3. Thu nhận các dịch chiết từ cây Bằng lăng nƣớc 1 Thu nhận các dịch chiết
3.3.2.1.Hợp chất M20 (Axit 2,7,8-Tri-O-methylellagic)
Rửa giải cột bằng hệ dung môi chloroform-metanol ( 5:1), thu đƣợc khối chất rắn vơ định hình, rửa nhiều lần bằng metanol thu đƣợc chất kết tinh màu trắng (252 mg), không tan trong các hệ dung môi chloroform-metanol và metanol, nhiệt độ nóng chảy: 296–297 0C,
Phổ FT-IR (ν cm-1
): 3514,6 (OH) ; 2965/2865 (CH) ; 1738/1665 (CO); 1606 (C=C).
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Phổ HR-MS positive (m/z): 345,06479 [M+H]+ Phổ 1 H-NMR (500MHz, D2O, TMS, δ ppm): 6,969 (1H, s, H-5), 7,683 (1H, s, H-5’), 4,112 (3H, s, 4-OCH3), 3,952 (3H, s, 3’-OCH3), 3,759 (3H, s, 4’-OCH3). 13 C-NMR (125MHz, DMSO, TMS, δ ppm): 109,63 (C-1); 139,32(C- 2); 144,41(C-3); 144,82 (C-4); 119,18 (C-5); 114,79 (C-6); 158,48 (C-7); 111,10 (C-1’); 139,01(C-2’); 140,72 (C-3’); 153,93(C-4’); 107,54 (C-5’); 110,61(C-6’); 158,44 (C-7’); 62,24 (4-OCH3); 61,68 (3’-OCH3); 56,65 (4’- OCH3). 3.3.2.2. Hợp chất M40 ( Cyclitol)
Lấy 73g cặn metanol khơ cịn lại đem thủy phân trong 100ml NaOH 5% đun hồi lƣu trong 8 giờ. Dịch sau khi thủy phân lọc và rửa nhiều lần đƣợc 43,3g cặn khô và dịch metanol. Tiếp tục lấy dịch metanol sau khi thủy phân axit hóa bằng H2SO4 98% đến pH=6, lọc thu đƣợc cặn và dịch. Cô quay phần dịch thu đƣợc 27,7g cặn thô.
Lấy 27,7g cặn thô ở trên đem tách trên cột silicagel, rửa giải cột bằng hệ dung môi chloroform-metanol và metanol – nƣớc tăng dần theo độ phân cực (0-100%), dịch rửa giải thoát ra từ cột đƣợc thu ở những thể tích nhỏ (510ml/phân đoạn). Kiểm tra cặn thu đƣợc bằng sắc ký lớp mỏng và hiện màu bằng thuốc thử vanilin - H2SO4 5% sau đó các phân đoạn giống nhau đƣợc dồn lại rồi đem cất loại dung môi.
Rửa giải cột bằng hệ dung môi chloroform-metanol ( 1:1), thu đƣợc khối chất rắn vơ định hình, rửa nhiều lần bằng metanol thu đƣợc chất kết tinh màu trắng không tan trong các hệ dung môi chloroform-metanol và metanol. Chất bột rắn trắng (350 mg), nhiệt độ nóng chảy: 212 0
C.
Phổ FT-IR νmax (cm-1): 3316 (rộng); 2924; 1446; 1249; 1050; 1073; 1005; 897; 735.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Phổ ESI-MS positive (m/z): 162,83892 [M+H-H2O]+ , Phổ 1 H-NMR (500MHz, DMSO, TMS, δ ppm): 3,34 (2H, m, H-1 và H- 3); 3,69 (1h, m, H-2); 3,11 (2H, m, H-4 và H-6); 2,90 (1H, m, H-5); 4,454/4,460 (1H; d, J=3Hz, 2-OH); 4,345/4,334 (2H; d, J=5,5Hz, 1-OH/3- OH); 4,488/4,479 (2H; d, J=4,5Hz, 4-OH/6-OH); 4,545/4,537 (1H; d, J=4Hz, 5-OH). Phổ 13 C-NMR (125MHz, DMSO, TMS, δ ppm): 72,74 (C-1 và C-3); 72,62 (C-2); 71,86 (C-4 và C-8); 75,23 (C-5).
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn