử dụng giấy lọc Whatman số 1.

Dịch trà thu đƣợc có nồng độ polyphenol là 1,491g/l. Dịch trà này đƣợc coi là dịch gốc (100%) để từ đây chuẩn bị các dung dịch trà với nồng độ khác nhau dùng trong các thí nghiệm.

2.3.2. Chuẩn bị dung dịch chitosan và dung dịch chitosan-trà xanh

Chuẩn bị dung dịch chitosan 0.5% và 2%: hút chính xác 10ml axit axetic cho vào bình định mức 1000ml, sau đó định mức bằng nƣớc cất. Cân chính xác 2.5g hoặc 10g chitosan chuyển vào becher 800ml, cho thêm 500ml dung dịch axit axetic 1% vào và đem lắc với tốc độ 30 vòng/phút trong 24h. (Melissa D. Hammond, 2001)

Chuẩn bị dung dịch chitosan-trà xanh: cách chuẩn bị tƣơng tự nhƣ chuẩn bị dung dịch chitosan ở trên, tuy nhiên ở đây chúng tôi dùng các dung dịch trà xanh với nồng độ khác nhau thay nƣớc cất. Hút chính xác 10ml axit axetic cho vào bình định mức 1000ml, sau đó định mức bằng dung dịch trà xanh ta đƣợc dung dịch I. Cân chính xác 2.5g hoặc 10g chitosan chuyển vào becher 800ml, cho thêm 500ml dung dịch I vào và đem lắc với tốc độ 30 vòng/phút trong 24h. (Ubonrat Siripatrawan, 2010)

2.3.3. Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm

Trong nghiên cứu này chúng tơi bố trí thí nghiệm theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên. Mỗi thí nghiệm đƣợc thực hiện với 3 lần lặp, kết quả của thí nghiệm là giá trị trung bình của các lần lặp với độ tin cậy 95%.