Collagen sẽ tr nên l ng lẻo, đồng th i bị phá hủy một phần do đĩ khi trích ly sẽ làm cho Collagen từ từ tan ra thành dung dịch keo (Gelatin). Collagen phân gi i biến thành Gelatin. Theo Hofmeister:
C102H149N31O38 + H2O C102H151N31O39 Collagen Gelatin
Kết qu phân gi i Collagen ngồi s n phẩm chính là Gelatin con cĩ gelatone và genlatose
C102H149N31O38 + H2O C102H151N31O39 + C47H70O19 +7 N2
Colagen gelatone gelatose
Đây là quá trình phân gi i gelatin nếu ta tiến hành trích nhiệt độ và th i gian khơng phù hợp. Nếu như trích ly nhiệt độ càng cao và th i gian càng dài thì sự phân gi i Collagen ngồi t o thành Gelatin cịn cĩ thể s n sinh ra các s n phẩm phân gi i là Gelatone và Gelatose. Do đĩ trong q trình trích ly ta ph i kh o sát nhiệt độ và th i gian phù hợp để đ m b o chất lượng của gelatin
Sau khi trích ta thu đươc một dung dịch sệt, tiến hành lọc bằng v i để lo i b lớp màng da. Đem dung dịch đĩ lọc qua máy lọc chân khơng với chất trợ lọc celite để lo i b bớt t p chất và mỡ
Tiến hành cơ đặc dung dịch nhiệt độ tương ứng trong th i gian 5 – 6 gi để bay bớt hơi nước t o điều kiện thuận lợi cho cơng đo n sấy
2.1.4.5 Sấy, nghiền và b o qu n
Sau khi cơ đặc đổ dung dịch ra khay rồi tiến hành sấy nhiệt độ 60-700C, lúc khơ đem s n phẩm nghiền mịn rồi b o qu n nơi thống mát.
2.2 KI M NGHI M NGUYÊN LI U VÀ GELATIN S N PH M:[1][3][4] 2.2.1 Đ m 2.2.1 Đ m
2.2.1.1 Tiến hành:
Rửa s ch chén sứ rồi cho vào sấy khơ, đem cân đến kh i lượng khơng đổi. Cân chính xác m1 gam Gelatin hay nguyên liệu, đem sấy khơ nhiệt độ 105 – 1100C.
Lấy ra để nguội trong bình hút ẩm. Cân đến kh i lượng khơng đổi m2
2.2.1.2 Cách tính:
Độ ẩm (%) =
2.2.2 Đ tro
2.2.2.1 Tiến hành:
Sau khi đo độ ẩm, lấy s n phẩm đem nung nhiệt độ 550 – 6000C, để nguội bình hút ẩm và cân cân phân tích đến kh i lượng khơng đổi
2.2.2.2 Cách tính:
Tổng lượng tro (%) = * 100
2.2.3 Xác đnh acid amin Hydroxyproline trong dung d ch th y phân b ng ph ng pháp quang ph : ph ng pháp quang ph :
m1 - m2 m1
Kh i lượng tro Kh i lượng mẫu khơ
Chu n b dung d ch chu n : 25 mg Hydroxyproline tinh khiết hịa trong 250 ml
nước (100µg/ml). Tiếp theo lấy :50, 75, 100, 150 µl dung dịch này pha thành 1 ml bằng nước cất 4 ng.
Sự oxy hĩa Hydroxyproline x y ra khi thêm 1 ml Cloramine B vào mỗi ng, lắc kỹ và
để nhiệt độ phịng trong 20 phút. Lượng dư Cloramine B được phân hủy bằng cách thêm 1 ml HClO4 3,15M trộn đều và lắc kỹ để dừng quá trình oxy hĩa. Sau 5 phút, cho 1ml 20% p-dimethylamino-nobenzaldehyde để thêm vào ng và lắc đều. ng thí nghiệm được đặt vào bể điều nhiệt 600C trong 20 phút và sau đĩ làm nguộn trong nước kho ng 5 phút. Tiếp theo 5 ml Ethyl Cellosolve được them vào mỗi ng để cĩ thể tích tổng là 10 ml. Kết qu dung dịch chứa 0,5; 0,75; 1,00 và 1,50µg Hydroxyproline như mong mu n. Độ hấp thụ đo được =557 nm (màu đ thẩm) sử dụng cuvet 10ml, chiều dài 2,00 cm. Nước cất được dùng như mẫu đ i chuẩn. Hệ s tương quan khơng thấp hơn 0,999 . Kết qu đo được xử lý bằng phương pháp th ng kê tốn học độ tin cậy p = 0,90 hoặc p = 0,95 cho kho ng tin cậy tính tốn được